上师大免疫学细

1、1自然免疫性/先天免疫性/非特异免疫性：机体在接触外来的侵染物之前，防御机制就已经 存在的特性模式识别受体：主要表达于固有免疫细胞表面、非克隆性分布、可识别一种或多种病原体 相关分子模式的识别分子。有CR3、CR4补体受体，糖结合受体，甘露糖受体、Toll样受体 等。获得免疫性/特异免疫性：机体通过抗原诱导获得免疫应答而产生的对非自身物质的抵抗 性。免疫应答：从抗原刺激作用开始，机体抗原特异性淋巴细胞识别抗原后，发生一系列变化 （活化，增殖，分化或失去活性）并表现出一定的效应（体液免疫和细胞免疫）。免疫系统构成（填）：免疫组织器官、免疫细胞、免疫分子抗原：是一类能够诱导机体免疫应答并能与相应抗

2、体或T细胞受体发生特异反应的物质。天然抗原的类别（填）：细胞、细菌和病毒；蛋白质类抗原；糖类抗原；脂质抗原；核酸 抗原。超抗原：只需极低浓度即可诱发最大的免疫效应的免疫刺激分子。包括外源性超抗原和内 源性超抗原超抗原的作用机制（简答）超抗原被T细胞识别之前不需经APC处理，它不是嵌在MHC分子的凹槽中，而是附着于凹 槽的外侧，直接与MHC-II类分子a链、8链的a 1区、3 1区的多肽结合槽以外的部位结合， 并以完整蛋白的形式被呈递给T细胞。作为抗原应具备哪些条件（填、简）一种物质能否作为抗原，既取决于动物能否对它发生免疫应答，也取决于抗原物质本身，即 取决于它的组成、大小、形状等分子理化性质

3、。抗原决定簇：位于抗原物质分子表面或其他部位的具有一定组成和特殊结构的化学基团。 功能是与免疫系统中淋巴细胞上的受体结合以及与相应的抗体分子结合。抗原决定簇分类（填空）：顺序抗原决定簇、结构抗原决定簇抗体：是一种糖蛋白，存在于血清蛋白的Y -球蛋白组分，能与抗原特异性非公价结合， 引起一系列的生物学效应抗体的基本结构（简答）由两条重链和两条轻链组成的免疫球蛋白，Ig分子能被蛋白酶解为两个片段。近N端为Fab 片段能与抗原非共价结合，其氨基酸变异大，称为可变区（V区），可变区内三个高变区CDR1， CDR2和CDR3构成抗原结合位。近C端为Fc片段有结合细胞和激活补体等生物学效应功能； 轻链和重

4、链的可变区是由一个结构域Vl或Vh形成的，轻链的恒定区由一个结构域CL形成， 而重链的恒定区由3-4结构域，C 1，C 2和R3或C“4构成。C 1和R2之间有铰链区。H HHHHH15.Ig的种类有哪些？根据什么特性来分类的？各自的功能有何差异？（简答）根据重链类别的不同，抗体可分为IgA,IgD,IgE,IgG,IgM5种同种型和若干亚型，5种免疫球蛋 白在结构和功能上呈现不同的特点。IgA常以二聚体形式存在于分泌液中，参与粘膜抗感染 免疫。IgM常以五聚体形式存在，IgE参与过敏反应。IgG是作用最广泛，含量最多的抗体， 参与多种免疫反应，还有许多与Ig类似的免疫球蛋白超家族。B细胞的分

5、化发育过程中，Ig基因发生了什么变化？（简答）免疫球蛋白基因由四类多基因片段V,J,D和C区组成，在胚胎细胞中，这些片段呈分散排列， 在B细胞的发育过程中，V区基因发生V-J或V-D-J重排，与C基因的连接通过转录而得到 成熟的mRNA。抗体多样性是如何形成的？（简答）免疫球蛋白的V-J或V-D-J重排的随机组合及基因重排过程中的连接方式不同，体细胞突变 是造成Ig多样性的主要来源。体细胞突变和Ig种类切换与淋巴细胞特异性的酶AID有关。体液免疫应答与抗体产生规律有什么联系？（简答）抗体的产生过程就是体液免疫应答的过程，T细胞依赖性抗原能诱导抗体产生的初应答和再 应答，再应答产生抗体的速度，数

6、量和亲和力均高于初应答。初应答主要是IgM，再应答主补体系统：由一系列蛋白分子组成，能参与破坏或者清除那些与抗体结合的抗原或细胞。20.补体系统的比较（简、填）替换途役A补体新溶丽！Ag-AbCoI趴岛B及多糖类物质与的朴体成除C1-G9C4, C2-C9因乎，C5-C3新需的二价高子Ca2+,C舟梅耕Y3辑化酶G4b细以因C5传化酶C4b2a3brabd5bJbn作用效慰参与体液免疫锣写体液艘善与伸液免暖有瞥#ft无特昇性天特岸性补体反应的调控（填空）血清中的补体活化调节蛋白：C1NH、S蛋白、I因子、H因子、过敏毒素钝化因子、C4bp。 细胞膜上的调节蛋白：促衰变因子（DAF）、膜辅助蛋白

7、（MCP）、同源限制因子（HRF）、溶 膜抑制剂（CD59）。补体受体：CR1、CR2、CR3、CR4、C3a/C4a-R、C5a-R、C3e-R。补体的生物活性功能（简答）（1）免疫粘附和调理：Ab-Ag复合物黏附于红细胞，血小板，增加复合物的敏感性，增加 粒细胞和巨噬细胞的吞噬作用。（2）膜损伤：在靶细胞膜上形成非专一性离子通道，引起红细胞溶解，有核细胞通透性增 加，G-细菌溶菌。（3）过敏毒素：使肥大细胞释放组胺及其他作用于血管的介质，增加血管的通透性（4）趋化性和化学激动作用：通过趋化性将多形核白细胞吸引到炎症部位，通过化学激动 作用增强这些细胞活性。淋巴细胞循环（简答）淋巴细胞在淋巴

8、组织之间和血液中反复循环交换就是淋巴细胞的循环。小的B细胞和T细胞在没受到抗原刺激之前不表现免疫效应，为“处女”淋巴细胞，当其离 开中枢淋巴器官，通过血液进入外周淋巴组织。进入淋巴结的过程是借助于细胞表面的归巢 受体，可以识别淋巴结皮质部的毛细血管后小静脉上的配体，从而使淋巴细胞得以通过血管 的内皮细胞而到达淋巴结的皮质部，T细胞进入到副皮质区。淋巴结中许多抗原呈递细胞， 包括树突细胞、巨噬细胞及来自皮肤的朗格汉斯细胞由输入淋巴管进入淋巴结。淋巴细胞从 皮质进入髓质，再通过薄壁的输出淋巴管离开髓部回到血管。小的淋巴管汇集到大的淋巴管， 最后汇集入淋巴胸导管，混合的淋巴与血液通过腔静脉回到心脏，

9、开始下次的循环。淋巴细胞循环的意义（简答）（1）增加了淋巴细胞与抗原、侵入物等接触的机会，被活化的淋巴细胞变为效应细胞参 与免疫应答。（2）能使B、T细胞和记忆细胞很快地分布全身的组织和器官怎样区分幼B细胞和成B细胞（实验设计）幼B细胞表达IgM，成B细胞表达IgM和IgD，用GFP标记的抗IgD抗体处理细胞。B淋巴细胞的表面标志（填、简）BCR、CD40 分子、B7 分子、MHC-I、MHC-II 等中枢淋巴器官和外周淋巴器官在功能上有何重要区别？（简答）中枢淋巴器官是淋巴细胞的产生和发育的场所，有骨髓，胸腺，法氏囊（鸟类），外卜周淋巴 是成熟T、B淋巴细胞等免疫细胞定居的场所，也是产生免疫

10、应答的部位。有淋巴结、脾及 与黏膜有关的淋巴组织和皮下组织等。MHC-I类分子和MHC-II类分子的结构功能及表达状况有那些不同？（简）（1）MHC-I类分子含有两条多肽链a链（五个结构域）和8链，其中a 1和a 2区共同形成 了一个寡肽抗原结合槽，结合槽很小。其主要功能是递呈内源性抗原给CD8+TC细胞亚群， 呈现MHC-I类识别。MHC-I类分子表达于所有有核细胞表面。（2）MHC-II类分子由两条非共价相连的。、8多肽链构成，a 和8 1构成a螺旋形成抗原 肽结合槽，结合槽两端开放较大。其主要功能是将外源性抗原呈递给CD4+Th细胞亚群，呈 现MHC-II类限制性识别。HLA-1类和II

11、分子的分型检测方法有何不同？为什么？（实验题）（1）HLA-I类是依据特异性抗体介导的补体系统对靶细胞溶解的原理进行的。实验必须有 HLA标准抗血清，这些标准分型血清中抗体与待检淋巴细胞相应的HLA结合，使抗体分子的 空间构型发生改变而暴露补体结合位，此时加入的补体被活化使淋巴细胞膜上形成孔道而导 致细胞死亡。此后加入台盼蓝或伊红，检测死亡细胞百分率。受损或死亡细胞被染色，此为 细胞毒阳性。提示待检个体HLA抗原型与标准HLA相一致。如果细胞不被染色，则提示为 阴性，说明HLA型别与标准血清不一致。（2）HLA-II表达于B淋巴细胞以及抗原呈递细胞表面，因此HLA-II检测前必须先分离B细 胞

12、，HLA- I类抗原表达于所有的有核细胞，所以B细胞表面除有HLA-I类抗原外，还有I 类A、B、C抗原。所用的DR、DQ标准分型血清先用多个个体血小板吸附除去HLA-I类抗 体。其余操作与HLA-I相同。多克隆抗体制备方案(实验题)抗原制备与纯化：通过基因工程等方式获取抗原蛋白，并通过凝胶过滤，SDS等 方法纯化蛋白，保证最后蛋白含量在10mg以上，并配成溶液使最终蛋白浓度为1mg/ml。佐剂制备：取西咪替丁晶体1g溶于0.9%NaCl溶液中，制成1mg/ml的西咪替丁佐剂。动物免疫：取两只健康成年雄性家兔，用剪刀剪去家兔两后脚掌的部分毛，以酒精及 碘酒消毒皮肤；第一次免疫：用2ml注射器吸

13、取抗原1ml，并于每侧脚掌皮下各注射0.5ml,同时于每侧脚掌 皮各注射0.5ml西咪替丁佐剂；第二次免疫：间隔2周，与第一次免疫方法相同的分别免疫两只家兔。第三次免疫：间隔2周，用2ml注射器吸取抗原1ml，并于每侧脚掌皮下各注射0.5ml。间隔10天，从耳静脉采血1ml，分离血清，以酶联反应吸附法测效价，若达到1:16以上， 则可以采血；若未达到1:16则可以再次免疫，若想得到高亲和性力抗体，可用抗原液注射 免疫。即于1周内注射3次，每次每侧分别注射0.1、0.3、0.5ml。间隔1周再试血。如效 价达到要求应立即放血。颈动脉放血：将兔仰卧，固定于兔台，剪去颈部的毛，切开皮肤，暴露颈动脉，

14、插管， 放血。放血过程中要严格按无菌要求进行。分离血清与保存：将三角烧瓶的血置37温箱1h，再置4C冰箱内3h。待血液凝固 血块收缩后，用毛细滴管吸取血清。于3000rpm离心15min，取上清加入于饱和硫酸铵溶液 然后透析除去盐离子，用含1%BSA对抗体进行适当稀释并加入等量的甘油，然后分装放置 于-20 C冰箱内冷冻。直接/间接双抗夹心法检测未知抗原(细胞凋亡)。(实验题)包被：用pH9.0、0.05M碳酸缓冲液将鼠抗组蛋白抗体稀释至10mg/L.在每个聚苯乙烯 板的孔中加0.1ml，4C过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤液洗三次，每次3分钟(简称 洗涤，下同)。封闭：用5%的脱脂奶粉加入到

15、酶标记板中，封闭酶标记板后，孵育2h。洗涤：弃去孔内液体，用洗涤液洗三次，控干。加样：加一定稀释的裂解液上清液0.1ml于上述已包被的反应孔中，置37C孵育1h。 然后洗涤，阳性对照用紫外光照射的凋亡细胞，阴性对照用未免疫兔的血清，空白组加蒸馏 水。加第一抗体：于各反应孔中，加鼠抗DNA抗体，置37C孵育1h，然后洗涤。或加酶标抗体：于各反应孔中，加辣根过氧化物酶酶标的鼠抗DNA抗体，置37C孵育1h， 然后洗涤。加酶标第二抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的辣根过氧化物酶标的羊抗鼠抗抗体 0.1mloS 37C孵育1h，洗涤。(直接法省略此步骤)加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底

16、物溶液。.，置37C孵育20 分钟。终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05mlo结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越 强，阴性反应为无色或极浅。依据所呈颜色的深浅，以“+”、-”号表示。也可测A值：在 ELISA读数仪上，于波405nm照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1 倍，即为阳性。凝集反应测效价（实验题）（1）制备红细胞悬浮液：a）配制100ml3.8%柠檬酸溶液，置于250ml烧杯中；b）抽取动物血清，置于含3.8%柠檬酸适量的5ml离心管中，30005000rpm离心5min；c）弃上清，用生理盐水重悬，30005000

17、rpm离心5min；d）弃上清，用生理盐水重悬至3%5%悬浮液备用。（2）配制生理盐水：准确称取1.8gNaCl溶于200ml容量瓶中，配制成0.9%的生理盐水。（3）倍比稀释抗血清，做5个稀释度：a）用移液枪的吸打方式依次做1:2,1:4,1:8,1:16,1:325个稀释度；b）在载玻片上做相应标记，并滴加适量不同稀释度的抗血清于相应载玻片上，并设置阳性 对照（未稀释抗血清）和阴性对照（蒸馏水）。（4）用不同稀释度的抗血清观察凝集现象：在不同稀释度的抗体溶液中滴加1滴红细胞悬液，静置15min后，观察现象。免疫双扩散测效价（实验题）（1）配置0.9%NaCl溶液；（2）用0.9%NaCl溶

18、液配置1%琼脂凝胶；（3）用微波炉加热琼脂使之溶化，倒入培养皿制成琼脂平板并打孔，使中央孔圆心与周围 各孔圆心直径为1cm；（4）倍比稀释抗体溶液，做1:2,1:4,1:8,1:16,1:32 5个稀释度；（5）在中央孔加抗原，在四周五个孔中加不同稀释度的抗体；（6）将琼脂平板放入湿盒，37孵育24小时后观察实验结果。主动免疫：抗原刺激一个个体而产生的免疫性，受到免疫的个体再遇到相同的抗原刺激 便会作出强烈的免疫应答。被动免疫：一种特异性抗体人工转移给未受到过某病毒侵染的个体，使该个体获得抗该 病毒的能力。随着抗体在体内被代谢消失，免疫力也消失。过继免疫：通过转移免疫的淋巴细胞到一个未免疫的个

19、体，使其与供体具有同样特异的 免疫性。无应答：抗原特异性的免疫性的免疫耐受现象，指淋巴细胞虽存在，但受到了抑制，对 免疫原的再刺激不能作出反应。免疫耐受：抗原特异性的免疫不应答现象，具有抗原特异型性、可诱导性、可转移性和 非遗传性等特点，是免疫调控的方式之一。动物免疫结果分析（细菌免疫应答）。（大题）免疫注射侧淋巴结出现肿大，并呈现黄色且充血，免疫注射异侧也出现肿大现象，但是较免 疫注射侧小，较未免疫动物同侧大。解释：Td抗原感染0-4h，开始非特异性应答，如机体皮肤表面的自然屏障，吞噬细胞的吞 噬等；4-96h，诱导效应细胞的识别与活化，包括吞噬细胞和肠上皮细胞的模式识别受体Toll 样受体

20、TLR-4等的识别；适应免疫应答发生于细菌感染后96h。抗原经抗原递呈细胞表面 MHC-II分子递呈，并将抗原分解成抗原肽后与T细胞表面的TCR结合，活化第一信号，抗 原递呈细胞表面B7分子与T细胞表面CD28分子结合活化第二信号，然后通过白细胞介素1 和2活化第三信号。经Ras-MAP激酶途径、蛋白激酶G与钙调磷酸酶途径以及蛋白激酶途 径，Th细胞被激活后，开始增殖并表达膜分子CD40L等，CD40L与巨噬细胞、B细胞等表面 的CD40结合并使其活化，促进B细胞增殖分化成浆细胞并使其分泌抗体。发生中和抗原反 应，抗体Fab区与抗原决定簇结合，Fc端与吞噬细胞Fc受体结合，从而将抗原吞噬清除；

21、 发生抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用；还可以活化补体的旁路途径，通过C3等成分形成 稳定的C3bBb复合物可催化产生更多C3b分子，构成了旁路途径的反馈性放大机制。也可 引起细胞免疫应答，产生致敏淋巴细胞。Ti抗原在刺激B细胞产生抗体时不需要T细胞辅助， 只引起体液免疫应答。脾主要是对血液带来的抗原进行应答的场所，而淋巴结是对淋巴中抗原的应答场所。淋巴结 内带有生发中心的次级滤泡聚集，有处于分裂休止状态的B细胞，但是一旦受到抗原刺激， B细胞便母细胞化，母细胞化的细胞比其他淋巴细胞大，因此表现出肿大现象。免疫异侧淋 巴结也出现肿大是因为抗原从注射侧经过毛细淋巴管部分进入毛细血管到达注射异侧，并

22、产 生免疫应答。病毒的特异性免疫应答过程（大题）病毒主要引起宿主的细胞免疫应答，也可引起体液免疫应答。体液免疫：病毒侵入机体，首先要突破皮肤和黏膜保护层，并被吞噬细胞所吞噬，活化T 细胞活化的三信号激活T细胞。T细胞活化信号传导至巨噬细胞、B细胞，并促进B细胞增 殖分化成浆细胞并使其分泌抗体。产生体液免疫应答效应：中和抗原；抗体依赖的细胞介导 的细胞毒作用ADCC和抗体介导的补体依赖的细胞毒作用CDC。细胞免疫：病毒通过宿主蛋白合成工厂合成蛋白（内源性抗原），被泛素化酶作用并进入蛋 白酶体水解成8-11肽，通过抗原肽运载体TAP运送至MHC-I类分子并与其结合，被CD8+杀 伤性细胞表面TCR

23、识别和结合，在协同刺激信号B7-CD28分子的协同作用下可激活前体Tc 细胞。巨噬细胞分泌的IL-1激活T细胞表面IL-2受体，CD4+Th细胞分泌IL-2等细胞因子对 Tc细胞增殖、分化、成熟至关重要。前体Tc细胞活化后，细胞内合成颗粒酶、穿孔素等， 导致靶细胞裂解，胞内大分子流出，最后死亡，而Tc自身表面有一层保护蛋白，从而免受 PFP的伤害。Tc除直接杀伤作用外，在病毒抗原的刺激下，释放多种淋巴因子，扩大和加强 非特异性免疫和特异性免疫。41 .正选择：CDI+和CD8+的双正T细胞TCR基因发生重排时，如果重排的TCR不能与MHC 匹配，则不被选择，并发生程序性细胞死亡的过程。负选择：

24、CD4+或CD8+的单正T细胞具有与自身MHC-肽结合反应潜能的T细胞克隆发生 凋亡。自身反应性T细胞克隆删除的过程。活疫苗：人工定向变异或从自然界筛选获得毒力减弱或基本无毒的病原微生物制成的预 防制品。死疫苗：用物理或化学方法将标准微生物株杀死灭活而制成的预防制剂。多联多价疫苗：为减少注射时的痛苦，将多种疫苗混合在一起的疫苗。详细叙述四种超敏反应及其机制(简答)1型超敏反应是已免疫的机体在再次接触相同抗原时所发生的反应。其特点是：反应 迅速、强烈、消退亦快，通常不遗留组织损伤，其发病有明显的个体差异。机体接受变应原刺激后，有些个体在体内产生相当量的IgE类抗体。IgE具有亲细胞的特性， 能与肥大细胞和嗜碱性粒细胞上的IgE的Fc结合。当相同变应原再次入侵时，变应原与上 述细胞表面的IgE特异地结合，所形成的变应原-IgE复合物能激活肥大细胞和嗜碱性粒细胞 使之脱颗粒。从被排出的颗粒中和细胞内释放出一系列生物活性介质，如组胺、白三烯等， 引起毛细血管扩张，血管通透性增加等。11型超敏反应是抗体(IgG、IgM)直接作用于相应的细胞或组织上的抗原，在补体、 巨噬细胞和K细胞参与下，造成损伤的反应，所以此型超敏反应也称细胞毒型。II型超敏反应的机制有：抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用，