000000c6_罗红霉素与氨溴索体内相互作用研究

1、罗红霉素与氨溴索体内相互作用研究彭文兴李焕德王峰苏芬丽(中南大学湘雅二医院临床药学教研室，湖南，长沙，410011)摘要目的：研究复方罗红霉素氨溴索片中二药在体内是否存在药动学上相互作用。方法：24名健康男性志愿者，采用4X4交叉试验设计，每组1人，交叉服用复方罗红霉素氨溴索片、罗红霉素片加氨溴索片、罗红霉素片、氨溴索片，服药后不同时间点取肘静脉血45ml,血药浓度采用高效液相色谱质谱(HPLCMS)法测定。由血药浓度计算药动学参数，并进行方差分析，以90%的可信区间进行药物发生相互作用是否具临床意义的判定。结果：复方制剂、合用药物以及单用药物药动学参数均无显著性差异。无论是复方或是合用两种药

2、物，均未在体内产生有临床意义的药物相互作用。结论：罗红霉素氨溴索片中二种成份在体内的吸收速度和程度与单一成份相比，不发生改变。二者在体内不产生统计学上和临床意义的相互作用。关键词：药动学，药物相互作用，罗红霉素，氨溴索作者简介：颜素华，主管药师，从事临床药学及合理用药工作。*通讯作者：彭文兴，男，中南大学湘雅二医院临床药学研究室，副教授，研究方向：临床药代动力学和药物相互作用，Tel:(0731)5292097,Fax:(0731)4896038,E-mail: HYPERLINK mailto: Studyonpharmacokineticinteractionbetweenroxithro

3、mycinandambroxolinhumanPengWenxingLiHuande,WangFeng,ClinicalPharmacyresearchinstitute,TheSecondXiangyahospital,CentralSouthUniversity,Changsha,410011,ChinaAbstractObjectiveToevaluatewhetherithaspharmacokineticinteractionhappenedwhenvolunteersoraladministratedroxithromycin-ambroxoltablets(complexpres

4、cription).MethodsThestudywasconductedinaself-controlled,four-periodcross-overexperimentin24healthyvolunteers.thevolunteersreceivedcomplexprescriptionroxithromycin-ambroxoltablets(roxithromycin300mg,ambroxol60mg),orco-administrationroxithromycintablets(300mg)andambroxoltablets(60mg),orroxithromycinta

5、blets(300mg),orambroxoltablets(60mg)for7consecutivedays,onthe7thdaySerialbloodsamplesweredrawnatbeforeand0.5，1,1.5,2,3,4,6,8,12,24,36，48,72hafterdrugadministration.Concentrationsofroxithromycinandambroxolinplasmaweremeasuredbyhigh-performanceliquidchromatographyelectrosprayionizationtandemmassspectr

6、ometry(HPLC-ESI-MS).Non-compartmentalanalysiswasusedtocharacterizeroxithromycinorambroxolplasmaconcentration-timeprofiles,andcomparisonsofmeanvalueswereanalyzedbytheanalysisofvariance,Differenceswereconsideredtobesignificantatp0.05.drug-druginteractionistestby90%confidenceinterval.ResultsThepharmaco

7、kineticparametersofroxithromycinorambroxolwerenotchangedinvolunteerstreatedby4differencemedicine.ConclusionRoxithromycinandambroxoldonotproducepharmacokineticinteractioninhuman.Keywordsroxithromycin,ambroxol,interaction,pharmacokinetics罗红霉素是常用于治疗肺部细菌感染的大环内酯类抗生素，疗效显著、毒性低，组织分布合理，口服吸收生物利用度高，能进入细胞内杀菌，达到

8、治疗彻底不易复发的效果。氨溴索为祛痰药，有研究证实，氨溴索可提高联用抗生素在肺部的浓度，提高抗菌的疗效1。另外，氨溴索具有对肺部多重保护作用，对呼吸系统疾病的喘、咳、痰、炎四症均具有一定的治疗和缓解作用。目前,在国内外已有罗红霉素氨溴索复方制剂的应用，但两者在体内在吸收、分布、代谢各环节中是否存在相互作用？特别是在多剂量给药时，是否会产生具有临床意义的相互作用？本文拟对二者在体内的药动学相互影响进行研究，为临床合理应用提供依据。材料与方法1.1试验药物罗红霉素氨溴索片：广州白云山制药股份有限公司，180mg/片（含罗红霉素150mg，氨溴索30mg）；罗红霉素片：浙江震元制药有限公司生产，15

9、0mg/片；氨溴索片江苏恒瑞医药股份有限公司生产，30mg/片。1.2主要仪器Waters2690液相色谱,ZQ2000型质谱；masslynx3.5工作站；METTLERTOLEDOAG285天平。1.3试剂罗红霉素标准品（含量91.4%）、克拉霉素标准品（含量942U/mg）；氨溴索标准品、芬太尼标准品均购于中国药品生物制品检定所；乙腈、甲醇为色谱纯；醋酸、甲酸为分析纯；水为重蒸馏水。受试者选择24名受试者均为健康男性，年龄2128（23.251.51）a，体重5580（62.636.56）kg,无烟酒嗜好，试验前经询问病史、体格检查和实验室检查未发现异常。两周内未服用任何可能影响本品吸收

10、、代谢的药物。受试期间统一清淡饮食，不使用其他任何药物、不吸烟及不饮酒及含咖啡的饮料，受试者试验前签署知情同意书。试验设计与方案实验分为四组：分别为复方罗红霉素氨溴索片、罗红霉素片加氨溴索片、罗红霉素片、氨溴索片，采用随机4X4拉丁方实验设计：将受试者按报到体格合格顺序入组，每种顺序1人。先后4个周期交叉服用受试药物。洗脱期为二周。每天早上8：00口服罗红 霉素300mg和/或氨溴索60mg。连服7天，第七天服药前及服药后0.5,1,1.5,2,3,4,6,&12,24,36,4&72h抽取肘部静脉血各45ml。血样置于含有肝素的离心管中，立即离心，分离出血浆，置-70C冰箱中保存至测定。生物

11、样本的药物测定检测条件a：罗红霉素检测的色谱一质谱条件色谱条件HYPEERSILGOLDC（150mmx2mm，5um）。流动相：乙腈：30mmol/L18醋酸铵（含0.4%甲酸）水溶液（58：42,V/V），流速：0.35ml/min,柱温：45C。质谱检测参数质谱离子化方式：电喷雾离子化（ESI+）;离子极性:Positive；选择性离子检测（SIM）：罗红霉素m/z：679.4M+H+，克拉霉素（内标）m/z:590.4M+H+；毛细管电压3.00KV，锥孔电压56V。萃取电压1.00V,离子源温度105C,去溶剂温度300C，锥孔气流速70L/h，去溶剂气流速400L/h。b:氨溴索检

12、测的色谱质谱条件色谱条件BDSHYPEERSILC柱（250mmx4.6mm,5um）。流动相：乙腈：30mmol/L18醋酸铵（含0.4%甲酸）水溶液（36：54,V/V），流速：1.2ml/min,柱后分流比为3：1,柱温：45C。质谱检测参数质谱离子化方式：电喷雾离子化（ESI+）；离子极性:Positive；选择性离子检测（SIM）：氨溴索m/z：263.9,263.8,265.9M+H+,芬太尼（内标）m/z:337.3M+H+；毛细管电压3.50KV,锥孔电压40V。萃取电压1.00V,离子源温度105C,去溶剂温度320C,锥孔气流速70L/h，去溶剂气流速400L/h。样品处理

13、a:罗红霉素血样处理：精密吸取血浆0.15ml血浆置入1.5ml离心管中，加入内标甲醇液600pl（浓度为913ng/ml），涡旋振荡后2min,10000rpm离心10min,取上清液置于进样瓶中，进样5ul分析。b:氨溴索血样处理：精密吸取血浆0.5ml血浆置入1.5ml离心管中，加入内标50Ul（浓度为604ug/ml），振荡10S,加入乙醚一正已烷（1：1,v/v）3ml,涡旋振荡1.5min,3000rpm离心3min,取上清液置于置于另一离心管中，60C氮气吹干，残渣用20%的乙腈定容至100ul,进样30ul分析。离子流色谱图罗红霉素的保留时间约为2.97min，内标克拉霉素的保

14、留时间为2.83min(通道2),氨溴索的保留时间约为3.39min，内标芬太尼的保留时间约为5.43min,血浆中无明显的内源性干扰物质。标准曲线、定量范围和最低定量浓度罗红霉素：用空白血浆将罗红霉素标准液稀释成0.004，0.014，0.057，0.287，2.867，14.333yg/ml的系列浓度样品，按“血浆样品的处理”项下操作，以峰面积之比对浓度(C)作线性回归，得回归方程：Cg/ml)=7.8849e-003XA/A+0.7015,r=0.999,is定量下限浓度为0.004yg/ml。氨溴索：用空白血浆将氨溴索标准液稀释成1.00，2.00，5.00，10.01，20.01，5

15、0.01，100.05ng/ml的系列浓度样品，按“血浆样品的处理”项下操作，以峰面积之比对浓度(C)作线性回归，得回归方程：C(ng/ml)=5.5887e-003XA/A+0.0101，r=0.994,is定量下限浓度为1.00ng/ml。回收率及精密度罗红霉素：配制浓度为0.014yg/ml、0.287yg/ml、2.867yg/ml的罗红霉素人血浆样品标准管，按“血浆样品的处理”项下操作，测定峰面积，按回归方程计算实测浓度，分别在同一天内测定5次和每天5次连续测定3天，分别考察方法的日内、日间精密度和方法回收率。日内RSD为1.39%5.62%(n=5)；日间RSD为1.91%7.14

16、%(n=15)；方法的绝对回收率为94.55%98.57%；方法的平均回收率在92.87%95.38%之间。氨溴索：配制浓度为2.00ng/ml、10.01ng/ml、50.03ng/ml的罗红霉素人血浆样品标准管，按“血浆样品的处理”项下操作，测定峰面积，按回归方程计算实测浓度，分别在同一天内测定5次和每天5次连续测定3天，分别考察方法的日内、日间精密度和方法回收率。日内RSD为1.94%2.01%(n=5)；日间RSD为2.93%6.63%(n=15)；方法的绝对回收率为86.21%99.37%；方法平均回收率在93.80%96.39%之间。样本稳定性考察根据研究的具体情况，进行了罗红霉素

17、与氨溴索在血浆中的稳定性。方法如下：配制罗红霉素浓度为0.014yg/ml、0.287yg/ml、2.867yg/ml和氨溴索浓度为2.00ng/ml、10.01ng/ml、50.03ng/ml人血浆，每个浓度血浆20ml，然后各取1ml分装于1.5ml塑料离心管中，取上述血样于室温放置，分别于第0、4、8、12、24h测定其浓度，考察室温放置的稳定性。取上述血样置-20C冰箱中保存，分别于0、10、20、30、40d取出测定其浓度，考察冰冻贮存的稳定性。取上述血样置-20C冰箱及室温中保存，反复冻融0、1、2、3、4次后测定其浓度，考察反复冻融的稳定性。按“血浆样品的处理”项下操作，测定峰面

18、积，按回归方程计算实测浓度，结果经不同的处置，各浓度的RSD小于6,与日间误差相近，证明在这些条件下，罗红霉素和氨溴索是稳定的。药代动力学参数的求算及结果AUC：以梯形面积法求得；0tK以消除相时间对浓度的对数进行线性回归，得斜率乘以-2.303；t=0.693/K；1/2AUC=AUC+C/K，C为不低于最低定量限的末点浓度；0T8ofttT,C均用实测值maxmaxAUC(T)相对生物利用度F%=X100%AUC(R)0-tCL/F=D(F)/稳态时AUC0-24V=CL/kMRT=AUMC/AUCTOC o 1-5 h z0_80-8AUMC=卜tCdt=FtCdt+卜tCdt00tVt

19、Cdt由梯形法求得，0AtCdt=为竺巴丄(t-1)0I=12ii1fg”tctJtCdt=t+tkk2不同用药形式罗红霉素的药动学参数见表19_21。氨溴索的动学参数见表2224。统计方法及结果药代动力学参数差异性检验：药药动学参数AUC和C，经对数转换，其他参数(t、04maxmaxMRT、t、CL、V后采用SPSS(V10.0)统计学程序进行药物间、周期间、个体间的三因素1/2方差分析。药物间相互作用分析：采用90%可信区间进行检验(美国FDA推荐使用的方法)。若复方制剂或合用药物的AUC的90%可信限落在单独使用药物的80125%范围内，C的04max90%可信限落在70143%范围内

20、，则认为二种药物合用时无临床意义的药物相互作用。90%的可信区间计算：参考文献2多交叉设计多组间比较的可信区间计算。采用方差分析得出的标准误，经校正后计算。公式如下：exp（AS.（k-1）F）*100,其中c、a;k-1,vA=LT-LR（二组对数均值之差），Sc为校正后的误差均方，K为处理组数，F为自由度为（k-1,v）的卩分布的a分位数，v是方差分析中误差的自由度。若取90%有可信区间，贝胆=0.05。结果多剂量服用复方罗红霉素氨溴索片、单方和合用三种用药的血药浓度-时间曲线图1-2。罗红霉素的药代动学参数显著性检验结果见表1；氨溴索的药代动学参数显著性检验结果见表2。结果表明，复方制剂

21、、合用药物以及单用药物药动学参数均无显著性差异。表明复方制剂罗红霉素及氨溴索的昅收速度及吸收程度均未发生改变。结果发现罗红霉素或氨溴索，无论是复方或是合用两种药物其AUC和AUC0J的90%可信限落在单用药物的80125%范围内，C的90%可信限落在70143%范围内，证明两max种药物均未在体内产生有临床意义的药物相互作用。结果见表3-4。整个试验过程，发现一名志愿者在第三、第四周期服药半小时出现腹痛、腹泻一小时后自行恢复，其他志愿者未发现任何药物不良反应和不良事件发生。讨论一般的药动学相互作用研究，仅简单的一种药物对另外一种药物的药动学的影响，而我们的试验研究了二种药物的相互作用，因为作为

22、复方制剂，两者之中，任何一个药动学的改变，均对其药效产生影响。氨溴索具有对肺部多重保护作用的专属特点，对呼吸系统疾病的喘、咳、痰、炎四症均具有一定的治疗和缓解作用。罗红霉素与氨溴索制成复方制剂，在药理药效上具有协同作用，已有文献报道氨溴索可以增加肺中药物浓度，为了研究两者是否存在药动学的相互作用，我们采用了4X4拉丁方设计，可以反映药物间的相互作用（通过单用与合用比较）和因药剂学（如辅料）的影响而产生的相互作有用（通过通过复方与合用的比较），因此，通过此设计，而者采用更符合临床使用情况多剂量给药，我们研究证明了罗红霉素与氨溴索在体内不产生药动学的相互作用。参考文献1.WangP,QiM,Jin

23、XJ.Determinationofroxithromycininratlungtissuebyliquidchromatography-massspectrometry.PharmBiomedAnal.2005，39(3-4):618-23.表1罗红霉素药动学比较Tab1Comparisonofpharmacokineticparametersofroxithromycinindifferencetreatmentparameterunitcomplexprescriptionco-administrationsingleuseANVOAFMSDMSDMSDAUCO-72gh/mL)111.

24、36835.433113.4238.725110.19435.1780.684AUCO-wgh/mL)112.68136.278115.03939.976111.70536.2330.69Cmaxg/mL)1O.662.64310.8583.18710.2572.8220.285Tmax(h)1.67O.281.670.411.670.320.08T1/2(h)11.O961.45211.4391.96311.5912.0870.794MRT(h)13.5311.52113.6941.83113.5691.5040.959CL/F(L/h)3.6281.1393.6241.2233.6471.

25、1030.452K(1/h)O.O635O.OO830.0620.010.0620.010.695V/F(L)57.33517.20158.82318.13260.16721.0570.113表2氨溴索药动学比较Tab2Comparisonofpharmacokineticparametersofambroxolindifferencetreatmentcomplexprescriptionco-administrationsingleuseANVOAparametersunitMSDMSDMSDFAUC0-48gh/mL)591.51179.50571.29168.86620.08177.8

26、60.06AUC0-wgh/mL)607.16184.26588.25175.89634.90183.960.05Cmaxmax(pg/mL)86.0120.5376.2815.3486.4625.900.05Tmax(h)1.730.391.770.391.690.290.43T1/2(h)8.802.119.162.458.661.490.53MRT(h)11.881.1911.621.1111.781.420.76CL/F(L/h)0.130.040.140.040.120.040.05K(1/h)0.080.020.080.020.080.010.61V/F(L)1.680.741.800.721.570.580.11bycomplexorcombinationcomparingtosingleuseparameters90%Confidence