拟南芥抗盐突变体筛选中盐浓度的确定

1、拟南芥抗盐突变体挑选中盐浓度确实定摘要将拟南芥种子播种于1/2s培养基上,竖直培养,待根生长至1.52.0时,转入含有不同nal浓度的1/2s培养基上,倒置培养,观察各个盐浓度下根的生长情况。试验结果说明,在170、180、190l/l的nal浓度下,拟南芥的根生长虽然都表现出一定的延迟,但最终还可以生长;而在200l/l时,根生长完全受到抑制,最终白化死亡,由此确定其生长的临界盐浓度为200l/l。关键词拟南芥;突变体挑选;盐浓度中图分类号q945.78文献标识码a文章编号1007-5739(2022)23-0025-01形式植物拟南芥(arabidpsisthaliana)为十字花科拟南芥

2、属一年生草本植物,它具有基因组孝个体孝生长周期短、种子繁殖系数高、严格的自花闭花授粉、易于遗传转化、便于栽培管理等特点。拟南芥是典型的甜土植物,本身并不抗盐,但是大量研究说明它包含了大多数的抗盐基因,拟南芥基因组的全序列物理图谱已于2000年12月公布1(thearabidpsisgeneinitiative2000),这是第一个被全部测序的植物。目前在拟南芥中,只有少数基因的功能被确定2,对拟南芥抗盐突变体的研究,有助于基因功能的探究,而前期工作突变体挑选条件确实定尤为重要3-4,是后续试验成功的关键。1材料与方法1.1试验材料野生型拟南芥种子;根本培养基:1/2s培养基;含盐培养基:分别含

3、有170、180、190、200l/lnal浓度的1/2s培养基。1.2试验方法1.2.1播种与培养。将经过10h氯气熏蒸灭菌的野生型拟南芥种子程度排列播种于根本培养基上,置于4冰箱放置2d,以确保种子发芽时间根本一致。2d后,从冰箱中移出,置于2223组培室中竖直培养,每天给予14h充足光照和10h黑暗。1.2.2转移与培养。待根生长至1.52.0时,挑选根长度根本一样且较为强健的幼苗分别移入含有170、180、190、200l/l的nal培养基,并在培养皿上标记好根生长的初始位置,倒立竖直培养,培养条件与前一样。1.3观察与记录每天观察不同盐浓度下根的生长情况、弯曲程度以及幼苗的生理状态,

4、每隔一定时间在培养皿上对根的生长位置进展标记,并做好记录。2结果与分析将幼苗移入含有不同盐浓度的培养基后,都表现出一定程度的生长抑制,可能由于不同盐浓度对根的生长都造成了一定的延迟。经过生长延迟后,幼苗适应了相应盐浓度,在部分浓度下根出现了弯曲生长(图1):在170l/l浓度下,根经过短暂的迟延开始弯曲生长,且弯曲的程度较大,生长较快。在180l/l浓度下,根的生长状况与170l/l浓度下几乎一样,生长较快,弯曲程度较大。在190l/l浓度下,根的生长受到了短暂的抑制,但随后出现弯曲生长。在200l/l浓度下,根的生长完全受到了抑制,没有出现弯曲现象,且很快萎蔫,白化死亡。3结论与讨论试验结果

5、说明,在170、180、190l/l的nal浓度下,根的生长虽然都表现出一定的延迟,生长速度不太一致,但最终还是可以生长,出现了一定程度的弯曲,而在200l/l的nal浓度下,根的生长完全受到了抑制,没有出现任何程度的弯曲,经过一定时间后萎蔫,因此确定200l/lnal为挑选浓度。该盐浓度经过屡次反复验证,可作为拟南芥抗盐突变体的挑选条件5-6。编辑4参考文献1agi.analysisfthegenesequenefthefleringplantarabidpsisthalianaj.nature,2000,408(6814):796-815.2buhen,buhezd.arabidpsisgeneknkut:phentypesantedj.urrentpinininplantbilgy,2001,4(2):111-117.3einked,herryj,dean,etal.arabidpsisthaliana:adelplantfrgeneanalysisj.siene,1998(5389):662,679-682.4赵淑清.一种挑选拟南芥突变体的有效方法j.遗传,2001,23(3):260-261.5郝建平,郭美丽,裴雁曦.拟南芥抗盐突变体的rapd分析j.西