消毒和灭菌教学课件

1、第三章 消毒与灭菌 1.灭菌（sterilization） 指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。 2.消毒（disinfection） 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。 3.防腐（antisepsis） 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。 4.无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。 物理因素对微生物的影响 物理因素温 度辐射干 燥超声波微 波滤过除菌(一)低温 大多数微生物对低

2、温具有很强的抵抗力 。低温下，代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力。 意义：保存菌种、毒种、疫苗等 一、温 度 热力灭菌法：干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。 二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。 原因：（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （2）湿热的穿透力比干热大； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。 (二)高温：高温对微生物具有明显的致死作用. (1)火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，如接种环 。 1.干热灭菌法 (2)热空气灭菌法 干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。 灭菌温度需160维持2 h 。 (1)煮沸灭菌 : 煮沸1020 min

3、可杀死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸12 h才被杀死 。用于饮水、一般器械 如刀剪的消毒。 (2)巴氏消毒法 :以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 . 1.低温维持巴氏消毒法 636530min 2.高温瞬时巴氏消毒法 717215s 3.超高温巴氏消毒法 13212s 2.湿热灭菌法 （3）流通蒸汽灭菌法 ：是一种常压蒸汽消毒法，细菌繁殖体15-30分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。 (4) 间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽） 100维持30min 温箱过夜 100维持30min 温箱过夜 100维持30min 温箱过夜 100维持30mi

4、n。 此法常用于一些不耐高温的培养基，如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基的灭菌 。 高压蒸汽灭菌器：15磅/平方英寸，121.3温度下维持1520min 。 应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。 手提式高压蒸汽灭菌器（5）高压蒸汽灭菌法辐射：能量通过空间传递的一种物理现象。 按辐射对微生物的灭活作用分：1.非电离辐射:可见光、日光、紫外线2.电离辐射 :、射线以及高能质子、 中子等 二、辐 射 (一)非电离辐射 1.可见光:指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线，其波长400800nm。可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也

5、能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖。 光感作用 :指可见光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用 。2.阳光:直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异 。 波长200-300nm部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外线杀菌灯紫外线波长为253.7nm。常用于微生物实验室、无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种。

6、 3.紫外线杀菌机理：（1）损害DNA构型，影响DNA复制和转录（2） O2 O3 O 杀菌 (1) 射线:电离辐射强 ， 穿透力差（ 缺乏穿透力，不实用） (2) 射线:电离辐射强 ， 穿透力强 (3) 射线:电离辐射弱， 穿透力强（4）X射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强 用途：忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面 杀菌机制：射线使水电离为H和OH，这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身 。(二）电离辐射 微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。主要用于菌种和食品的保藏。 三、干 燥频率在20 000200 000 Hz的声波称为超声波 。主要用于裂解细胞，提取细胞组分。四、超声波 五、微 波 从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。所需时间短、加热均匀。主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。 滤过除菌 :通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除