菊花的组织培养(1)ppt课件

1、 经过初中的学习，我们曾经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁衍的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ 组织培育营养繁衍扦插嫁接压条 扦插嫁接压条 愈伤组织胚状体1958，美国，斯图尔德 植物组织培育离体回想知识二思索这个实验阐明了动物曾经分化的细胞核具有什么特性？高度分化的动物体细胞的细胞核有发育成完好个体的潜能多利羊的诞生动物细胞有没有这种才干？曾经分化的细胞，依然具有发育成完好个体的潜能。即细胞的全能性思索为什么曾经分化的细胞具有全能性呢？生物体的每一个细胞都是由同一个受精卵有丝分裂而来的，所以高度分化的细胞含有坚持物种发育所需求的全套遗传信息植物组织培育技术动物的克隆技术一、植物

2、组织培育的实际根底课本P32当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体形状时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就能够表现出全能性，发育成完好的植株。植物组织培育原理：植物细胞的全能性1、培育无病毒植株2、 大规模培育愈伤组织提取紫草素，治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化装品的原料4、基因工程中亦需用到植物组织培育的方法受体细胞为植物细胞植物组织培育的运用： 3、人工种子处理有些作物种类繁衍才干差，结子困难或发芽率低等问题菊花的组织培育什么叫细胞分化？愈伤组织的细胞有什么特点？什么叫脱去分化、再分化？如何控制细胞的脱分化与去分化？ 阅读32-33页第一段处理以下问题二、植物

3、组织培育的根本过程愈伤组织三、掌握几个概念外植体:用于离体培育的植物器官或组织片段.细胞分化： 植物的个体发育过程中，细胞在形状、构造和生 理功能上都会出现稳定性的差别，构成这些差别 的过程叫做细胞分化。愈伤组织：离体的植物组织或细胞，培育一段时间后，会通 过细胞有丝分裂，构成愈伤组织。 愈伤组织的细胞陈列疏松而无规那么，是一种高度液泡化的呈无定外形状的薄壁细胞。脱分化去分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤 组织的过程，称为植物细胞的脱分化或 者叫做去分化。再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进展培育，又可以重新 分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。二、植物组织培育的根本过程影响植物组织培

4、育的要素1、外植体的影响1不同的植物组织培育的难易程度差别很大，容易进展无性繁衍的植物也容易进展组织培育。2)同一种资料，资料的年龄，保管时间也有影响。幼龄、保管时间短的资料容易培育胜利。 菊花的组织培育普通选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝，由于这种嫩枝生理形状良好，易诱导脱分化和再分化。2、营养要素的影响：MS培育基主要成分包括： 大量元素N、P、S、K、Ca、Mg等无机物 微量元素Fe、Mn、B、Zn、Mo、 Cu、Co、I等有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等讨论：他能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培育基的配方相比，MS培育基的配

5、方有哪些明显的不同？P83、84答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时可以维持细胞的浸透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径遭到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培育基以有机营养为主。与微生物的培育不同，MS培育基那么需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必需的大量元素和微量元素两大类。3、激素的影响 在配置好的MS培育基中，经常需求添加植物激素，最常用的是生长素和细胞分裂素。它们是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键要素。 生长素的作用：促进细胞伸长。 细胞分裂素的作用：促进细胞的分裂、生长和发育。1)按照不同的顺序运用

6、这两类激素，会得到不同的实验结果。使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂、也分化同时使用分化频率高2)当同时运用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向 课本P33使用比例实验结果生长素细胞分裂素利于根的分化，抑制芽的分化生长素细胞分裂素利于芽的分化，抑制根的分化生长素=细胞分裂素促进愈伤组织的生长所以植物激素的浓度、运用的先后顺序以及用量的比例等都会影响实验结果。留意:不是一切外植体都需求植物激素，菊花嫩枝的组织培育比较容易，因此不用添加植物激素。4、消毒和灭菌对植物组织培育的影响 如外植体的消毒、器械的灭菌不

7、彻底会导致整个实验前功尽弃。5、其它要素的影响 PH 5.8左右 温度 1822 光照 普通前14d进展暗培育，构成愈伤组织后进展光照，由于叶片中的叶绿素只需在有光照的条件下才干构成，普通光照12h/d。植物组织培育过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素生长素愈伤组织芽根细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素再分化植物细胞培育不需求光需求光影响植物组织培育的要素资料的种类、年龄及保管时间长短等营养植物激素消毒和灭菌PH、温度、光照等条件五、实验操作1、植物组织培育的操作流程 制备MS固体培育基 外植体的消毒 接种 培育 移栽 栽培2、各步详细操作及本卷须知1MS固体培育基的配制1配制各种母液为什

8、么？无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保管激素类、维生素类以及用量较小的有机物普通可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液用母液配制培育基时，需求根据各种母液的浓缩倍数，计算用量2配制培育基 配制培育液 调PH 培育基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml，由于菊花的茎段的组织培育比较容易，因此不用添加植物激素3灭菌分装好的培育基连同其他器械一同进展高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝2外植体消毒2、消毒流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷悄然刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 酒精处置用无菌吸水纸吸干外植体外表的水分，放入体积分数

9、为70的酒精中摇动23次，继续67s，立刻将外植体取出，在无菌水中清洗 消毒液处置取出后用无菌吸水纸吸干外植体外表的水分，放入质量分数为0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液本卷须知： 1.在消毒过程中，我们既要思索药剂的消毒效果，又要思索外植体的耐受才干，不同药剂不同植物资料甚至不同器官要区别对待。 2.外植体灭菌用过的有毒药品要妥善处置氯化汞以免引起环境污染。普通搜集后一致交给有关专业部门处置。思索题： 为什么要对外植体进展一系列的消毒？对外植体的消毒需求留意什么？ 外植体资料的体积小抗性很差，刚取回来的外植体带有很多微生物，假设不进展一系列的消毒，这些微

10、生物就会与外植体竞争营养物质，同时会产生一些有害物质，因此要对外植体进展一系列的消毒。对外植体的消毒既要思索药剂的消毒效果，又要思索外植体的耐受才干。3接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。接种前用70的酒精喷雾使空气消毒， 用70酒精或新洁尔灭擦拭一遍任务台并用紫外线照射20分钟。任务台消毒后，首先点燃酒精灯。1、接种室消毒2、无菌操作要求一切操作都要在酒精灯火焰旁完成，每次运用器械后，都需求用火焰灼烧灭菌，接种后立刻盖好瓶盖。3、资料的切取和接种课本P34页4、接种本卷须知每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，

11、冷却后再接种外植体在培育基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，普通胡萝卜34块，菊的茎或叶68块，也不要太少，以充分利用培育基中的营养成分和光照条件插入时应留意方向，外植体的形状学上端朝上，不要倒插。4.培育：1.将接种后的锥形瓶及对照组放在无菌培育箱中进展培育，并且定期消毒，温度控制在1822，前14天进展暗培育，愈伤组织构成后每天光照12h，愈伤组织为乳白色或黄色的瘤状2.愈伤组织构成后，改换培育基进展丛芽培育3.再改换培育基进展生根培育就能得到完好的植株。思索题：1.为什么愈伤组织构成后需求光照？答：愈伤组织构成后进展丛芽培育,培育中会构成 叶片，而叶片中叶绿素的构成需求光

12、照。 2.为什么植物组织培育过程中需求改换培育基？答：愈伤组织构成后培育基中的营养也几乎耗 尽，生根培育和丛芽培育所需的激素的量或 比例也不一样，因此需求改换培育基。5.移栽： 移栽生根的菊花试管苗之前，应先翻开培育瓶的封口膜，让试管苗在培育间生长几日1、翻开封口膜2、清洗转移 用流水清洗根部的培育基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间3、移栽幼苗长壮后，移栽到土壤中本卷须知：移栽过程中既要充分清洗根系外表的培育基，又不能伤及根系。6.栽培：将幼苗移栽后每天察看并记录幼苗生长情况，适时浇水，施肥，直至开花。正常苗污染苗1、外植体带菌2、培育基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁污染途径思索： 植物组织培育的整个操作过程中如何实现无菌 环境？ 1器械及培育基的灭菌高压蒸汽灭菌 2 外植体的消毒70%酒精、0.1%氯化汞 3接种的无菌操作酒精、酒精灯、灼烧 4无菌培育箱中培育 5移栽到消毒的环境中生存一段时间思索：他计划做几组反复？他计划设置对照实验吗？答：每种资料或配方至少要做一组以上的反复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培育基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培育，用以阐明培育基制造合格，没有被杂菌污染。三、课题延伸1、普通来说，容易进展无性繁衍的植物，也