药物分析第04章分析样品前处理

1、药物分析第04章分析样品前处理采用一定的方法,使待测药物或待测元素转化为适宜的状态后，再进行分析测定。前处理对象：1. 含卤素元素（F、Cl、Br、I）2.金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn 、Bi)3.含As、P、S等元素4.生物样本以上药物在进行鉴别、检查及含量测定前,需要经过不同方法处理后,方可进行测定.2第一节 体外样品分析前处理一、前处理样品分类有机卤素药物1 卤素与脂肪链的碳原子相连结合不牢固2 卤素与芳环相连结合牢固 1 金属离子不直接与碳原子相连，在溶液中可直接离解出金属离子. 2 金属离子直接与碳原子以共价键相连，结合状态比较牢固，在溶液中不能直接离解出金属离子.含金属有

2、机药物31. 常见的含卤素有机药物三氯叔丁醇六氯对二甲苯泛影酸4胆影酸碘苯酯I5碘他拉酸碘番酸磺溴酞钠6诺氟沙星醋酸氟轻松7硬脂酸镁富马酸亚铁酒石酸锑钾2. 常见的含金属元素的有机药物8葡萄糖酸锑钠9 根据卤素或金属在分子中结合牢固程度不同处理方法而异.不经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法直接测定法经水解后测定法经氧化还原后测定法湿法破坏法干法破坏法氧瓶燃烧法前处理方法10（1 ）金属离子不直接与碳原子相连乳酸钙1 直接测定法 例1：乳酸钙含量测定 0.3g+水100ml 放冷+NaOH 15ml EDTA滴定 钙紫红素指示剂二、不经有机破坏的分析方法211(2)金属离子直接与碳原子以共

3、价键相连富马酸亚铁 例2：富马酸亚铁含量测定 富马酸亚铁溶于热硫酸,同时分解释放出亚铁离子,可选用铈量法进行测定.邻二氮菲为指示剂.12原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe3+ Fe2+ + e-Fe3+红色浅蓝色OOCCHOHCCO+Fe2+13将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中,加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后,加热回流使其水解,将有机结合的卤素,经水解作用转变为无机的卤素离子,然后选用间接银量法进行测定.（1）直接回流后测定法2 经水解后测定法14CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH 回流(CH3)2-CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2ONaCl

4、+ AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3 三氯叔丁醇15 六氯对二甲苯（Hexachloro-p-xylene） +6AgNO3+6H2O 加入AgNO3加热回流完全后,可用硫氰酸铵标准溶液直接滴定剩余的硝酸银,以求得含量. 6AgCl + 6NO3 - +6 H+16 例：硬脂酸镁与定量硫酸共沸、水解生成硬脂酸和硫酸镁，剩余的酸以氢氧化钠滴定. 也适用于金属原子与脂肪链的碳原子相连,结合不牢固药物.（2） 用硫酸水解后测定法原理：Mg(C17 H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2 C17 H35COOH2NaOH +

5、H2SO4 Na2SO4 + 2H2O 17（1）碱性还原后测定 卤素结合于芳环上,由于分子碘的结合较牢固,需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后测定. 3 经氧化还原后测定法泛影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固） +3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O NaI+AgNO3 AgI +NaNO3曙红钠为吸附指示剂黄色玫瑰红色+11NaOH +3Zn18在醋酸酸性条件下加还原剂锌粉,加热回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后用银量法测定. 如：碘番酸含量测定（2）酸性还原后测定用四溴酚酞乙酯作指示剂， AgNO3滴定。黄色沉淀绿色19（

6、3）利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量含锑药物Sb5+具有氧化性,在酸性下氧化KI定量析出I2，可用Na2S2O3 滴定.例如：葡萄糖锑钠 20 有机卤素及金属的药物结构中的卤素或金属离子与碳原子结合牢固者,用上述方法难以成为无机的化合物,此时必须采用有机破坏的方法,使之转变为无机化合物,方可进行测定.三、经有机破坏的分析方法1 湿法破坏法2 干法破坏法3 氧瓶燃烧法21 根据所用试剂的不同，湿法破坏可分为以下几种：硝酸-高氯酸法 破坏力强,不适于含氮杂环硫酸-硫酸盐法 常用于含砷、锑有机药物硝酸-硫酸法 适于大多数有机物质破坏1 湿法破坏法221 取样量 含金属元素在10 100g范

7、围内,取样10 g 生物样品血样10 15ml；尿样50ml2 所用仪器凯氏烧瓶3 空白试验4 通风橱中进行 湿法破坏法注意事项：23 适用于含氮杂环,以及某些不能用硫酸破坏的有机药物，但不适于含汞、砷药物的测定.2 干法破坏将有机物灼烧灰化以达到分解目的. 常加无水碳酸钠或轻质氧化镁以助灰化.1 应控制温度420以下2 灰化必须完全3 经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，不要轻易弃去。注意事项243 氧瓶燃烧法 氧瓶燃烧法是将有机药物放入充满氧气的密闭烧瓶中进行燃烧,并将燃烧所产生的欲测物质（气态）吸收于适当吸收液中,然后根据欲测物质的性质,采用适当分析方法进行鉴别、检查或含量测定.特点 快

8、速分解有机药物的简单方法. 不需复杂设备,能使有机结合中的待测元素定量地分解成无机离子状态. 适用于含卤素及硫、磷、硒等药物的鉴别、检查和含量测定,特别适用于微量样品的测定.25（1）仪器装置26（2）操作加吸收液通氧燃烧吸收测定取样10-20mg27（3）注意事项 . 充氧气要充分 使样品燃烧完全,一般急速通氧气12分钟,通气管应接近液面，使瓶内空气排尽，燃烧完全时没有黑色炭化物. 吸收完全应充分振摇,燃烧瓶看不到烟雾.Cl、F白色烟雾 Br棕色 I紫色放置15min，用少量水冲洗瓶塞及铂丝。28. 吸收液的选择氟 水 氯 NaOH溶液溴 H2O2-NaOH NaOH-硫酸肼饱和溶液碘 Na

9、OH硫酸肼饱和溶液硫 NaOH或H2O2 硒 硝酸溶液. 防爆 样品燃烧时,温度很高,燃烧瓶内压力很大,有爆炸的可能性,必须采取防护措施.防护措施 戴防护眼镜瓶外包湿毛巾29（4）卤素化合物的燃烧产物氟化物、氯化物氟或氯以离子状态存在，吸收后可直接测定.溴化物碘化物 溴化物或碘化物,燃烧后以多种价态存在,吸收后应转化为统一价态再测定.30（5）实例-碘苯酯的含量测定燃烧吸收加溴醋酸溶液加甲酸、加KI 滴定 31将 - 、 2 氧化为 O3 2Na +Br2 = 2NaBr+ 2 2+5Br2+6H2O = 2H O3 +10HBr2 溴-醋酸氧化剂： 2+ 2Na2S203 2Na +Na2S

10、4066H+ + 5- + O3- 3 2 + 3H2O1 燃烧吸收R- CO2+H2O+Na + 2+Na O3+NaClO3 加甲酸：除去过量的溴4 加KI 滴定321. 氧瓶燃烧法中的装置有( )A. 磨口硬质玻璃锥形瓶 B. 磨口软质玻璃锥形瓶C. 铂丝 D. 铁丝 E. 铝丝2选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品( )A. 磨口硬质玻璃锥形瓶 B. 铂丝 C. 普通滤纸D. 氢气 E. 无灰滤纸3. 氧瓶燃烧法可用于( )A. 含卤素有机药物的含量测定B. 醚类药物的含量测定C. 检查甾体激素类药物中的氟D. 检查甾体激素类药物中的硒E. 芳酸类药物的含量测定33第二节 体内样品分析预处理

11、方法生物样本： 生物体的任何脏器、组织、体液均可作为生物样本.常用样本: 血液（血浆、血清或全血）、尿液、唾液、毛发（一）样品采集 1 血浆或血清样品处理适用：有机药物药动学研究、生物利用度测定、治疗药物检测等样品处理方法：（）去蛋白质 （）分离纯化浓集（）仪器分析 （ 4 ）缀合物水解34（1）去蛋白质 加入与水混溶的有机溶剂蛋白质脱水沉淀 加入中性盐“盐析”沉淀蛋白质 加入强酸与蛋白质阳离子(铵基)形成不溶性盐沉淀 加入重金属盐与蛋白质阴离子(羧基)形成不溶性盐沉淀 超滤法半透膜滤除可溶性生物大分子 酶水解法蛋白分解酶分解蛋白质 加热法蛋白质变性凝固35液-液萃取法固-相萃取被测组分浓集（

12、3）分离纯化与浓集（4）化学衍生 使药物变成具有被分离的性质提高检测灵敏度增强药物的稳定性 提高对光学异构体分离能力362 尿液处理适用：药物剂量回收、肾清除率和生物利用度测定、药物代谢研究 尿中药物多数呈缀合状态,为测定尿液中药物总量,需将缀合物中药物释出. 酸水解 酶水解缀合物的水解3 毛发（头发）适用：微量元素测定方法：有机破坏法 湿法破坏 干法破坏 氧瓶燃烧法371.在药物干燥失重和炽灼残渣测定中，恒重是指连续两次操作后所得的重量差A.等于0 B0.1mg C. 0.3mg D. 1mg E. 3mg 2.中国药典中规定，称取“2.0g”是指A.称取重量为B.称取重量为C.称取重量为D.称取重量为3.中国药典凡例中规定的“极易溶解”系指溶解1g溶质所需溶剂的体积为：A.不到1mL B. 1mL不到10mL C. 10mL不到30mLD. 30mL不到100mL 384.中国药典凡例中规定的“水浴”系指水浴温度为：A.1030 B. 4050 C. 7080 D. 98100和LOQ是考察药物分析方法的：A.专属性 B.准确度 C.灵敏度 D.精密度6.药物分析的各项效能指标中，用于原料药中杂质的限度检查方法，对