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文档简介
1、基因工程及其应用第2节据报道:糖尿病在全世界的发病率有逐年增高的趋势,在发达国家已被列为继心血管疾病及肿瘤之后的第三大疾病,而作为治疗糖尿病的特效药的胰岛素的需求量也在逐年增加。以往临床上给病人注射用的胰岛素主要是从猪、牛等家畜的胰腺中提取,但这种方法生产的胰岛素产量低、价格昂贵,远远不能满足人们的需求。于是科学家们研究出了一种能让大肠杆菌生产人的胰岛素的方法,从而大大提高了产量。探究1:怎么让大肠杆菌产生人的胰岛素呢?一、基因工程的工具1、基因的“剪刀”限制性核酸内切酶 (简称限制酶)一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定位点切割DNA分子。特点: 限制性内切酶(EcoR)作用过程
2、点击播放被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?思考:形成的黏性末端不同不同的限制酶呢?具有限制酶作用的部位是哪个化学键?磷酸二酯键模型构建1练习使用EcoRI 剪取目的基因CATGAATTCCGTGAATTCCAGTACTTAAGGCACTTAAGGT噬菌体动植物病毒2、基因的运载体质粒2、基因的运载体质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物的细胞中,是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子。能够在宿主细胞中复制并稳定地保存具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接具有标记基因,便于进行筛选作为运载体的质粒需要具备的特点:3、基因的“针线”DNA连接酶 DNA连接酶连接的是两个脱
3、氧核苷酸分子的什么部位? 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。DNA连接酶的作用过程点击播放【工具3】基因的“针线”(DNA连接酶)DNA连接酶连接的是:磷酸二酯键。模型构建2 使用EcoR剪切质粒,并用DNA连接酶将目的基因与质粒连接起来构成重组质粒。探究2:基因工程的操作步骤有哪些?从细胞中分离出DNA从大肠杆菌中提取质粒限制 酶提取目的基因限制酶目的基因与运载体结合DNA连 接酶目的基因导入受体细胞目的基因的表达与检测基因工程操作的基本步骤小结一、基因工程的工具二、基因工程的操作步骤要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是( )限制酶连接
4、酶解旋酶还原酶随堂练习2、DNA连接酶的作用是:A.子链和母链之间形成氢键B.黏性末端之间形成氢键C.两个DNA末端间的缝隙连接D.A、B、C都对 C3实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别分子的顺序,切点在和之间,这是利用了酶的( ) 高效性专一性 多样性催化活性易受外界影响B4、基因“剪刀”是_ ,基因的“针线”是_ ,基因的“运载工具”有_。5、基因工程的正确操作步骤是( )使目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 提取目的基因 B. C. D. C6、假如用限制酶EcoRI
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