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1、精品文档赤水市人民医院检验科SOP文件输血科SOPC件（第一版）：0 0 年 H-月1欢立下载精品文档目录 TOC o 1-5 h z 1、5%红细胞悬液的制备 12、A B、O血型鉴定 23、Rh血型鉴定 34、盐水介质交叉配血 55、凝聚胺交叉配血 72欢立下载精品文档3欢立下载精品文档标题： 5% 红细胞悬液的制备版本号：A修订号：0文件编号：XXX-MY-SOP-001发布日期：2010年10月06日生效日期：2010年11月01日发布部门：编制人： 王兴跃审核人： 龚光卫批准人：贞他：共1页5%红细胞悬液的制备一、制备目的5%红细胞悬液一般用于血型鉴定及交叉配血。二、试剂与设备生理盐

2、水、1ml吸管、试管、离心机三、操作步骤取全血1ml,加等渗盐水2-3ml,充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2-3 ml ,按上述方法洗涤，共3次。最后取压积RBC 5滴，加新鲜等渗生理盐水4 ml,即成5%红 细胞悬液。（标准RBC盐水悬液最多存放3天，用ACD容液冷藏保存 最长1周）i欢在下载精品文档标题：A、B、O血型鉴定版本号：A修订号：0文件编号：XXX-MY-SOP-002发布日期：2010年10月06日生效日期：2010年11月01日发布部门：编制人：王兴跃审核人： 龚光卫批准人：贞他：共2页A、B、O血型鉴定一、方法试管法二、原理正定型：用标准抗-A、抗-B分型血

3、清测定红细胞上有无 A抗原或B抗原来确定ABOfc型。反定型：用已知有A抗原、B抗原及H抗原的红细胞测定血清中有无抗-A、抗-B来确定ABOa型。三、试剂与材料.标准抗-A、抗-B血清。.标准A、B、O型红细胞：取健康献血员之 A、B、O三种血型的红细 胞各3份，用生理盐水洗涤3次，分型混合，用红细胞保养液配制 成5娼液，经标准抗血清鉴定特异性合格，分装 4 c保存。.受检者5%!细胞悬液及其血清。四、操作程序正定型：取试管2支，分别标明抗A、抗B,并分别加入标准的抗A、抗B血清各2滴，加受检者的5%细胞悬液各2滴，离心 1000rpm 一分钟，先观察试管中上清液有否溶血，然后轻摇试管，肉 眼

4、及显微镜观察是否凝集，按下表报告结果。反定型：取试管3支，分别标明A、R Q并分别加入5晰准 A、B、O型红细胞悬液各2滴，加受检者的血清每管2滴，离心1000rpm 一分钟，先观察试管中上清液有否溶血，然后轻摇试管，肉眼及显微2欢在下载精品文档镜观察是否凝集，按下表报告结果。ABO&型正反定型结果判断（“+”为凝集，“-”为不凝集）分型血血+受检者红细胞抗-A血清抗-B血清受检者受检者血清+标准红细胞血型A型红细胞 B型红细胞O型红细胞+-十-+A-+-B+-O+-AB-五、质量保证措施.分型血清质量效能符合要求，用毕速放冰箱 4 c保存，以免效价 下降及细菌污染。.试剂红细胞以二个健康者同

5、型新鲜红细胞混合， 用生理盐水洗涤（.所用试管、滴管、破片要清洁干燥，防止溶血。.操作时应先加血清、再加红细胞恳液，以免使血清中抗体被稀释。.离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或 假阴性出现。.如室温过低，应将试管放入37c水浴箱中保温。.判断结果应仔细核对、记录、避免笔误。六、临床意义.防止输ABO型不合，引起输血反应。临床上多采用正向定型, 只有结果可疑时再做反向定型。.避免ABO&型不合，引起器官移植中的超急性排斥。.用于母子血型不合，引起新生儿溶血病的诊断。.用于可疑血迹，毛发和亲缘鉴定，以及与某些疾病相关的调查等。七、参考资料. ?全国临床检验操作规程？第二版.试

6、剂盒说明书3欢在下载精品文档标题：Rh血型鉴定版本号：A修订号：0文件编号：XXX-MY-SOP-003发布日期：2010年10月06日生效日期：2010年11月01日发布部门：编制人： 王兴跃审核人： 龚光卫批准人：贞他：共2页Rh血型鉴定一、 方法：试管法应用标准抗-D血清与被检红细胞发生凝集与否而定，发生凝集者即有D抗原，为Rh阳性，反之则为Rh阴性。二、试剂与材料标准Rh抗血清：抗-Do受检者5%!细胞悬液。三、操作程序取试管1支，作抗D标记，加入抗-D血清2滴，再加受检者5% 红细胞悬液2滴，混匀后离心1000rpm一分钟，观察凝集结果。结果判断：凝集为Rh阳性，不凝集为Rh阴性。四

7、、质量保证措施如抗-D检测管不凝集，应进一步用抗人球蛋白试验证实，以排 除D1的因素。Rh血型鉴定应严格控制温度与时间，同时由于 Rh抗原、抗体 凝集反应的凝块比较疏松，观察结果时应轻轻转动试管，不要用力摇 动。为避免发生假阴性，受检者红细胞应新鲜。阳性对照取3人O型红细胞混和配成。阴性对照一般应选择 AB型 血清一滴，测定时加5%阳性红细胞悬液一滴和试剂一滴混匀，。抗D试剂质量效能正常，在有效期内使用。五、临床意义4欢在下载精品文档1,血型不合输血引起的溶血反应：“天然”产生的RM体极为少 见，几乎所有的Rh抗体都是由于输入血型不合的血液或胎母 Rh血型 不合等同种免疫作用而产生的。因机体已

8、产生Rh抗体.在输入Rh血 型不合的血液时，将会发生溶血性输血反应，甚至导致死亡。2.新生儿溶血病： 若胎儿与母亲Rh抗原不同，母亲受到胎儿血液中 不配合的血型抗原刺激，可以产生相应的血型抗体。大约5%白Rh阴性产妇含有抗D抗体。如果发生在第一胎，一般对胎儿无明显影响。如再次妊娠Rh阴性胎儿时，可产生新生儿溶血病。六、参考资料：1. ?全国临床检验操作规程？第二版；2 .试剂盒 说明书5欢立下载精品文档标题：盐水介质交叉配血版本号：A修订号：0文件编号：XXX-MY-SOP-004发布日期：2010年10月06日生效日期：2010年11月01日发布部门：编制人： 王兴跃审核人： 龚光卫批准人：

9、贞他：共2页盐水介质交叉配血一、方法盐水介质交叉配血法 二、原理用以检测受血者（献血者）血清（浆）中有无破坏献血者（受血 者）红细胞的抗体。如存在相应的抗体，则交叉管中将发生凝集或溶 血现象，此即为交叉不合，反之则为相合。三、试剂与材料.受血者血清（浆）.受血者5%!细胞悬液.献血者血清（浆）.献血者5%!细胞悬液四、操作程序见下表：主管次管受血者血清（浆）（滴）2/受血者5%：细胞悬液（滴）/2献血者血清（浆）（滴）/2献血者5%：细胞悬液（滴）2/6欢在下载精品文档混匀，离心10002000rpm 1-2分钟，肉眼及显微镜观察结果 五、结果判断主、次、混合管均无凝集、无溶血现象，表示无配血

10、禁忌，可 以输血。主、次、混合管均有凝集和/或溶血现象，表示有配血禁忌， 绝不可输血。六、临床意义减少临床输血反应，减轻病人输血危险，提高输血质量七、质量保证措施.先核病人姓名，标本是否合格，试管上联号与化验单上联号是否 相同，是否有抽血者姓名，以防血标本混调。.病人血液及献血员红细胞配成 5溢右红细胞悬液，不要太浓太 稀。.必须做正反血型鉴定保证 ABO型。.结果观察时，除肉眼观察外，尚需显微镜观察。.要注意真、假凝集的鉴别。八、参考资料1 . ?全国临床检马操作规程？第二版7欢立下载精品文档标题：凝聚胺父叉配血版本号：A修订号：0文件编号：XXX-MY-SOP-005发布日期：2010 年

11、0月06日生效日期：2010年11月01日发布部门：编制人：王兴跃审核人：龚光卫批准人：虫他：共2页凝聚胺交叉配血一、方法凝聚胺介质交叉配血二、原理凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减 少RBCW围的阳离子云，以促进 RBCf口血清（浆）中的抗体结合；其 后加入凝聚胺（Polybrene ）溶液，以中和RBGg面带有的负电荷， 使RBQ生非特异性的凝集；最后加入悬浮液（Resuspending）,中 和凝聚胺的作用，使正常的RBUF特异性凝集散开，结果为阴性。如 果RBCM相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，结 果为阳性。三、试剂组成LIM （Low Io

12、nic Medium ）:葡萄糖、EDTA（2Na）Polybrene Solution（黑色瓶）：Polybrene、NaCLResuspending Solution （白色瓶）：柠檬酸钠、葡萄糖Positive Control :抗-D四、操作程序取试管二支，标明主、次侧，主侧管加病人血清（浆）2滴，加供血者5%RB悬液（洗涤或不洗涤均可）2滴；次侧管加病人5%RBC8欢在下载精品文档悬液2滴及供血者血浆2滴。各力口 LIM0.6ml （吸管12滴），混匀，再各加Polybrene （黑色 瓶）2滴，混匀后离心3400rpm10秒，倒掉上清液，留约0.1mL液体。9欢立下载精品文档轻轻摇

13、动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。最后各加入2滴Resuspending （白色瓶），轻轻转动试管混合，并同时观察结果。五、结果判断.如果在30秒内凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚 集，配血结果相合。.如果在30秒内凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反 应，配血结果不合。六、质量保证措施.先核病人姓名，标本是否合格，试管上联号与化验单上联号是否 相同，是否有抽血者姓名，以防血标本混调。.病人血液及献血员红细胞配成 5溢右红细胞悬液，不要太浓太稀。.必须做正反血型鉴定保证 ABOfc型。.可以用EDTA（或枸椽酸钠）之血浆代替血清使用。.若病人血清（浆）含肝素（如洗肾患者），须多加46滴Polybr