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文档简介

1、关于癫痫动物模型的制备第一张,PPT共二十一页,创作于2022年6月概述 癫痫流行病学介绍1 癫痫模型制备原理2 不同的癫痫模型制备方法3 讨论与展望4第二张,PPT共二十一页,创作于2022年6月1.癫痫流行病学介绍 癫痫是一种脑部疾患,特点是存在能产生癫痫发作的脑部持久性改变,并出现相应神经生物学、认知、心理学以及社会学等方面的后果。 中国癫痫患病率约为7,每年新发病40万例,患者总数超过900万,其中超过一半是儿童及青少年。第三张,PPT共二十一页,创作于2022年6月2.癫痫模型制备原理 利用药物制备癫痫模型,通过破环脑部神经递质释放的平衡,阻断兴奋性氨基酸的循环通路,从而诱发癫痫形成

2、与发作。 利用手术制备癫痫模型,主要用于模拟外伤后癫痫。具体的发病机制尚不十分明确,目前研究显示与各神经元细胞之间的突触连接的改变有关。第四张,PPT共二十一页,创作于2022年6月3.不同的癫痫模型制备方法癫痫动物模型1.药物建模 通过药物注射的方式建立癫痫动物模型。2.手术建模 利用外科手术的方法建立癫痫动物模型第五张,PPT共二十一页,创作于2022年6月3.1药物建模的几种方法1注射合成红藻氨酸制备大鼠癫痫模型2注射氯化锂-匹罗卡品致大鼠癫痫模型3穿刺注射海人酸杏仁核点燃大鼠癫痫模型第六张,PPT共二十一页,创作于2022年6月3.1.1注射合成红藻氨酸法 红藻氨酸(kainic ac

3、id, KA)是红海藻的提取物,可作用于脊椎动物中枢神经系统的谷氨酸受体,可直接兴奋神经元,又可增强钠离子的通透性而使神经细胞去极化,诱发癫痫的发生。 利用KA的人工合成品,即合成红藻氨酸(syn thetical kainic acid, SKA)制作大鼠癫痫模型。第七张,PPT共二十一页,创作于2022年6月 正常Wistar大鼠腹腔注射10mg/kgSKA后约5min,大鼠出现凝视行为(级), 之分别在约23min、97min、129min和140min动物顺序出现-级癫痫发作。3h后症状减轻,7-8小时后停止,14小时基本恢复正常。制备过程第八张,PPT共二十一页,创作于2022年6月

4、方法特点 注射合成红藻氨酸诱发大鼠癫痫,SKA 5-12mg/kg 腹腔注射可诱发大鼠癫痫发作, 以10mg/kg剂量为佳。 合成红藻氨酸诱发大鼠癫痫发作的阶段性明显、行为学表现规律、稳定,死亡率低,适宜大规模建立癫痫动物模型 。第九张,PPT共二十一页,创作于2022年6月3.1.2注射氯化锂-匹罗卡品法 注射氯化锂(Licl)和匹罗卡品(pilocarpine, PI-LO)致癫痫模型在动物行为、脑电图、病理及药理特性上与人类颞叶癫非常类似。 近年来一直被认为是研究颞叶癫痫的理想模型。第十张,PPT共二十一页,创作于2022年6月制备过程 正常Wistar大鼠经过腹腔注射LiCl 125m

5、g/kg,18-24h后腹腔注射PILO 20 mg/kg达到-级发作则为进入癫持续状态(status epilepticus, SE) ,致成功。 若无发作或发作未达到-级, 则每隔30min腹腔注射PILO 10mg/(kg次) ,最多6次, 其间癫痫发作级的大鼠认为致成功。 第十一张,PPT共二十一页,创作于2022年6月方法特点 PILO首次剂量为20mg/kg,以后小剂量给予PILO(10mg/kg), 简单易用,可按个体差异控制PILO的用量,成功率较高。 此方法的致癫痫率和自发发作的出现率基本一致,明显优于传统方法。是研究颞叶癫痫的理想模型。第十二张,PPT共二十一页,创作于20

6、22年6月3.1.3穿刺注射海人酸法 点燃模型(Kindling model)是通过重复给予一个首发阈下电或化学刺激引起部分或全面性癫痫发作的癫痫模型, 具备慢性、自发性和复发性特征。 海人酸(kainic acid ,KA)具有很强的神经毒性作用,海马富含KA受体, KA脑内注射能使动物产生长时间肢体型癫痫发作。第十三张,PPT共二十一页,创作于2022年6月制备过程 Wistar大鼠麻醉后30min用5L微量注射器吸KA1L,颅骨穿刺以右侧杏仁基底核为KA注射部位,速度为1L/min ,留针5min,以确保药物被完全吸收。 实验大鼠在KA杏仁核注射后平均41和61min分别依次出现部分性发

7、作和癫痫性大发作第十四张,PPT共二十一页,创作于2022年6月方法特点 用KA杏仁核微量注射, 为全身给药点燃用量的万分之一, 点燃成功率高达90%。 点燃一旦建立, 动物的这种脑细胞及惊厥行为敏感性可长期维持, 是研究脑细胞兴奋性、可塑性以及学习和记忆、癫痫发病机制、癫痫外科手术预后判断的理想动物模型 。第十五张,PPT共二十一页,创作于2022年6月3.2机械损伤制备大鼠癫痫模型 颅脑外伤是癫痫的常见病因之一。外伤后癫痫(PTE)的发病机制目前尚未阐明。现有研究表面,突触重建在PTE的发病发展过程中起着重要作用。 突触素(synaptophysin.p38)和苔藓纤维(mossy fib

8、er,MF)与突触重建关系密切,是突触功能和突触重建的重要标志之一。第十六张,PPT共二十一页,创作于2022年6月制备过程 正常Wistar大鼠用2戊巴比妥钠(50mg/kg)腹腔麻醉后,矢状位切开头部皮肤,剥离颅骨外膜,左侧顶距矢状缝旁3.5mm,冠状缝后4.0mm处钻一直径3.0mm的骨窗,保持硬脑膜完整。 此时接液压打击装置,压强152-202kPa,时程40-50ms。打击后,缝合头皮,清醒后自由进食、水。第十七张,PPT共二十一页,创作于2022年6月液压打击手术部位图示第十八张,PPT共二十一页,创作于2022年6月方法特点 手术后连续观察实验动物行为三个月,根据不同等级的癫痫发作,可研究外伤后癫痫的发病机制。 液压脑损伤制备的动物模型,较好的模拟了人类PTE的显著特征晚期、慢性、反复、自发性发作。 是研究外伤后癫痫理想的动物模型。第十九张,PPT共二十一页,创作于2022年6月4.讨论与展望 导致癫痫发病的因素非常复杂, 癫痫的发病类型多, 目前还没有一种动物模型能够模拟出所有的癫痫发作类型。 以上介绍的几种癫痫动物模型,都有其独特之处。不同方法制备的癫痫动物模型,将会为癫痫发病机制和治疗的研究做出贡献。第二十张,PPT共二十一页,创作于2022年6月4.

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