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1、基因工程的原理及技术练习题1下列关于限制酶的说法正确的是()限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键【答案】B【解析】限制酶主要从原核生物中分化出来,A错误;一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,B正确C错误;不同的限制酶切割DNA后会形成黏性末端、平末端,限制酶的作用部位是磷酸二酯键,D错误,故选B。下列叙述不正确的是()质粒在宿主细胞内可整合到染色体DNA上质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的烟草花叶病毒可作为基因工程中的运

2、载体【答案】B【解析】质粒是细胞中的小型环状DNA,进入细胞后可以整合到宿主细胞的染色体DNA上,A正确。质粒是DNA,不是细胞器,B错误。质粒一般不能直接用于基因工程,所以需要人工的改造,C正确。在基因工程中可以做运载体的有:质粒、动植物病毒、久噬菌体衍生物,烟草花叶病毒是植物病毒,可以做运载体,D正确。3下列有关基因工程的相关叙述,不正确的是()目的基因主要指编码蛋白质的结构基因基因表达载体的构建是基因工程的核心限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键【答案】D【解析】目的基因要表达目的性状,故A正确。目的基因依赖基因表达载体导入受体细胞,故B正确。目前发现

3、的限制酶都是切割DNA的酶,不能切割烟草花叶病毒的RNA,故C正确。DNA连接酶可催化脱氧核糖和磷酸之间形成磷酸二酯键,故D错误【解析】4下列技术中,不是依据DNA分子杂交原理的是()检测目的基因是否导入了受体细胞检测目的基因是否转录出了mRNA检测目的基因是否翻译合成蛋白质快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量【答案】C【解析】用目的基因制成基因探针,依据碱基互补配对原则,检测目的基因是否导入了受体细胞、是否转录出了mRNA、快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量,而目的基因是否翻译合成蛋白质的检测是用抗原-抗体的杂交实验,虽然也属于分子水平的检测,但不是依据DNA分子杂交的原理。故选C。5下列有关基因

4、工程的叙述,不正确的是()转基因植物操作时,受体细胞用植物的受精卵或者体细胞均可限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外DNADNA连接酶连接的是黏性末端两条主链上的磷酸和脱氧核糖作为基因工程的载体质粒,因为其具有能自我复制,含有标记基因,为单链DNA等特点【答案】DA项正确:植物细胞具有全能性,所以受体细胞用植物的受精卵或者体细胞均可;B项正确:限制酶对自身细胞具有保护作用,一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA;C项正确:DNA连接酶连接的是黏性末端两条主链上的磷酸和脱氧核糖;D项错误:质粒是小型环状双链DNA分子。【能力提升】1已知某种限制性核酸内切酶在一线性DNA分子上有3个酶

5、切位点,如图中箭头所示。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是()TOC o 1-5 h zIIIabcd纱件DNA分于的酚切示虑图A.3B.9C.4D.10【答案】B一个酶切位点切割,得到的片段是a、b+c+d、a+b、c+d、a+b+c、d,两个酶切位点处切割,得到的片段是a、b、c+d、a+b、c+d、a、b+c、d,三个酶切位点同时切割,得到的片段是a、b、c、d,综合分析得到的不同片段有a、b、c、d、a+b、b+c、c+d、a+b+c、b+c+d,共9个不同的片段

6、,B正确。C.DNA聚合酶D.限制酶【答案】A【解析】将两个DNA片段连接在一起的酶为DNA连接酶。质粒是基因工程中最常用的载体,有关质粒的说法正确的是()质粒不仅存在于细菌中,某些病毒也具有细菌的基因只存在于质粒上质粒为小型环状DNA分子,存在于拟核(或细胞核)外的细胞质基质中质粒是基因工程中的重要工具酶之一【答案】CA项错误:病毒无细胞结构,不存在质粒;B项错误:细菌为原核生物,遗传物质主要存在拟核区域;C项正确:质粒为小型环状DNA分子,存在于拟核(或细胞核)外的细胞质基质中;D项错误:质粒是基因工程中常用的运载体,基因工程中的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶。C.限制酶D.DNA

7、连接酶【答案】B【解析】基因表达载体的组成有目的基因、启动子、终止子和标记基因等。启动子位于目的基因的首端。5.为了构建重组质粒pZHZ2,可利用限制酶E、F切割目的基因和质粒pZHZI,然后用相应的酶连接。据图回答,下列叙述中错误的是()基因工程的核心就是构建重组DNA分子质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开质粒pZHZI、pZHZ2复制时一定会用到DNA聚合酶【答案】C基因工程的核心是基因表达载体的构建,A正确;RNA聚合酶是催化转录的酶,质粒pZHZ2上一定有相关的基因可以转录,所以质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点,B正确;重组质粒

8、中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点,因此重组质粒pZHZ2除了能被限制酶G、H切开,也能被限制酶E、F切开,C错误;质粒的化学本质是DNA,DNA复制时需要DNA聚合酶的催化,D正确。【终极闯关】1、(20105届江苏省宿迁市三校质检)某种线性DNA含有限制性核酸内切酶EcoRI的1个酶切位点。该DNA样品(甲)经EcoRI酶切后,在DNA连接酶催化F形成产物乙。则反应液中产物乙共有()y-GM1TC-J丘叫f1c+AMTGj号越$1y-CTTJUG1亍J-PlwC-YJ1EA.1种B.2种C.3种D.4种【答案】C【解析】根据题意可知,线性DNA含有限制性核酸内切酶EcoRI的1个酶切位

9、点,因此经过该酶切割后会形成两个相同的黏性末端,但是黏性末端两侧的序列不同,可以分别用a和b表示,由于a和b具有相同的黏性末端,因此利用DNA连接酶催化后,能够产生aa连接、bb连接、ab连接三种产物。依据以上分析,选C。B.图示此过程中将目的基因导入受体细胞时最好采用显微注射法C.抗虫基因整合到受体细胞核DNA上是其在植物体内稳定遗传的关键D.细胞的染色体上含有抗虫基因,植株也不一定会表现出抗虫性状【答案】B【解析】为重组质粒,其构建过程需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶两种酶参与,A正确;图示此过程中将目的基因导入受体细胞时最好采用农杆菌转化法,B错误;抗虫基因整合到受体细胞核DNA上是其

10、在植物体内稳定遗传的关键,C正确;细胞的染色体上含有抗虫基因,说明目的基因导入受体细胞,但目的基因在受体细胞中不一定能成功表达,植株也不一定会表现出抗虫性状,D正确。3、(2015届北京市昌平区高三统考)草甘膦是一种低毒性的广谱除草剂,能非特异性侵入并杀死所有的植物。为避免被草甘膦杀死,科学家将细菌的EPSPS基因(控制EPSPS合成酶合成的基因)转入小麦,提高其对草甘膦的耐受性。以下说法正确的是()EPSPS基因转录时以DNA的两条链同时作为模板,提高转录效率EPSPS基因导入小麦叶肉细胞后,抗虫性状可随传粉受精过程遗传可用抗原抗体杂交的方法检测细胞中是否有EPSPS基因的表达产物利用Ti质

11、粒将EPSPS基因整合到小麦染色体上时需要DNA聚合酶【答案】CEPSPS基因转录时以DNA的一条链作为模板,A错误;EPSPS基因导入小麦叶肉细胞后,由于小麦的叶肉细胞是体细胞,进行的是有丝分裂,不能产生精子,所以其抗虫性状不能随传粉受精过程遗传,B错误;可用抗原抗体杂交的方法检测细胞中是否有EPSPS基因的表达产物,C正确;利用Ti质粒将EPSPS基因整合到小麦染色体上时需要DNA连接酶,D错误。4、(2015重庆卷)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是()表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点借助抗生素抗性基因

12、可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用【答案】C人肝细胞中胰岛素基因不表达,通过人肝细胞mRNA反转录不能得到胰岛素基因,A项错误;基因表达载体的复制原点和启动子是不同的位点,基因表达载体的复制开始于复制原点,胰岛素基因的表达开始于启动子,B项错误;抗生素抗性基因可作为基因工程中的标记基因,可将含有目的基因的受体细胞筛选出来,C项正确;启动子在基因表达的转录中起作用,终止密码子在基因表达的翻译中起作用,D项错误。5、(2015全国卷II)已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨

13、酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的进行改造。以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰基因或合成基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括的复制;以及遗传信息在不同分子之间的流动,即:。蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过和,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物进行鉴定。【答案】氨基酸序列(或结构)PP1DNA和RNA(或遗传物质)DNARNA、RNAtDNA、RNAt蛋白质(或转录、逆转录、翻译)设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能【解析】蛋白质的功能由蛋白质的三

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