“咳喘宁”贴膏皮肤用药毒性实验研究

1、“咳喘宁贴膏皮肤用药毒性实行研究王晶，关东升，陈淑彦，司小兵摘要：目的：探究“咳喘宁贴膏皮肤用药的宁静性。要领：通过对康健家兔皮肤急性毒性试验、康健豚鼠皮肤刺激性试验及皮肤过敏性试验，不雅察“咳喘宁贴膏对动物经皮肤用药的急毒、刺激和过敏性。效果：“咳喘宁贴膏对家兔完备皮肤和破坏皮肤未引起急性毒性反响；对豚鼠完备皮肤和破坏皮肤有轻度刺激性，但给药后48h，这种刺激性消散；对豚鼠完备皮肤无致敏作用。结论：“咳喘宁贴膏临床用药宁静、无毒。关键词：“咳喘宁贴膏；急性毒性；皮肤刺激性；皮肤过敏性“咳喘宁贴膏是甘肃中医学院刘世琼传授颠末多年临床验证，并结合当代药理研究，重复挑选研制而成的纯中药外用穴位贴剂

2、。其应用简朴、经济，多年来常在“三伏天用于治疗支气管哮喘和慢性支气管炎，疗效非常必定。为研究其用药的宁静性，本实行举行了“咳喘宁贴膏皮肤用药的动物毒性实行研究，并为本产物的开拓提供理论根据。1质料1.1实行动物康健成年家兔12只，牝牡各半，体重2.00.5kg兰州生物成品研究所动物实行室提供，及格证号：医动字第14-004号；康健成年豚鼠36只，牝牡各半，体重30050g中国农业科学院兰州兽医研究所动物实行室提供，及格证号SXK甘2022-0005。1.2实行药品“咳喘宁贴膏由白芥子、甘遂、延胡索、苏子、生姜汁等构成，空缺纱胶贴剂有三层纱布和一层无刺激性胶布构成，以上两种受试物规格为：皮肤急性

3、毒性试验为710，皮肤刺激性试验为45，皮肤过敏试验为33，均由“咳喘宁贴膏课题组提供；2，4二硝基氯代苯上海试剂一厂，批号001201，阐发纯硫化纳莱阳化工实行厂，批号20220909。2要领和效果2.1“咳喘宁贴膏的皮肤急性毒性试验动物分组：将12只家兔，按随机数字表法分为3组，每组4只，牝牡各半。A组大剂量药物贴剂组，即贴敷A组，为临床用药药量的6倍；B组小剂量药物贴剂组，即贴敷B组，为临床用药药量的3倍；组空缺纱胶贴剂比较组。操纵要领：按文献1要领，用3份硫化钠，1份皂粉，7份淀粉，加水配成糊状软膏，将家兔右侧背部脱毛702而不受伤，24h后，用75%乙醇消毒。按文献2-3要领，A组于

4、脱毛处敷贴“咳喘宁贴膏含生药量4g，8h后去掉，天天1次，共贴6次；B组于脱毛处敷贴“咳喘宁贴膏含生药量4g，6h后去掉，隔天1次，共贴4次；组脱毛处敷贴滴4L生理盐水的空缺纱胶贴剂。然后轻轻按压2次，再用不干胶布结实，分笼豢养。末次撤除受试物后，用温水撤除残留受试物，于去掉受试物1、24、48、72h至7d，逐日不雅察动物的体重、皮肤毛发、饮食、二便、呼吸、眼和黏膜的变革、精力状态、四肢运动及殒命环境。假设对完备皮肤无毒性反响，那么在家兔左侧背部脱毛702，24h后，用碘伏和75%乙醇消毒皮肤，再用消毒处置惩罚的400号细砂纸在脱毛处造成擦伤，使皮肤出现麋集出血点，以渗血为度，立即在擦伤部位

5、敷贴受试物。详细要领及不雅察指标同上，并举行三组的比较比力。如遇殒命，应实时举行尸检和肉眼不雅察，当肉眼可见病变时，应举行病理构造学查抄。HT“咳喘宁贴膏凹凸剂量应用后，完备皮肤及破坏皮肤家兔皮毛光芒正常，对家兔的饮食、二便、呼吸、眼和黏膜变革，精力状态，四肢运动均未造成任何影响，破坏皮肤均在给药后第2d出现点状血痂，第7d内脱痂病愈。在不雅察期14d内未出现急性毒性反响，无一只家兔殒命。与比较组体重比力，效果见表1。表“咳喘宁贴膏对皮肤急性毒性试验家兔体重的影响表1表现:A、B组与组比力无明显性差异(P0.05)，说明本药对家兔体重无影响。2.2“咳喘宁贴膏的皮肤刺激性试验4-5动物分组：将

6、12只豚鼠按随机数字表法随机分为A组完备皮肤组、B组破坏皮肤组2组，每组6只，牝牡各半。操纵要领：按文献1要领，于给药前24h将豚鼠脊柱两侧对称脱毛2块而不损伤皮肤，每块去毛面积约45约相称于豚鼠体外貌积的10%，详细操纵要领同皮肤急性毒性试验脱毛法。给药接纳摆布侧自身比较。A组用75%乙醇消毒后，左侧脱毛处敷贴“咳喘宁贴膏含生药量4g，右侧敷贴滴生理盐水4L的空缺纱胶贴剂，8h后去掉，天天1次，一连给药6d。B组用碘伏、75%乙醇消毒皮肤，再用消毒处置惩罚的400号细纱纸在脱毛处造成擦伤，使皮肤出现麋集出血点，以渗血为度，立即在擦伤部位敷贴受试物，详细要领同A组完备皮肤组，天天1次，一连给药

7、6d。末次敷贴受试物后，用温水撤除残留受试物，别离于去掉受试物后1、24、48、72h不雅察涂抹部位有无红斑和水肿环境，是否有色素冷静、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲保按文献6中“皮肤刺激性反响评分尺度逐日举行刺激反响评分，记载各组逐日的评分值，盘算刺激指数均匀值:刺激指数均匀值=红斑形成总分+水肿形成总分/动物总数，按文献6中“皮肤刺激强度评价尺度评价皮肤刺激强度。见表2。颠末不雅察创造，豚鼠完备皮肤组与破坏皮损组敷贴“咳喘宁贴膏后1h，豚鼠皮肤用药部位有不显着红斑，个体出现显着红斑，无水肿，刺激强度为轻度刺激性，但以上皮肤改变在去除药物后48h内渐渐消散，各组自身比较部位均无红斑、水肿出现，刺激

8、强度小于0.56，为无刺激性反响。两组皮肤均无色素冷静、出血点、粗糙和菲薄环境，损伤皮肤组动物皮肤有点状血痂，至48h开始脱落，给药区与其自身比较区无显着差异P0.05，故血痂是擦伤所致，非药物引起，且破坏皮肤组动物皮肤光芒程度、弹性与完备皮肤组无明显差异。表2“咳喘宁贴膏对豚鼠皮肤的刺激试验注：A无刺激性;B轻度刺激性2.3“咳喘宁贴膏的皮肤过敏试验3，7皮肤过敏试验是通过动物重复打仗受试物后，不雅察机体免疫体系在皮肤上的反响。是应用受试物后产生免疫学通报的一种皮肤反响。在动物初次打仗供试品一段时间后，再次举行供试品的引发打仗，可不雅察动物是否已出现过敏状态，然后再通过不雅察引发打仗后的反响

9、来判断受试动物有无产生过敏反响。动物分组：将24只豚鼠按随机数字表法随机分为3组，即A组：阴性比较组生理盐水；B组：药物贴剂组“咳喘宁贴膏；组：阳性比较组用阐发纯丙酮临用前配制成1%的致敏浓度和0.1%的引发浓度，即阳性致敏物为1%2，4二硝基氯代苯DNB，阳性引发物为0.1%DNB。每组8只，牝牡各半。操纵要领：(1致敏打仗：给药前24h，将康健豚鼠背部脊柱左侧按文献1要领脱毛，详细操纵要领同皮肤急性毒性试验脱毛法，脱毛区为33。用温水洗净豚鼠背部脊柱左侧皮肤后，A组左侧脱毛区敷贴滴0.2L生理盐水的空缺纱胶贴剂；B组左侧脱毛区敷贴“咳喘宁贴膏含生药量0.2g；组左侧脱毛区敷贴滴1%DNB0

10、.2L空缺纱胶贴剂。三组受试物均贴敷6h，试验第7d和第14d以同样要领各重复1次，共计3次。(2引发打仗：于引发打仗敷贴前24h，再次在右侧对称部位脱毛33,详细要领同上。于致敏打仗末次给药后14d第28d在各组动物背部右侧脱毛区，A组敷贴滴0.2L生理盐水的空缺纱胶贴剂;B组敷贴“咳喘宁贴膏含生药量0.2g;组敷贴滴0.1%DNB0.2L空缺纱胶贴剂结实，三组均贴敷6h后，去除并用温水洗净受试物，马上不雅察。然后于24、48、72h再次不雅察皮肤过敏反响环境，按文献6中“皮肤过敏反响程度的评分尺度赐与评分，盘算各组各时间均匀分值，以反响受试物的致敏强度，同时不雅察豚鼠是否有站立不稳、休克等

11、满身过敏反响，按公式盘算致敏反响产生率：致敏反响产生率=有过敏反响动物数无论程度轻重/动物总数100%，按文献6中“皮肤致敏性评价尺度根据致敏反响产生率评价致敏性。效果见表3。表3“咳喘宁贴膏对豚鼠皮肤过敏反响分值及评价药物贴剂组与阴性比较组致敏引发打仗后不雅察，马上至72h引发打仗部位均未出现红斑及水肿，致敏率为0，阳性比较组自引发给药6h后，马上不雅察该组8只豚鼠皮肤：2只出现显着红斑为22分，此中1只伴委曲水肿为11分；6只出现严峻红斑为36分，此中1只伴皮肤隆起约1水肿为31分，此中3只伴委曲水肿为13分，总积分29分，24h开始消退总积分为20分，48h总积分15分，72h后可见红斑

12、及水肿，总积分为10分，致敏率100%。与A、B组比力，有显着差异，表白“咳喘宁贴膏对豚鼠皮肤无致敏作用。3结论支气管哮喘及慢性支气管炎是临床上常见又难治的呼吸道疾病，无论中医西医如今对其都缺乏抱负的治疗要领。“咳喘宁贴膏是经导师多年临床验证，并结合当代药理研究，重复挑选研制而成的用于治疗支气管哮喘及慢性支气管炎行之有用的外用穴位贴剂。本贴剂敷贴于穴位外貌，一是通过透皮汲取而发挥药物自己的治疗作用；二是通过对相干经络腧穴的刺激而发挥经络体系的调解作用；三是该药贴多年来常在“三伏天利用，能起到“时间疗法作用，三重治疗而到达健脾益肾、落气平喘、化痰止咳的综合治疗作用，越发有用地促使全愈。“咳喘宁贴

13、膏免疫学实行8也表白，该贴剂能进步机体的免疫成效，有较好的化痰平喘作用。本实行效果表白：“咳喘宁贴膏岂论外用于家兔完备皮肤，照旧破坏皮肤均无急性毒性；外用于豚鼠完备皮肤，特殊是破坏皮肤有轻度刺激性，但给药后48h内可自行消散，其试验利用剂量是临床用药药量的6倍，且由于“咳喘宁贴膏在临床应用时不是重复在同一穴位贴敷，故不影响药物治疗的一连性；外用于豚鼠皮肤无过敏反响。从毒理学方面说明“咳喘宁贴膏穴位贴敷治疗支气管哮喘和慢性支气管炎是宁静的外用制剂，值得临床推广应用及开拓新产物。由于本处方不含毒性药物，故按文献6要求无需举行恒久毒性试验。参考文献：1郝庆幸.实行动物学.第2版.上海：第二军医大学出书社，2002：184-185.2谢秀琼.中药新制剂开拓与应用.北京：人民卫出生版社，2002：565-570.3钱芳，杨戒骄，杜琪,等.伤疡愈软膏皮肤毒性实行研究J.中国药房,2022,157：405-406.4陈奇.中药药理实行要领学.北京:人民卫生出书社，1