LC-20AT高效液相色谱仪验证方案

1、LC-20AT高效液相色谱仪验 证 方 案规格型号LC-20AT设备编号023使用岗位中药制剂室药检岗位制造厂商岛津企业管理(中国)目录 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc342546039 1. 参与验证的相关部门及其职责 PAGEREF _Toc342546039 h 2 HYPERLINK l _Toc342546040 验证小组成员及职责 PAGEREF _Toc342546040 h 2 HYPERLINK l _Toc342546041 验证方案起草 PAGEREF _Toc342546041 h 2 HYPERLINK l _Toc342546042

2、 验证方案批准 PAGEREF _Toc342546042 h 2 HYPERLINK l _Toc342546043 2. 验证目的 PAGEREF _Toc342546043 h 2 HYPERLINK l _Toc342546044 3. 验证依据判断标准： PAGEREF _Toc342546044 h 3 HYPERLINK l _Toc342546045 PAGEREF _Toc342546045 h 3 HYPERLINK l _Toc342546046 PAGEREF _Toc342546046 h 3 HYPERLINK l _Toc342546047 4.验证内容 PAGE

3、REF _Toc342546047 h 3 HYPERLINK l _Toc342546048 PAGEREF _Toc342546048 h 3 HYPERLINK l _Toc342546049 运行确认 PAGEREF _Toc342546049 h 4 HYPERLINK l _Toc342546050 PAGEREF _Toc342546050 h 5 HYPERLINK l _Toc342546051 4.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定 PAGEREF _Toc342546051 h 6 HYPERLINK l _Toc342546052 4.5 紫外检测器 P

4、AGEREF _Toc342546052 h 8 HYPERLINK l _Toc342546053 PAGEREF _Toc342546053 h 9 HYPERLINK l _Toc342546054 5.验证结果及分析评价 PAGEREF _Toc342546054 h 10 HYPERLINK l _Toc342546055 PAGEREF _Toc342546055 h 10 HYPERLINK l _Toc342546056 PAGEREF _Toc342546056 h 10 HYPERLINK l _Toc342546057 6.2 再验证内容 PAGEREF _Toc3425

5、46057 h 10本公司所用的LC-20AT高效液相色谱仪是由工作站软件（N2000）、二元泵(LC-20AT)、手动进样器（20微升定量环）、控制器(CBM-20A)、柱温箱(IN-150)、紫外检测器（SPD-20AT）以及相关管路等组成。主要用于本公司在药物含量检测。1. 参与验证的相关部门及其职责验证小组成员及职责部门验证人员职务验证分工药检科温铭刚组长负责起草验证方案审核、组织协调验证王凯化验员负责撰写LC-20AT型高效液相色谱仪及验证报告刘丹妮化验员保证设备正常运转起草部门签名日期药检科 年 月 日验证方案批准批 准 人签 名日 期药剂科主任 年 月 日2. 验证目的确认LC-

6、20AT高效液相色谱仪的运行环境、性能等各项指标符合器所设计的性能指标。确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为日常检验提供准确的检测结果。3. 验证依据判断标准：3.1.1药品GMP指南2010年版3.1.2LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程3.1.3LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明3.1.4中国药典2010年版二部附录确认安装符合LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明说明书要求。安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。使用样品检测符合中国药典2010年版二部附录要求和LC-20AT型高效液相色谱仪性能指标。项 目要 求检查情况位 置应无强震动源,无强电

7、磁干扰源,通风良好，无明火环境洁净度室内应保持清洁,无腐蚀性气体温度1535，全天温度变化较小光线无阳光直射相对湿度4585%电路电源AC220V22V、50HZ1HZ接地应接地单项结论：_ 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.2运行确认：严格按LC-210AT高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。操作 步骤合 格 标 准结 果操作前准备1.打开电源，仪器自动完成初始化以打开排液阀，按“purge”，泵运行，泵指示灯亮3.清洗完成后，按一次“func”，以改变流速，将流速设定为5ml/min,顺时针方向旋转排液

8、阀旋钮关闭排液阀“pump”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pump”，泵停止，泵指示灯灭5.以上程序完成后，操作的准备工作完成检查压力值1.将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中2.打开排液阀，逆时钟方向旋转排液阀旋钮180，按“CE”3.检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求“purge”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“purge”泵停止，泵指示灯灭单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日 泵性能确认流量准确性确认泵流量设定值误差SS、流量稳定性

9、误差SR 流量设定值（ml/min）测量次数333流动相收集时间（min）1055允许误差SS5%3%2%SR3%2%2%启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、（2）计算SS和SR，结果记录在下表中；流量（ml/min）次数W1W2W2-W1SSSR123123123注：Ss=(eq o(sup 5( ),sdo 2(Fm)-Fs)/Fs100% 式（1）SR=(Fmax-Fmin)/ eq o(sup 5( ),sdo 2(Fm)100% 式（2）式中：Fm F

10、m=(W2-W1)/(t)，流量实测值，ml/min；W2 容量瓶+流动相的质量，g；W1 容量瓶的质量，g； 试验温度下流动相的密度，g/mL；t 收集流动相的时间，min；eq o(sup 5( ),sdo 2(Fm) 同一组测量的算术平均值，mL/min；FS 流量设定值，mL/min；Fmax 同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin 同一组测量中流量最小值，ml/min。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日压力范围可执行标准：测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是

11、否自动停泵。次数设置压力（Mpa）停止压力（Mpa）误差（Mpa）110220330单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定）放置在柱温箱内，选择35、40和45进行检定，按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值，平均值与设定值之差为TS，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性TC，结果记录在下表，柱温箱温度设定值误差TS3，TC1；设定温度（）次数首测温度（）平均温度（）TS（）TC结 果35123456740123456745

12、1234567单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.5 紫外检测器4.5.1 基线噪音和基线漂移选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，二极管阵列检测器的波长设定为254nm，待仪器稳定后，记录基线30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰峰高对应的记录仪标度，计算基线噪音，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示，基线噪音应不超过510-4；衰减倍数测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线噪音结 果注：Nd=KB式中：K：衰减倍数；B：测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线漂移在1h内偏离原点的值为 （AU/h），应不超过510-3A

13、U/h。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日最小检测浓度采用依替巴肽分析色谱条件，进样量20l；取适量的依替巴肽，用甲醇稀释制成110-6g/ml的溶液，连续进样6次，记录依替巴肽/甲醇溶液的色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰峰高，按下式来计算最小检测浓度（CL），应不超过110-6g/ml，结果记录在下表；依替巴肽的称样量稀释倍数依替巴肽的色谱峰高平均峰高最小检测浓度结 果注：CL=2NdcVH20式中：Nd：基线噪声峰峰高；c：标准溶液浓度；H：标准溶液的色谱峰高；V：进样体积单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日在4.4.2所

14、记录的色谱图中，按下式计算Rsd值，Rsd2.0%，并将结果记录在下表中；品 名称样量项目指标实 验 结 果结 果分离度（R）Rsd2%图谱文件名峰面积（A）平均数（M ADVANCE ）Rsd值结 果注：M ADVANCE =(A1+A2+An)/n Rsd= 式中：M：峰面积平均数；A：峰面积；n：测量次数单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日6.再验证要求周期6. 设备大修后需再校验。6. 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。6.1

15、.3 高效液相色谱仪的验证周期为一年，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。6.2 再验证内容进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。验证证书名称：LC-20AT高效液相色谱仪编号：023经验证：LC-20AT高效液相色谱仪各项技术指标符合要求，准许投入生产。总负责人：时 间：LC-20AT高效液相色谱仪验 证 方 案规格型号LC-20AT设备编号023使用岗位中药制剂室药检岗位制造厂商岛津企业管理(中国)目录 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc342546039 1. 参与验证的相关部门及其职责 PAGEREF

16、_Toc342546039 h 2 HYPERLINK l _Toc342546040 验证小组成员及职责 PAGEREF _Toc342546040 h 2 HYPERLINK l _Toc342546041 验证方案起草 PAGEREF _Toc342546041 h 2 HYPERLINK l _Toc342546042 验证方案批准 PAGEREF _Toc342546042 h 2 HYPERLINK l _Toc342546043 2. 验证目的 PAGEREF _Toc342546043 h 2 HYPERLINK l _Toc342546044 3. 验证依据判断标准： PAG

17、EREF _Toc342546044 h 3 HYPERLINK l _Toc342546045 PAGEREF _Toc342546045 h 3 HYPERLINK l _Toc342546046 PAGEREF _Toc342546046 h 3 HYPERLINK l _Toc342546047 4.验证内容 PAGEREF _Toc342546047 h 3 HYPERLINK l _Toc342546048 PAGEREF _Toc342546048 h 3 HYPERLINK l _Toc342546049 运行确认 PAGEREF _Toc342546049 h 4 HYPER

18、LINK l _Toc342546050 PAGEREF _Toc342546050 h 5 HYPERLINK l _Toc342546051 4.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定 PAGEREF _Toc342546051 h 6 HYPERLINK l _Toc342546052 4.5 紫外检测器 PAGEREF _Toc342546052 h 8 HYPERLINK l _Toc342546053 PAGEREF _Toc342546053 h 9 HYPERLINK l _Toc342546054 5.验证结果及分析评价 PAGEREF _Toc342546054

19、 h 10 HYPERLINK l _Toc342546055 PAGEREF _Toc342546055 h 10 HYPERLINK l _Toc342546056 PAGEREF _Toc342546056 h 10 HYPERLINK l _Toc342546057 6.2 再验证内容 PAGEREF _Toc342546057 h 10本公司所用的LC-20AT高效液相色谱仪是由工作站软件（N2000）、二元泵(LC-20AT)、手动进样器（20微升定量环）、控制器(CBM-20A)、柱温箱(IN-150)、紫外检测器（SPD-20AT）以及相关管路等组成。主要用于本公司在药物含量检

20、测。1. 参与验证的相关部门及其职责验证小组成员及职责部门验证人员职务验证分工药检科温铭刚组长负责起草验证方案审核、组织协调验证王凯化验员负责撰写LC-20AT型高效液相色谱仪及验证报告刘丹妮化验员保证设备正常运转起草部门签名日期药检科 年 月 日验证方案批准批 准 人签 名日 期药剂科主任 年 月 日2. 验证目的确认LC-20AT高效液相色谱仪的运行环境、性能等各项指标符合器所设计的性能指标。确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为日常检验提供准确的检测结果。3. 验证依据判断标准：3.1.1药品GMP指南2010年版3.1.2LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程3.1.3LC-20A

21、T型高效液相色谱仪安装使用说明3.1.4中国药典2010年版二部附录确认安装符合LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明说明书要求。安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。使用样品检测符合中国药典2010年版二部附录要求和LC-20AT型高效液相色谱仪性能指标。项 目要 求检查情况位 置应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火环境洁净度室内应保持清洁,无腐蚀性气体温度1535，全天温度变化较小光线无阳光直射相对湿度4585%电路电源AC220V22V、50HZ1HZ接地应接地单项结论：_ 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.2运行确认：严格按

22、LC-210AT高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。操作 步骤合 格 标 准结 果操作前准备1.打开电源，仪器自动完成初始化以打开排液阀，按“purge”，泵运行，泵指示灯亮3.清洗完成后，按一次“func”，以改变流速，将流速设定为5ml/min,顺时针方向旋转排液阀旋钮关闭排液阀“pump”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pump”，泵停止，泵指示灯灭5.以上程序完成后，操作的准备工作完成检查压力值1.将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中2.打开排液阀，逆时钟方向旋转排液阀旋钮180，按“C

23、E”3.检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求“purge”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“purge”泵停止，泵指示灯灭单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日 泵性能确认流量准确性确认泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR 流量设定值（ml/min）测量次数333流动相收集时间（min）1055允许误差SS5%3%2%SR3%2%2%启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平

24、上称重，按式（1）、（2）计算SS和SR，结果记录在下表中；流量（ml/min）次数W1W2W2-W1SSSR123123123注：Ss=(eq o(sup 5( ),sdo 2(Fm)-Fs)/Fs100% 式（1）SR=(Fmax-Fmin)/ eq o(sup 5( ),sdo 2(Fm)100% 式（2）式中：Fm Fm=(W2-W1)/(t)，流量实测值，ml/min；W2 容量瓶+流动相的质量，g；W1 容量瓶的质量，g； 试验温度下流动相的密度，g/mL；t 收集流动相的时间，min；eq o(sup 5( ),sdo 2(Fm) 同一组测量的算术平均值，mL/min；FS 流量

25、设定值，mL/min；Fmax 同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin 同一组测量中流量最小值，ml/min。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日压力范围可执行标准：测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。次数设置压力（Mpa）停止压力（Mpa）误差（Mpa）110220330单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定）放置在柱温箱内，选择35、40和45进行检定，按仪器说明书操作

26、，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值，平均值与设定值之差为TS，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性TC，结果记录在下表，柱温箱温度设定值误差TS3，TC1；设定温度（）次数首测温度（）平均温度（）TS（）TC结 果351234567401234567451234567单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.5 紫外检测器4.5.1 基线噪音和基线漂移选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，二极管阵列检测器的波长设定为254nm，待仪器稳定后，记录基线30min

27、，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰峰高对应的记录仪标度，计算基线噪音，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示，基线噪音应不超过510-4；衰减倍数测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线噪音结 果注：Nd=KB式中：K：衰减倍数；B：测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线漂移在1h内偏离原点的值为 （AU/h），应不超过510-3AU/h。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日最小检测浓度采用依替巴肽分析色谱条件，进样量20l；取适量的依替巴肽，用甲醇稀释制成110-6g/ml的溶液，连续进样6次，记录依替巴肽/甲醇溶液的色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰峰高，按下式来计

28、算最小检测浓度（CL），应不超过110-6g/ml，结果记录在下表；依替巴肽的称样量稀释倍数依替巴肽的色谱峰高平均峰高最小检测浓度结 果注：CL=2NdcVH20式中：Nd：基线噪声峰峰高；c：标准溶液浓度；H：标准溶液的色谱峰高；V：进样体积单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日在4.4.2所记录的色谱图中，按下式计算Rsd值，Rsd2.0%，并将结果记录在下表中；品 名称样量项目指标实 验 结 果结 果分离度（R）Rsd2%图谱文件名峰面积（A）平均数（M ADVANCE ）Rsd值结 果注：M ADVANCE =(A1+A2+An)/n Rsd= 式中：M

29、：峰面积平均数；A：峰面积；n：测量次数单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日6.再验证要求周期6. 设备大修后需再校验。6. 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。6.1.3 高效液相色谱仪的验证周期为一年，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。6.2 再验证内容进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。下面为朱自清的散文欣赏，不需要的朋友可以下载后编辑删除！谢谢！荷塘月色作者: 朱自清这几

30、天心里颇不宁静。今晚在院子里坐着乘凉，忽然想起日日走过的荷塘，在这满月的光里，总该另有一番样子吧。月亮渐渐地升高了，墙外马路上孩子们的欢笑，已经听不见了；妻在屋里拍着闰儿，迷迷糊糊地哼着眠歌。我悄悄地披了大衫，带上门出去。沿着荷塘，是一条曲折的小煤屑路。这是一条幽僻的路；白天也少人走，夜晚更加寂寞。荷塘四面，长着许多树，蓊蓊郁郁的。路的一旁，是些杨柳，和一些不知道名字的树。没有月光的晚上，这路上阴森森的，有些怕人。今晚却很好，虽然月光也还是淡淡的。路上只我一个人，背着手踱着。这一片天地好像是我的；我也像超出了平常的自己，到了另一世界里。我爱热闹，也爱冷静；爱群居，也爱独处。像今晚上，一个人在这

31、苍茫的月下，什么都可以想，什么都可以不想，便觉是个自由的人。白天里一定要做的事，一定要说的话，现在都可不理。这是独处的妙处，我且受用这无边的荷香月色好了。曲曲折折的荷塘上面，弥望的是田田的叶子。叶子出水很高，像亭亭的舞女的裙。层层的叶子中间，零星地点缀着些白花，有袅娜地开着的，有羞涩地打着朵儿的；正如一粒粒的明珠，又如碧天里的星星，又如刚出浴的美人。微风过处，送来缕缕清香，仿佛远处高楼上渺茫的歌声似的。这时候叶子与花也有一丝的颤动，像闪电般，霎时传过荷塘的那边去了。叶子本是肩并肩密密地挨着，这便宛然有了一道凝碧的波痕。叶子底下是脉脉的流水，遮住了，不能见一些颜色；而叶子却更见风致了。月光如流水

32、一般，静静地泻在这一片叶子和花上。薄薄的青雾浮起在荷塘里。叶子和花仿佛在牛乳中洗过一样；又像笼着轻纱的梦。虽然是满月，天上却有一层淡淡的云，所以不能朗照；但我以为这恰是到了好处酣眠固不可少，小睡也别有风味的。月光是隔了树照过来的，高处丛生的灌木，落下参差的斑驳的黑影，峭楞楞如鬼一般；弯弯的杨柳的稀疏的倩影，却又像是画在荷叶上。塘中的月色并不均匀；但光与影有着和谐的旋律，如梵婀玲上奏着的名曲。荷塘的四面，远远近近，高高低低都是树，而杨柳最多。这些树将一片荷塘重重围住；只在小路一旁，漏着几段空隙，像是特为月光留下的。树色一例是阴阴的，乍看像一团烟雾；但杨柳的丰姿，便在烟雾里也辨得出。树梢上隐隐约约

33、的是一带远山，只有些大意罢了。树缝里也漏着一两点路灯光，没精打采的，是渴睡人的眼。这时候最热闹的，要数树上的蝉声与水里的蛙声；但热闹是它们的，我什么也没有。忽然想起采莲的事情来了。采莲是江南的旧俗，似乎很早就有，而六朝时为盛；从诗歌里可以约略知道。采莲的是少年的女子，她们是荡着小船，唱着艳歌去的。采莲人不用说很多，还有看采莲的人。那是一个热闹的季节，也是一个风流的季节。梁元帝采莲赋里说得好：于是妖童媛女，荡舟心许；鷁首徐回，兼传羽杯；欋将移而藻挂，船欲动而萍开。尔其纤腰束素，迁延顾步；夏始春余，叶嫩花初，恐沾裳而浅笑，畏倾船而敛裾。可见当时嬉游的光景了。这真是有趣的事，可惜我们现在早已无福消受了。于是又记起西洲曲里的句子：采莲南塘秋，莲花过人头；低头弄莲子，莲子清如水。今晚若有采莲人，这儿的莲花也算得“过人头”了；只不见一些流水的影子，是不行的。这令我到底惦着江南了。这样想着，猛一抬头，不觉已是自己的门前；轻轻地推门进去，什么声息也没有，妻已睡熟好久了。在北京住了两年多了，一切平平常常地过去。要说福气，这也是福气了。因为平平常常，正像“糊涂”一样“难得”，特别是在“这年头”。但不知怎的，总不时想着在那儿过了五六年转徙无常的生活的南方。转徙无常，诚然算不得好日子;但要说到人生味，怕倒比平平常常时候容易深切地感着。现在终日看见