皮肤性病学优秀医学论文范文

1、中性粒细胞淋球菌感染模型的建立来源：医学论文发表一一赛恩斯作者：陈峰，陈蕾，张国学，樊翌明，吴志华 作者单位：（广 东医学院附属医院皮肤科，广东湛江【摘要】目的研究诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及一氧化氮（NO） 在中性粒细胞淋球菌感染模型中的表达。方法分离正常人外周血中性粒细胞，在10%胎牛血清DMEM培养液上培养3 h, A组加入空 白培养基，B组加入淋球菌菌液，随后在0、3、8、12 h分别以实时 定量荧光PCR测定iNOS mRNA表达，用镉还原法检测 NO浓度。 结果B组中iNOS mRNA表达和NO水平均较A组升高（P0.01）, NO浓度在8h达到高峰。结论 中性粒细胞淋球菌感染

2、模型可成功模 拟该菌体内微氧感染环境，可用于研究淋球菌致病机制。【关键词】 淋球菌；中性粒细胞；一氧化氮Establishment of gonococcus induced neutrophil infection modelCHEN Rong yi, ZHANG Guo xue, CHEN Lei, FAN Yi ming, WU Zhi hua （Department of Dermatology, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, China） ZZ 1111111111IAbstra

3、ct:Objective To investigate the expression of inducible nitricoxide synthase (iNOS) and nitric oxide (NO) in gonococcus induced neutrophil infection model. Methods Peripheral blood neutrophils were islolated from health men, and then cultured in DMEM medium containing 10% fetal calf serum for 3 h. B

4、lank medium or gonococcal inocula was added into group A or group B. NO concentration and iNOS mRNA expression at 0, 3, 8 and 12 h were determined by cadmium reduction method and real time quantitative fluorescent PCR, respectively.Results Compared with group A, iNOS mRNA expression and NO level inc

5、reased obviously in group B (P0.01), and NO content peaked at 8 h.Conclusion The gonococcus induced neutrophil infection model can simulate the micro oxygen infection circumstance in vivo, and is suitable for studying the pathogenic mechanism of gonococcus.Key words: gonococcus; neutrophil; nitric o

6、xide淋球菌为兼性厌氧的革兰阴性双球菌，可引起生殖系统急性化脓 性炎症，脓性分泌物中存在大量中性粒细胞1。中性粒细胞是一种专职吞噬细胞，感染初期可在炎症介质的介导下聚集在病灶处，通过ZZ 1111111111吞噬摄入致病菌2。中性粒细胞杀伤吞噬微生物的机制包括活性氧 簇、抗菌蛋白、一氧化氮（NO）等3。尽管中性粒细胞在淋球菌感染 初期可迅速聚集到病灶，但淋病的迁延不愈表明中性粒细胞引起的炎 症反应不足以彻底清除淋球菌。中性粒细胞可杀灭大部分吞噬的细菌（如大肠杆菌），但部分淋球菌可在中性粒细胞内生存甚至繁殖45。淋球菌是如何实现免疫逃逸并得以在中性粒细胞内生存的问题目前 尚未完全阐明。本研究拟

7、建立中性粒细胞淋球菌感染模型，观察 NO和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达，旨在将其用于研究淋球菌致病 机制。1材料与方法淋球菌菌株淋球菌株ST2951用WGC淋球菌专用培养基培养（购自中国科学 院武汉生物制品研究所）制备成OD600值为0.15的细菌悬液。外周血中性粒细胞的分离6名健康成年男性分别抽取2 mL肝素抗凝静脉血，取抗凝血与|Hank液混匀后小心加入到人中性粒细胞分离液中（天津激洋生物制品科技有限公司，LTS1087）, 18C、2000 r/min离心20 min,待离心管由上至下分4层;吸取第3层（中性粒细胞）加入到含Hank液15 mL的试管中，充分混匀，2000 r/m

8、in离心10 min,弃上清，沉淀反复洗 涤2次，再用含10%胎牛血清DMEM培养液重新悬浮细胞（1 X 107/mL）;充分混匀后滴入细胞培养板中，置 5%CO2培养箱37c培养 3 h备用。取少量细胞液涂片，作台盼蓝拒染实验，鉴定其存活率。中性粒细胞淋球菌感染模型的建立取出培养板，A组每孔加入含10%胎牛血清DMEM培养液150 wL, B组每孔滴入淋球菌悬液150 pL;加样完毕后继续孵育，按0、 3、8、12 h时间点在培养孔中吸出培养液作相应检测，每组设 3个复 孔。实时荧光定量 PCR检测iNOS mRNA含量用Trizol溶液（美国GIBCO公司）提取中性粒细胞总RNA,经紫 外

9、分光光度计检测符合纯度后逆转录为 cDNA ,再进行实时荧光定量 PCR检测。根据GeneBank序列设计iNOS、B actin引物，序列见 ZZ 1111111111表1。反应条件：94c预变性3 min, 94c变性5 s, 60c退火10 s,72c延伸20 s,共40个循环。应用SYBR Greenl荧光染料（美国Biotium公司）技术行实时定量PCR反应，获取各组标本的标准曲线，计算机分析Ct值（每个反应管内荧光强度达到系统认为有目的DNA合成时的循环数，以阴性对照作参考）。表1引物序列NO浓度检测收集细胞培养液-70C保存，用镉还原法测定亚硝酸盐浓度。培 养液以3000 r/m

10、in离心5 min,用NaOH和硫酸锌作蛋白沉淀处理， 3000 r/min离心5min,取上清液1.5 mL依次加入0.08 mmol/L甘氨 酸 NaOH缓冲液1.0 mL、活化镉3.0 g,摇匀后放置90 min;取1 mL 加入新试管，依次加入1%磺胺0.5 mL、0.1% N 1 蔡基乙二胺 盐酸0.5 mL,摇匀后静置20 min,用721分光光度计测OD值（入=546 nm,灵敏度=1,空白调0）,根据该值计算亚硝酸盐浓度。统计学处理数据以（士 s）表示，采用SPSS12.0统计软件进行单因素方差分析 及q检9t和t检验。|2结果中性粒细胞中iNOS mRNA含量实时荧光定量PC

11、R显示：淋球菌刺激后B组中性粒细胞中iNOS mRNA含量均升高，而A组变化不明显（图1,表2）;同一时间点相比， B组的iNOS mRNA表达显著高于 A组（F=51.87, P0.01卜细胞培养液中NO水平A组NO水平明显低于B组（P0.01）。A组各时间点NO浓度差 异无统计学意义（F=0.865,P漆2两组NO与iNOS mRNA表达同一 时间点两组间比较，*P0.01;同组不同时间点间比较，#P0.01。0.05）;B组不同时间点NO 浓度差异有统计学意义 （F=106.79,P0.01） 8 h 时最高（表 2）。iNOS mRNA与NO表达的关系|Spearman相关分析表明，B

12、组中性粒细胞iNOS mRNA表达与细胞培养液中NO水平呈高度正相关（r=0.87, P0.05)。治疗组的副作 用发生率为9.1%,明显低于对照组的76.2%(x 2=19.88, P0.05)。不良反应：治疗组有2例(9.1%)发生皮肤毛囊性丘疹及皮肤红斑， 均出现在用药第3个月。对照组共有16例(76.2%)发生不良反应，其 中3例出现毛囊性丘疹，5例出现皮肤红斑及毛细血管扩张，3例出 现皮肤萎缩，5例出现不同程度的色素沉着。不良反应发生时间：5例出现在第1个月，10例出现在第2个月，1例出现在第3个月，未 作特殊处理。经统计学分析，两组在副作用发生方面的差异有统计学 意义(X 2=19

13、.88, P0.05）;但卤米松副作用少而轻，且 发生较晚，在观察期第3个月才出现。对照组有16例出现不良反应， 发生率为76.2%,与治疗组比较差异有统计学意义（P0.01）,且副作 用发生较早，多出现在观察期治疗第1、2个月。由于儿童皮肤较薄， 药物吸收较多，所以用药不宜超过 3个月5。综上所述，卤米松乳膏是治疗儿童面颈部白瘢风疗效好、副作用少的药物之一，值得临床推广应用。【参考文献】1侯霞，梁玉梅.稳定期白瘢风自体表皮移植术治疗的施护与体-11111111 I r会J.广东医学院学报，2002, 20(1): 71.2中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组.白瘢风 的临床分型及疗

14、标准(2003年修订稿)J.中国中西医结合皮肤性病杂 志，2004, 3(1): 65.3Kovacs S O.VitligoJ. J Am Acad Dermatol,1998, 38(5Pt1):647666.4王侠生，廖康煌.杨国亮皮肤病学M.上海：上海科学技术文献出版社，2005: 651.5李建明，唐杨婷.卤米松乳膏治疗儿童白瘢风临床 27例疗效观察J.中国皮肤性病学杂志，2005, 19(3):186.中药配合针灸治疗中老年人带状疱疹后遗神经痛的临床观察作者：赖新平 作者单位：广东省兴宁市慢性病防治院皮肤科,211111111I r广东兴宁514500【摘要】目的：探讨中药配合针灸

15、治疗老年带状疱疹后遗神经痛的疗效。方法：将166例患者随机分为中药口服加穴位针灸治疗组 （A 组）72例;针灸组（B组）56例;西药口服组（C组）38例，比较3组临床疗 效。结果：A组与B组及C组总有效率比较差异均有统计学意义（P0.050.01）。结论：口服中药配合针灸治疗带状疱疹后遗神经痛疗 效显著，且无明显不良反应，易被患者接受。【关键词】带状疱疹；神经痛；后遗症；中药;针灸Effect of combined therapy of traditional Chineses medicine and acupuncture on post herpetic neuralgia after

16、 zoster in the middle aged and eldersLAI Xin ping(Dermatology Department, Preventive and Treatment Hospital forChronic Diseases in Xingning, Xingning 514500, China)llABSTRACT Objective: To explore the effects of combined therapy of traditional Chineses medicine and acupuncture on post herpetic neura

17、lgia after zoster in the middle aged and elders. Methods: A total of 166 cases were randomly divided into combined therapy group (Group A, 72 cases) , acupuncture group (Group B, 56 cases), and western medicine group (Group C, 38 cases), and clinic effects in three groups were compared. Results: The

18、re were significant differences of total effective rate among three groups (P2检验，检9水准 =0.05。2结果3组疗效见表1。A组总有效率（95.8%）明显高于B组（91.1%）和C 组（65.8%）（P0.050.01）。表1 3组临床疗效比较（略）3讨论带状疱疹是由水痘带状疱疹病毒引起累及神经及皮肤的病毒性皮肤病，病因传统医学描述为：（1）多因情志不遂、饮食失调，以致脾失健运，湿浊内停，郁而化热，湿热搏结，兼感毒邪而发。（2）以针灸言，带状疱疹病常为心经火旺、脾肺湿热与肝胆火旺所引发。再者带状疱疹后遗神经痛为“络”病，“久病入络”、“久痛入络”。络 病，系指毒邪（病毒），侵入脉络、孙络、浮络等而导致的病变，毒邪 ZZ 1111111111的入侵破坏了神经细胞，使之发炎、出血、坏死，再加患者多是年老体弱，久病不愈，气血虚衰，不养脉络，造成了 “至虚之处，便是留邪之地”；这些细小万亿数计的孙络、浮络被破坏而且还滞留了一些 毒邪的残余，使其不能行使网络循环作用，孙络、浮络处于“细急” 状态（即络脉的收引挛缩状态），故疼痛不休。络病多属久病痼疾，正 虚邪实。所以在治疗上重在理气活血，以柴胡疏肝散疏肝