生化和分子生物学实践

1、关于生化与分子生物学实践第一张，PPT共三十七页，创作于2022年6月生命活动的主要承担者，一切性状的体现者是什么？蛋白质蛋白质存在于生物体的组织中，不同的生物体组织细胞所含的蛋白质种类、数量也不尽相同，所以，要研究它就必须将其分离、纯化出来。因此，蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。第二张，PPT共三十七页，创作于2022年6月1.原理： 依据蛋白质的各种特性将不同种类的蛋白质分离，再依据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间的差异进行纯化。2.步骤：一、蛋白质的分离与纯化第三张，PPT共三十七页，创作于2022年6月（1）样品处理（释放蛋白质）：先将生物组织进行机械破碎，再根据细胞的

2、特点选择不同的细胞破碎方法（常用的有、等？）破碎细胞，待细胞破碎后，各种蛋白质被释放出来。（2）粗分离（抽提蛋白质）：根据蛋白质的不同性质，选择不同的溶剂进行抽提。例如，酸性蛋白质可用抽提，水溶性蛋白质可用抽提，脂溶性蛋白质可用抽提。（3）纯化： a.原理：根据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间在分子大小、溶解度、所带电荷的多少、吸附性等方面存在的差异进行的。 b.方法：有、等。 （4）纯度鉴定第四张，PPT共三十七页，创作于2022年6月3.电泳：（1）概念：（2）原理：利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、性状的不同使带电分子产生不同的泳动方向和速度，从而实现样品中各种

3、分子的分离。（3）泳动的特点：带电颗粒直径越小，越接近于球形，所带净电荷越多，速度就越快，反之越慢。第五张，PPT共三十七页，创作于2022年6月1.芳香油的来源：芳香植物的花、茎、叶、果实等。2.芳香油的特点：挥发性强；易溶于有机溶剂。3.提取方法：（1）蒸馏法（水蒸气蒸馏法）原理：利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来。步骤：a、水蒸气蒸馏；b、分离油层；c、除水过滤。使用范围：提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油。（2）萃取原理：使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可以得到芳香油。二、从生物材料中提取某些特定成分植物芳香油的提取第六张，PPT共三十七页，创作于2022年6月课题目标：1

4、、了解植物芳香油的来源，针对原料的不同特点，采用适宜的提取方法；2、结合橘皮精油的提取，正确选择提取方法，弄清植物芳香油提取的具体操作步骤。第七张，PPT共三十七页，创作于2022年6月3、使用水蒸气蒸馏装置的注意事项有哪些？1）安装仪器时一般按自下而上，从左到右的顺序，拆卸仪器的顺序与安装时相反。保证冷凝管下进上出。2）蒸馏开始时，先通冷水后加热；蒸馏完毕时，先撤热源后停止通水。第八张，PPT共三十七页，创作于2022年6月4、橘皮精油的主要成分是什么？为什么用压榨法提取？柠檬烯。用水蒸气蒸馏法产生原料焦糊问题。第九张，PPT共三十七页，创作于2022年6月植物芳香油的提取方法1、水蒸气蒸馏

5、法 原理：利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后混合物又重新分出油层和水层。 分类：水上蒸馏、水中蒸馏和水气蒸馏 应用：普遍原料适用第十张，PPT共三十七页，创作于2022年6月2、压榨法 原理：通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油 应用：适用于易焦糊原料的提取 3、有机溶剂萃取法 原理：使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油 应用：适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中。第十一张，PPT共三十七页，创作于2022年6月二、实验材料及用品1、精油蒸馏装置第十二张，PPT共三十七页，创作于2022年6月精油提取器精油提取器剖面图精油提取器

6、正面图2、实验材料橘子皮第十三张，PPT共三十七页，创作于2022年6月三、实验步骤1、安装仪器，加蒸馏水没过浮漂。2、将物料（橘子皮）尽量剪碎，放入铺有一层纱布的物料篮中。将物料篮放入仪器内，将仪器盖螺栓逐对拧紧。3、在油水出口放置一个三角瓶接收油水混合物。第十四张，PPT共三十七页，创作于2022年6月4、向冷凝器中通入自来水，保持较小流速即可。5、 打开电源开关，将功率调节旋钮调节到最大，仪器进入加热状态。6、当油水出口有油水混合物流出时，可调节功率控制油水混合物的蒸馏速度。7、用分液漏斗对精油进行分离。第十五张，PPT共三十七页，创作于2022年6月课外小知识 植物芳香油散发出的芬芳气

7、味，使人身心爽快，有助于消除疲劳，恢复精力，还可以不同程度地提高人体神经系统、内分泌系统的功能，帮助人体提高免疫力，具有保健、美容、治疗的作用。 第十六张，PPT共三十七页，创作于2022年6月 如从玫瑰花中提取出的玫瑰油称为“液体黄金”，多用于制造高级香水等化妆品，是纯天然的护肤品。 功效：具有极好的抗衰老和止痒作用，能够促进细胞再生、防止肌肤老化、平抚肌肤细纹，还具有使人放松、愉悦心情的功效 。第十七张，PPT共三十七页，创作于2022年6月1、蒸馏时要提高产品质量，应采取的措施是A 提高蒸馏温度，延长蒸馏时间B 提高蒸馏温度，缩短蒸馏时间C 降低蒸馏温度，缩短蒸馏时间D 严格控制蒸馏温度

8、，延长蒸馏时间练习巩固第十八张，PPT共三十七页，创作于2022年6月2、用于提取植物芳香油的植物器官包括A 花、茎、叶 B 树干、树皮C 根、果实、种子 D 以上三项都是3、玫瑰精油被称为“液体黄金”，提取玫瑰精油的方法有A 只用水蒸气蒸馏法 B 可用蒸馏法和压榨法C 可用蒸馏法和萃取法 D 可用压榨法和萃取法第十九张，PPT共三十七页，创作于2022年6月4、在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳液提纯过程中，先后使用NaCl和无水Na2SO4的作用分别是A 分层、吸水 B 溶解、吸水C 吸水、分层 D 分层、萃取第二十张，PPT共三十七页，创作于2022年6月谢 谢！第二十一张，PPT共三十七页，创

9、作于2022年6月第二节 分子生物学技术昌吉州回民中学 谢代鹏第二十二张，PPT共三十七页，创作于2022年6月一、分子生物学进展1.的建立，奠定了现代分子生物学的基础，给整个生物科学乃至整个人类社会带来了一场革命。2.“基因克隆”一经提出，世界各国的生物科学家便立刻意识到和基因克隆的重大作用和深远意义。3.目前我国基因工程已投入生产的有。4.在动物基因工程方面，我国已成功培育出等多种转基因动物，在动物乳汁中得以表达的物质有。第二十三张，PPT共三十七页，创作于2022年6月二、PCR技术（聚合酶链式反应）聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction，PCR) 原理：利

10、用碱基互补配对的原则，人为的将适量的DNA复制过程中所需要的组分组合在一起，经过多次变性、退火、延伸的循环，从而使目的基因在体外得到扩增，最终得到大量的目的基因。 第二十四张，PPT共三十七页，创作于2022年6月PCR反应中的主要成份 1. 引物（两种寡核甘酸） 2. 反应物（4种脱氧核苷酸） 3. DNA聚合酶（常用Taq 聚合酶） 4. 模板DNA 5. Mg 2+ （提供反应的离子条件） 6. 反应缓冲液（提供反应的溶液体系）第二十五张，PPT共三十七页，创作于2022年6月PCR是一种由引物介导的选择性体外扩增DNA的方法。包括三个基本步骤:(1) 变性(Denature):目的双链

11、DNA片段在94下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(40 60 )下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适温度 下(72 左右)，以目的DNA为模板进行合成。 由这三个基本步骤组成一轮循环，理论上每一轮循环将使 目的DNA扩增一倍，这些经合成产生的DNA又可作为下一轮循环的模板，所以经30轮循环就可使DNA扩增出230 个拷贝。第二十六张，PPT共三十七页，创作于2022年6月PCR 循环 第一步 变性(94)靶序列靶序列第二十七张，PPT共三十七页，创作于2022年6月PCR 循环- 第二步

12、退火(40 -60 )靶序列靶序列Primer 1Primer 2BiotinBiotin53553533第二十八张，PPT共三十七页，创作于2022年6月PCR 循环 - 第三步 链延伸(72 左右)靶序列靶序列Primer 1Primer 2BiotinBiotin53553533Taq DNAPolymerase第二十九张，PPT共三十七页，创作于2022年6月第1个 PCR 循环完成后 得到两个拷贝的靶序列靶序列 靶序列BiotinBiotin第三十张，PPT共三十七页，创作于2022年6月30次循环后靶序列扩增的数量No. ofNo. Amplicon CyclesCopies of

13、 Target122438416532664201,048,576301,073,741,8241 cycle = 2 Amplicon2 cycle = 4 Amplicon3 cycle = 8 Amplicon4 cycle = 16 Amplicon5 cycle = 32 Amplicon6 cycle = 64 Amplicon7 cycle = 128 Amplicon第三十一张，PPT共三十七页，创作于2022年6月PCR 动画1st cycle2nd cycle3rd cycle过 程变 性退 火 链 延 伸第三十二张，PPT共三十七页，创作于2022年6月 细胞的破碎的方法： 先要将细胞和组织破碎，使蛋白质充分释放出来 机械法匀浆：破碎机体软组织最常用方法之一 组织捣碎：注意维持低温环境研磨：破碎单一细胞的有效方法，主要用于细菌、酵母等的破碎 第三十三张，PPT共三十七页，创作于2022年6月第三十四张，PPT共三十七页，创