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文档简介
1、第一章 组织学绪论本章内容组织学的研究内容组织学的定义组织学在医学中的地位组织学的研究方法和常用技术普通光学显微镜技术HE染色 嗜酸性 嗜碱性电子显微镜技术细胞化学和组织化学技术 PAS反应组织学的学习方法组织学的研究内容组织学的研究内容组织学是研究机体微细结构及其相关功能的学科。显微镜下的风景细胞组织器官系统组织学的研究内容细胞:机体结构与功能的基本单位。细胞膜 细胞质 细胞核组织学的研究内容组织:由形态相似、功能相关的细胞和细胞外基质组成的群体结构。细胞外基质(细胞间质):由细胞产生,构成细胞生存的微环境支持、营养、保护、联系对细胞的增殖、分化、迁移和信息传递等行为也有着重要影响。四种基本
2、组织:上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织组织学的研究内容上皮组织结缔组织肌组织神经组织组织学的研究内容器官:各种组织按一定方式组合构成器官。中空性器官:中央有大的空腔心、胃、膀胱、子宫等实质性器官:中央没有大的空腔肝、脾、肺、肾等组织学的研究内容组织学的研究内容系统:由一些结构连续、功能相关的器官组合而成,完成连续的生理活动。组织学在医学中的地位组织学在医学中的地位在医学中的地位:重要的医学基础课程为其他的基础和临床学科打下必备的形态学基础微观宏观:组织学解剖学正常异常:组织学病理学组织学在医学中的地位胃(解剖学)胃(组织学)组织学在医学中的地位正常肝脏(组织学)肝硬化(病理学)组织学的研究
3、方法和常用技术组织学的研究方法和常用技术光学显微镜技术光镜结构电子显微镜技术电镜结构(超微结构)组织化学和细胞化学技术:PAS反应组织培养和组织工程原位杂交术(略)放射自显影术(略)组织细胞定量术(略)微细结构组织学的研究方法和常用技术一、光学显微镜技术(LM)普通光学显微镜技术 放大倍数=目镜放大倍数物镜放大倍数,可达1500倍左右 分辨率:0.2m组织学的研究方法和常用技术普通光镜组织切片标本的制备方法:最常用:石蜡切片取材与固定脱水、透明与包埋切片与染色封固组织学的研究方法和常用技术最常用的染色方法:HE染色(HE staining):即苏木精-伊红染色法,苏木精(hematoxylin
4、)染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与细胞质内的核糖体染成蓝紫色;伊红(eosin)为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色组织学的研究方法和常用技术组织结构的嗜色性嗜酸性:与酸性染料亲和性强,可被伊红染成粉红色的组织特性嗜碱性:与碱性染料亲和性强,可被苏木素染成蓝紫色的组织特性中性:与酸性、碱性两种染料亲和性都不强的组织特性,在HE染色中着色淡组织学的研究方法和常用技术其他染色方法:镀银染色:用硝酸银染色时,有些组织结构可直接使阴离子还原为银颗粒而呈棕黑色,称为亲银性;有些组织成分,需加还原剂方能显色,称为嗜银性。组织学的研究方法和常用技术嗜铬性:有的细胞经重铬酸盐处理后,呈棕褐色
5、异染性:肥大细胞中的颗粒经甲苯胺蓝等蓝色染料染色后,呈紫红色组织学的研究方法和常用技术切其他切片技术:火棉胶包埋:用于制作较大结构的切片,如眼球冰冻切片:可更好的保存细胞内的酶活性和脂类物质涂片:血液、精液铺片:用于制作薄层组织的切片,如肠系膜磨片:用于制作坚硬组织的切片,如骨、牙组织学的研究方法和常用技术平滑肌细胞 HE染色组织学的研究方法和常用技术特殊光学显微镜技术:荧光显微镜:用于观察组织、细胞中有自发荧光、诱发荧光或经荧光染料染色或标记的结构。组织学的研究方法和常用技术相差显微镜:观察生活细胞和未经染色细胞的形态结构组织学的研究方法和常用技术暗视野显微镜:观察反差太小或分辨力不足的微小
6、颗粒偏光显微镜:鉴定微细结构的光学性质激光共聚焦扫描显微镜:高光敏度、高分辨率,可以更精确的检测组织或细胞内的微细结构及其变化运动终板(免疫双标)组织学的研究方法和常用技术二、电子显微镜技术(EM)透射电镜术(TEM)内部结构扫描电镜术(SEM)表面立体结构分析电镜(了解)冷冻蚀刻(了解)电镜结构常称为超微结构组织学的研究方法和常用技术透射电镜术(TEM)分辨率为0.2nm,放大倍数为几万几十万倍原理:应用电子束穿透标本经过聚焦与放大后成像,投射到荧光屏上进行观察。电子密度高:电子束投射到密度大的样品时,电子被散射的多,则透射到荧光屏上的电子少而呈暗像电子密度低:电子束投射到密度小的样品时,电
7、子被散射的少,则透射到荧光屏上的电子多而呈亮像组织学的研究方法和常用技术透射电镜术(TEM)电子密度低电子密度高组织学的研究方法和常用技术扫描电镜术(SEM)组织学的研究方法和常用技术三、细胞化学和组织化学技术一般组织化学:应用化学反应原理,在组织切片上加相应试剂,使发生反应成为有色沉淀物,用于检测细胞内的糖类、酶类、脂类、核酸等过碘酸-希夫反应(PAS反应):用于显示细胞、组织内的多糖和蛋白多糖。免疫组织化学组织学的研究方法和常用技术PAS反应:原理:糖被过碘酸(HIO4)强氧化剂氧化后,形成二醛基;后者与Schiff试剂中的无色亚硫酸品红结合,生成紫红色沉淀,称PAS反应阳性。PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在。PAS阳性(小肠上皮)组织学的研究方法和常用技术免疫组织化学:根据免疫学原理,应用带有可见标记的特异性抗原-抗体反应,检测组织、细胞中多肽和蛋白质等大分子物质的一种技术。常用标记物:辣根过氧化物酶、荧光素、胶体金组织学的研究方法和常用技术免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记) 显示胰岛B细胞组织学的研究方法和常用技术免疫组织化学 神经胶质细胞(荧光素标记)免疫荧光:豚鼠胚胎组织学的研究方法和常用技术三、组织培养和组织工程组织工程耳DON
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