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文档简介

1、实 验 一免疫原和抗血清的制备实验内容颗粒型抗原的制备可溶性抗原与佐剂的混合颗粒性抗原与可溶性抗原免疫动物 皮内、肌肉、静脉等途径动物采血及血清的分离 静脉采血法、动脉放血法、心脏采血法 颗粒性抗原细胞、细菌等可溶性抗原蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、核酸等一、免疫原的制备颗粒性抗原的制备1、抽取绵羊静脉血，抗凝。2、取1ml绵羊静脉血放入离心管，加入2ml生理盐 水混匀后，2000rpm离心10min，吸去上清，同 上法洗涤二次。沉淀即主要为绵羊红细胞。3、取绵羊红细胞加入生理盐水，配成1%的绵羊红 细胞悬液。组织细胞抗原的制备： 高速捣碎法组织捣碎机捣碎 研磨法用玻璃匀浆器或乳钵研磨 可溶性抗原的

2、制备用于人体的佐剂：氢氧化铝、胞壁酰二肽、细胞因子、热休克蛋白常用于动物实验的佐剂：弗氏不完全佐剂羊毛脂与液体石蜡的混合物 弗氏完全佐剂弗氏不完全佐剂加卡介苗常用于动物实验的佐剂：弗氏不完全佐剂羊毛脂与液体石蜡的混合物弗氏完全佐剂弗氏不完全佐剂加卡介苗二、抗血清的制备 抗血清的制备是将制备好的免疫原按照一定的免疫程序接种给所选择的动物，该动物在含有多种抗原表位的抗原刺激下，体内多个B细胞克隆被激活并产生针对某一抗原多种不同表位的抗体，其混合物为多克隆抗体。 多克隆抗体的产生示意图多克隆抗体：天然抗原刺激多种B淋巴细胞克隆产生 的多种抗体的混合物 免疫原的剂量 中间剂量范围内，免疫原剂量增加可获得高效价抗体 免疫间隔时间 第一次和第二次间隔1020天，三次及以后间隔710天免疫途径 皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、淋巴结 免疫程序颈动脉采血法：家兔、绵羊、山羊 心脏采血法： 家兔、豚鼠、大鼠、鸡 静脉采血法： 家兔、山羊、绵羊 动物采血法28保存：短期保存冰冻保存：保存5年真空干燥保存：保存510年抗血清的保存三、单克隆抗体的制备 临床免疫学与检验实验报告专业 08检验组别第组姓

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