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文档简介
1、2023届 一轮复习 浙科版 微生物的培养 作业基础达标1下列关于无菌操作的叙述,错误的是()A在超净台内接种时需打开过滤风,但不能打开紫外灯B对试管进行高压蒸汽灭菌时,不能用脱脂棉制成的棉塞塞住管口C若要在平板上进行五个区域的划线分离接种,则接种环共需灼烧六次D配制完成的尿素固体培养基,还需用G6玻璃砂漏斗过滤除菌答案:D2(2022宁波适应性考试)下列关于涂布分离法和划线分离法的操作,错误的是()A两次划线之间灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种B不同浓度的菌液经涂布后均可在固体培养基表面形成单菌落C在获取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰D同一浓度的稀释液应至少涂布三
2、个平板答案:B3(2022沈阳高三模拟)下图为实验室培养和纯化酵母菌的部分操作步骤,下列说法正确的是()A步骤中打开含菌种的试管后需将试管口通过酒精灯火焰灭菌B步骤中接种环共需5次灼烧处理C将接种后的图平板放入培养箱中培养时无需倒置D步骤操作时都不需要在酒精灯火焰旁进行解析:选A。打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需再次通过火焰,塞上棉塞才可以,A正确;每次接种前后都要灼烧接种环,因此完成步骤中的5次划线操作共需灼烧接种环6次,B错误;划线接种结束后,将平板倒置后放入培养箱中培养,这样可以防止表面的水分过快挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染,C错误;步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁
3、进行,防止被杂菌污染,D错误。4(2022衢州一模)实践是动手和动脑的过程,也是解决实际问题的过程。下列有关生物技术实践的叙述,错误的是()A需灭菌的试管等玻璃器皿可用牛皮纸包好放干热灭菌箱灭菌B倒平板后需要持续间歇晃动,以保证固体培养基的表面平整C平板划线时,每次转换划线角度后都需要灼烧接种环再划线D微生物实验材料在丢弃前一定要进行灭菌处理以免污染环境答案:B。倒平板时培养基仍然是液态的,不需要通过晃动来保证培养基表面平整,B错误。5(2022湖州开学检测)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离和计数的叙述,正确的是()A分解尿素的细菌
4、是以尿素的分解产物CO2为碳源的B倒平板时应将打开的培养皿皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C培养基中K2HPO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D若实验组菌落平均数为37个/平板,空白对照平板上有3个菌落,则本组菌落数的平均值为34个/平板解析:选C。分解尿素的细菌是异养型细菌,不能以CO2为碳源,A错误;倒平板时,正确的做法是用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,B错误;无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定,所以培养基中K2HPO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定,C正确;在完全正确的操作情况下,空白
5、对照组中不应出现菌落,若空白对照组出现菌落,说明操作过程中存在杂菌污染,属于实验失误,所有实验数据均不应采用,D错误。6.(2022浙江选考模拟)右图为划线分离法接种的示意图,下列说法正确的是()A观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是B图中所示的4次划线后,都应将接种环放在酒精灯上灼烧C图中所示的4次划线前,都应将接种环放在酒精灯上灼烧D图中区域最可能出现单菌落,区域不可能出现单菌落答案:B7(2022山东德州一模)尿酸氧化酶能分解尿酸(C5H4N4O3),为获取尿酸氧化酶高产菌株用以研制治疗高尿酸血症的酶类药物,科研人员从海洋泥土中取样后富集培养,3天后吸取培养液梯度稀释到106,然后接种
6、到固体培养基上分离培养。挑取单菌落检测尿酸氧化酶的酶活性(用每分钟转化1 mol尿酸所需要的酶量表示),结果如下表所示。下列分析错误的是()菌株1234酶活性100501420A.从海洋泥土中取的样品需在无菌条件下富集培养B需要在以尿酸为唯一氮源的固体培养基上分离培养C菌株3的酶活性最高,可作为实验所需的目的菌D分离培养时利用了平板划线法进行接种解析:选D。分离培养时利用了稀释涂布平板法进行接种,D错误。8.物质W是一种含氮有机物,物质W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某小组欲从土壤中筛选出能降解物质W的细菌,结果如图所示。下列说法错误的是()A透明圈的形成是因为物质W被分解B所用的
7、选择培养基应该以物质W为唯一氮源C甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源D乙菌落中的细菌都能降解物质W,不需要进一步纯化解析:选D。乙菌落中的细菌不一定都能降解物质W,因此仍需要进一步纯化,D项错误。9下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。成分蛋白胨乳糖焦糖K2HPO4指示剂琼脂含量(g)10.05.05.02.00.212.0将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL(1)若根据用途划分,该培养基属于_(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必须怎样更改?_,并用_作为指示剂。(2
8、)图1和图2是培养大肠杆菌的结果图,则获得图2效果的接种方法是_。运用图1所示接种方法统计的菌落数常常比活菌的实际数目少,其原因是_。(3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行_;操作者的双手需要进行清洗和_。答案:(1)鉴别将蛋白胨改成尿素酚红(2)平板划线法当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落(3)灭菌消毒10将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制_的生长,加入了链霉素的培养基属于_培养
9、基。(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有_(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有_(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是_,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有
10、人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是_。解析:(1)在培养基中添加(或减去)某种化学成分,使得只有某些特定的微生物能够生长,其他微生物均不能生长,这样的培养基称为选择培养基。若M培养基是用于真菌的筛选,则应加入链霉素以抑制细菌的生长,其属于选择培养基。(2)马铃薯浸出液中含有淀粉、蛋白质、脂质、无机盐、水等多种物质,因此,除氮源外其中还有微生物生长所需要的碳源、无机盐等营养要素。进入细胞的氮源可参与合成蛋白质、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(3)加入显色剂碘碘化钾溶液后,淀粉遇碘变蓝,而淀粉的水解产物则不发生这种反应。若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并
11、培养,土壤中能产生淀粉酶的微生物可将淀粉分解,菌落周围就会出现透明圈,这样,我们就可以通过是否产生透明圈来筛选能产淀粉酶的微生物了。(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,结果的重复性太差,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。答案:(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘碘化钾溶液淀粉遇碘碘化钾溶液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围的淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差素养提升11下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是()成分NaNO3K2HPO4MgSO47H2O(CH2O)
12、蒸馏水青霉素含量3 g1 g0.5 g30 g定容至1 000 mL0.1万单位A.根据物理特性划分,该培养基属于固体培养基B微生物无法在该培养基表面形成肉眼可见的菌落C根据培养基的配方可知,该培养基培养的微生物的同化作用类型是自养型D向固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基解析:选B。液体培养基中加入凝固剂(如琼脂)可形成固体培养基,题表所示的培养基配方中没有加凝固剂,因此该培养基属于液体培养基,A错误;微生物可在固体培养基表面形成肉眼可见的菌落,B正确;该培养基中的(CH2O)可作为有机碳源,因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型,C错误;向固体培养基中加入少量水不能形成液体培养基,D
13、错误。12(2022宁波一模)养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸,这两种物质可由硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中,下列说法正确的是()A需要配制添加一定浓度铵盐的LB固体培养基,以筛选硝化细菌B应对采集底泥使用的工具进行灭菌,全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C采用平板划线法进行分离和计数时,还需与未接种的空白培养基同时培养D若空白对照组上长出了菌落,需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数答案:B13(2022山东济宁一模)下图表示研究人员在实验室中使用的分批培养细菌的方法,下列叙述不正确的是()A尿素分解菌可利用培养基中的尿素是因为能合成脲酶B在酒精
14、灯火焰附近打开皿盖,用接种环在培养基表面迅速划35条平行线,灼烧接种环后再划线C液体选择培养基通常可用于选择培养,增加目标菌种的浓度D将锥形瓶放在摇床上振荡培养能提高溶氧量和养料的利用率解析:选B。在酒精灯火焰附近将皿盖打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划35条平行线,盖上皿盖,灼烧接种环待其冷却后再划线,B错误。14某研究小组尝试利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行大肠杆菌活菌数目的测定,将90 mL无菌水和10 mL的河流水进行混合后添加至滤杯中,并进行下图所示的实验操作。下列相关叙述错误的是()A滤膜法可用于抗生素、尿素、动物血清等不耐高温材料的除菌B培养基中必须添加指示剂用于鉴别大
15、肠杆菌C上述实验操作过程可检测滤膜的过滤效果D实验操作过程中需要在酒精灯火焰附近操作,且镊子使用前需进行灼烧灭菌解析:选C。题述实验操作过程是通过检测滤膜上的菌落来判断水样中的大肠杆菌及其数量,但该过程并不能检测滤膜的过滤效果,若想检测滤膜的过滤效果,应将过滤后的水样通过稀释涂布平板法接种于基本培养基上,培养后可检测通过滤膜的水样中是否存在微生物或微生物数量的多少,C错误。15已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。号培养基:在LB固体培养基中加入X(5 g/L)。号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g
16、/L),其他无机盐(适量),X(15 g/L)。号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(45 g/L)。回答下列问题:(1)在号培养基中,为微生物提供氮源的是_。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_。(2)若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会_,其原因是_。(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是_。解析:(1)在号培养基中,酵母浸膏、蛋白胨可以为微生物提供氮源,、号培养基中为微生物提供碳源的是有机物X。(2)号培养基中,碳源只有X,不能降解X
17、的细菌会因缺乏碳源而不能增殖,使该类细菌比例降低。(3)利用固体培养基对菌落进行计数时,需采用稀释涂布平板法进行接种。答案:(1)酵母浸膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法16(2020高考江苏卷)产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株,科研人员开展了相关研究。请回答下列问题:(1)常规微生物实验中,下列物品及其灭菌方法错误的是_(填编号)。编号物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧(2)称取1.0 g某土壤样品,转入99 mL无菌水中,制备成菌悬液,经_后,获得细胞密度不同的菌悬液。分别取
18、0.1 mL菌悬液涂布在固体培养基上,其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落,则该样本中每克土壤约含酵母菌_个。(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力,对分离所得的菌株,采用射线辐照进行_育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以_为唯一碳源的固体培养基上,培养一段时间后,按照菌落直径大小进行初筛,选择直径_的菌落,纯化后获得A、B两突变菌株。(4)在处理含油废水的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能,进行了培养研究,结果如下图所示。据图分析,应选择菌株_进行后续相关研究,理由是_。解析:(1)涂布器一般用干热灭菌法或灼烧灭菌法进行灭菌。(2)99 mL无菌水中加入1.0 g土壤制成的菌悬液为100 mL,取稀释10倍后的菌悬液0.1 mL涂布平板,平板上的平均菌落数为46,则每克土壤约含酵母菌460.110100 4.6105(个)。(3)辐射可以提高基因突变的频率
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