生化室作业指导书

1、下载可编辑.专业.整理.生化室作业指导书文件编号：ZTGRY-1-SH-0161第1版编制：审核：批准：生效日期：2014年1月1日梓潼县工人医院检验科目 录序号主题内容代号页号1血清总胆红素测定ZTGY-1-SH-0152血清直接胆红素测定ZTGY-1-SH-02103血清总蛋白液体双缩月尿法测定ZTGY-1-SH-03134血清白蛋白澳甲酚绿法测定ZTGY-1-SH-04165血清丙氨酸氨基测定ZTGY-1-SH-05196血清天门冬氨酸氨基测定ZTGY-1-SH-06237血清碱性磷酸酶测定ZTGY-1-SH-07278血清”-淀粉酶测定ZTGY-1-SH-08319血清葡萄糖氧化酶法测

2、定ZTGY-1-SH-093510血清尿素氮Urease-GLDH紫外法ZTGY-1-SH-0103911血清肌肝苦味酸法测定ZTGY-1-SH-114312血清尿酸Uricase法测定ZTGY-1-SH-124613血清总胆固醇酶试剂法测定ZTGY-1-SH-135014血清甘油三酯酶试剂法测定ZTGY-1-SH-145415血清高密度脂蛋白胆固醇测定ZTGY-1-SH-157616血清低密度脂蛋白胆固醇测定ZTGY-1-SH-168017血清肌酸激酶（CK）法测定ZTGY-1-SH-178418血清肌酸激酶MB同工酶测定ZTGY-1-SH-188819血清乳酸脱氢酶DGKC法测定ZTGY-

3、1-SH-199220血清a-羟丁酸脱氢酶测定ZTGY-1-SH-209921血清工谷氨酰转移酶ZTGY-1-SH-2110622复合校准品ZTGY-1-SH-2219223美菱冰箱操作维护规程ZTGY-1-SH-2320325纯水机操作维护规程ZTGY-1-SH-2420526DS-301生化分析仪操作维护规程ZTGR -3-SH-2520927离心机操作维护规程ZTGR -3-SH-26222下载可编辑.专业.整理.序号文件编号贞他需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021血清总胆红素（T-BIL）测定.实验原理血清中的胆红素分为直

4、接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在 1883年Ehrlich 提出的重氮法胆红素测量法1, 一些改良的方法已被用来增进反应。这些 改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而 间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。英诺华总胆红素试剂是引酸氧化法，PH接近于3时，在钮酸盐及表面活性剂的作用 下，总胆红素被氧化成胆绿素。此时，胆红素特有的黄色减少，通过测定钮酸作用前后 的吸光度的差可求得样品中总胆红素的浓度。胆红素-皿胆绿素.标本：病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。

5、.标本存放：1525c保存可稳定2天；28c保存可稳定7天；-20C保存可稳定3个月，如冰冻保 存，不可反复冻融！。.标本运输：常温条件下避光保存运输。.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。.实验材料试剂：英诺华总胆红素试剂盒（ 试剂1: 4 X32ml ; 试剂2 ： 8ml ）试剂组成试剂1 :柠檬酸缓冲液88mmol/L试剂2 :磷酸盐缓冲液50mmol/L偏钮酸钠3mmol/LSID见瓶签试剂准备：液体试剂，直接使用，无需配制。试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28 C ,若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。试剂 2必需避光保存。试剂不可冰冻。变质指示

6、：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要 入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位 15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件.仪器：英诺华生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP文件。仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件。.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为

7、未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化 室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法：以朗道校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器 直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以wmol/L 报告。手工测定计算方法为：A标本总胆红素（mol/L） =X校准液浓度A标准.参考值范围：9 mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个 实验室应建立自己的参考值。.临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于 水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红

8、素与葡萄糖醛酸 结合，生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血 液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilber t 综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿 血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆 红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来 估计游离胆红素的含量。.操作性能线性 范围：0-300 mol/L精密度：批内精密度CV 3% ,批间精密度RW10%。灵敏度：本试剂

9、的检测限为0 mol/L 。病人结果可报告范围：0300 mol/L.超出范围结果处理：本法线性上限为684 mol/L 。如样品测定值超过上限时，应将 样品用0.9 %氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。.病危报警值的处理当新生儿血清标本测定结果总胆红素340 mol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。.方法局限性本法线性上限为300师ol/L 。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化钠溶 液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度W0.3g/L ,血红蛋白浓度W3.00g/L,甘油三酯浓度2.5g/L时无明显干扰。.补救

10、措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。. 参考文献.李影林.中华医学检验全书M. 北京：人民卫生出版 社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to Define and D

11、etermine Reference Intervals in the Clinical Laborator y, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，版号V2.020.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。血清直接胆红素(D-BIL)测定.实验原理PH接近于3时，在钮酸及表面活性剂的作用下，直接胆红素被氧化成胆绿素，此时，胆红素特有的黄色减少，通过检测钮酸作用前后吸光度的差，可求得样品中直接胆红素的浓度。.标本：病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血

12、的干扰。类型：血清、肝素或EDTAB浆，应避光保存。.标本存放：1525 c保存可稳定2天；28 c保存可稳定7天；-20 C保存可稳定3个月，如冰冻保存， 不可反复冻融！。.标本运输：常温条件下避光保存运输。.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。.实验材料试剂：英诺华直胆红素试剂盒：试剂1:（4 X32ml ;试齐J2： 8ml）试剂组成试剂1:.1.1 试剂组成试剂1 :柠檬酸缓冲液88mmol/L50mmol/L3mmol/L磷酸盐缓冲液 偏锂酸钠SID见瓶签无需配制。试剂准备：试剂为即用式液体试剂，直接使用6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28C,若无

13、污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染不能继续使用。注意事项：此试剂为体外诊断用警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件.仪器：英诺华DS-301生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301生化分析仪项目测定参数 .SOP文件仪器操作步骤：参见英诺华DS-301生化分析仪操作规程.SOP文件 检验结果的判断与分析.

14、质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法以贝克曼复合校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。手工测定计算方法为： Au直接胆红素（师ol/L） = X校准液浓度 As.参考值范围：1.7-6.8 mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。.临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶

15、解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合，生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯 由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。.操作性能线性范围：0320 mol/L精密度：批内精密度

16、CVW3%,批间精密度RW10。灵敏度：0 mol/L 。病人结果可报告范围：0320 mol/L15超出范围结果处理本法线性上限为320mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。.病危报警值的处理无。.方法局限性本法线性上限为171 mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新 测定，结果乘以2。，干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度W0.3g /L ，甘油三酯浓度W2.5g/L 时无明显干扰。.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。.参考文献：.李影林.中华医学检验全书M. 北京：人民卫

17、生出版 社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laborato

18、r y, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，版号V2.020.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清总蛋白 (TP)双缩胭法测定.实验原理双缩月尿比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和 蛋白浓度成正比。OH蛋白质+ Cu 2 +紫红色复合物.标本采集病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。类型：血清或血浆。.标本存放 2025 c保存可稳定6天；48 c保存可稳定4周；-20 C保存至少可稳定1年。.标本运输 室温

19、条件下运输.标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。.实验材料：江苏英诺华总蛋白测定试剂盒 试剂1:4 X70ml试剂组成试剂1 ( R1 ):氢氧化钠200mmol/L酒石酸钾钠64mmol/L氢氧化钠200mmol/L碘化钾30 mmol/L硫酸铜12 mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225C,若无污染，可稳定至失效期。试剂 有效期为12个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量 水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。校准品：牛血清白蛋白

20、，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。.仪器：英诺华DS-301 生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化 室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法：在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。. 参考 值范围 60

21、-83g/L（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所 差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。.临床意义：总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损 伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬 化和脱水时总蛋白浓度升高。.操作性能线性范围：0150g/L精密度：批内精密度CV3%,批间精密度RW5。灵敏度：本试剂的检测限为0g/L 。病人结果可报告范围 0150g/L ，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯 化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。.超出范围结果处理：本

22、法线性上限为150g/L 。如样品测定值超过上限时，应将样品 用0.9 %氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。.病危报警值的处理 无。.方法局限性本法线性上限为150g/L 。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液 作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。干扰物质：静脉滴注大量右旋糖酎的病人血清或血浆，使用双缩月尿方法的检测结果 会明显增高，请选用其它方法（如凯氏定氮法）；当样品中抗坏血酸浓度300 Nmol/L , 胆红素浓度400 kmol/L ,血红蛋白浓度5.00g/L ,甘油三 酯浓度10g/L 时没有观察到干 扰.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行

23、维修。.参考文献：.李影林.中华医学检验全书M. 北京：人民卫生出版 社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to Define and Determine Reference Int

24、ervals in the Cli nical Laborator y, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。血清白蛋白 （ALB）澳甲酚绿 （BCG）法测定.实验原理在pH值4.1时，白蛋白和澳甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm 处有吸收 峰，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。pH4.2白蛋白+澳甲酚绿 绿色化合物.标本采集病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。类型：血清、肝素或EDTA

25、血浆。.标本存放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下（1525 C）可以稳定一 周，在冰箱保存的条件下（28 C）稳定一个月，-20 C保存至少可以稳定3个月。.标本运输室温条件下运输.标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。.实验材料：江苏英诺华白蛋白测定试剂盒（4 X40ml ）试剂组成琥珀酸缓冲液50mmol/L澳 甲酚绿（BCG）0.3mmol/L聚氧乙烯月桂醒1mmol/LSTD40g/L试剂准备：液体单一试剂，开瓶即用。试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28C,若无污染，可稳定至失效期。试剂有 效期为12个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌

26、污染，不能继续使用。注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件.仪器：英诺华DS-301 生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化 室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法：朗道复合校准品复合校准品白蛋白校准值或

27、标准品标准值校准仪器后，在 病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为：Au白蛋白（g/L尸 X校准液浓度As.参考值范围成人3448g/L儿童（4-14 岁）38 54g/L.临床意义：白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的 主要组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白 蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋 白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健 康与营养状况，因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。.操作性能线性范

28、围 060g/L批内精密度 CVW3%,批间精密度 RW10。灵敏度：0.2% 。病人结果可报告范围：269g/L ,如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化 钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。.超出范围结果处理本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。.病危报警值的处理.方法局限性本法线性上限为60g/L 。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化钠溶液作 1:1稀释，重新测定，结果乘以2。.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。. 参考文献1.李影林.中华医学检验全书M. 北京

29、：人民卫生出版 社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Labo

30、ratory, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按 检验科废物处置管理规定 执行。血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。ALTL-丙氨酸+ a-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸LDH (乳酸脱氢酶)丙酮酸 + NADH + H *-+JL-孚L 酸 + NAD + + H 2。上述偶联反应中，还原性辅酶I ( NADH )的氧化速率与标本的 ALT活性成正比。NADH 在340nm 有

31、特异吸收，因而可检测NADH 吸光度的下降来计算ALT活力。.标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清，肝素或EDTA血浆。.标本存放：3天内的活性损失：28c保存：10% ; 1525 c保存：17% ;标本稳定 性：-20 C保存至少可稳定4周。.标本运输：常温条件下保存运输。.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。.实验材料试剂英诺华ALT测定试剂盒( 试剂1: 3 X60ml ; 试齐2 : 45ml )试剂组成试剂1 ( R1 ):Tris 缓冲液100mmol/LL-丙氨酸500mmol/L乙二胺四乙酸二钠10mmol/L试剂2 ( R2 ):Tris 缓冲液100mmol/LL

32、DH （乳酸脱氢酶）300U/L还原型辅酶I二钠盐10mmol/La-酮戊二酸100mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于28C,若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰 冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时， 表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：试剂中含防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防 措施使用试剂。校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。.仪器：英诺华DS-301 生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.

33、SOP文件仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化 室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法：以校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报 告可靠的检测结果，以U/L报告。.参考值范围4女性 5-35U/L男性 5-40U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个 实验室应建立自己的参考值。.临床意义1,2:丙氨酸氨基转移酶（ALT

34、）旧称谷丙转氨酶（GPT）,天门冬氨酸氨基 转移酶（AST ）旧称谷草转氨酶（GOT ）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶 催化氨基从氨基酸转移给a-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升 高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行 ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT 比率用于肝病的鉴 别诊断。比率1预示中度的肝损伤；比率1和严重肝病有关，常见慢性肝病。.操作性能线性范围 0500U/L精密度：批内精密度CV3%,批间精密度RW10。灵敏度：本试剂的检测限为2 X10M病人结果可报告范围 0U/

35、L-500U/L.超出范围结果处理 当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1 : 9 稀释，重新测定，结果乘以10。.病危报警值的处理.方法局限性当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1 : 9稀释，重新测定，结 果乘以10。干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度W300mg/L ,胆红素浓度400mg/L,血红蛋白浓度4.00g/L ,甘油三酯浓度20g/L 时没有观察到干扰。.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。.参考文献.李影林.中华医学检验全书M. 北京：人民卫生出版社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, edit

36、ors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公

37、司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。血清天门冬氨酸氨基转移酶 IFCC推荐方法测定.实验原理：国际临床化学学会（IFCC）推荐的紫外连续监测法。L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H * + MDH苹果酸脱誉L-苹果酸+NAD +.标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清，肝素或EDTA血浆。.标本存放：3天内的活性损失：28 c保存：8% ； 1525 c保存：700U/LLDH（乳酸脱氢酶）700U/LNADH0.18mmol/LL-天门冬氨酸2

38、50mmol/L试剂2（R2）:Tris 缓冲液pH7.8100mmol/La-酮戊二酸12mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存试剂保存于28C,若无污染，可稳定至失效期。有效期为12个月，试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时， 表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：试剂中有防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防 措施使用试剂。校准品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。.仪器：英诺华DS-301 生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301

39、 生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化 室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法：以校准品AST校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报 告可靠的检测结果。不使用校准品进行AST活力检测，可以直接使用A A/min均值乘以计 算因子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算ALT活力的计算因子 见下表：AA/min X 因子

40、=AST 活力U/L.参考值范围48-40U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实 验室应建立自己的参考值。.临床意义1,2丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST） 旧称谷草转氨酶（GOT ）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基 酸转移给a-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼 肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测用于鉴别肝损伤和心 肌或骨骼肌损伤。AST/ALT 比率可用于肝病的鉴别诊断。比率1预示中度的肝损伤

41、；比 率1和严重肝病有关，常见慢性肝病。.操作性能线性范围 0-500U/L。精密度：批内精密度CV5%,批间精密度RW10。灵敏度：本试剂的检测限为0U/L 。病人结果可报告范围 0-500U/L。.超出范围结果处理：当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1+9 稀释，重新测定，结果乘以10。.病危报警值的处理 无。.方法局限性。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+9稀释，重新测定，结 果乘以10。干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度W300mg/L ,胆红素浓度400mg/L ,甘油三酯浓度夕0g/L 时没有观察到干扰。红细胞内富含AST ,因此溶血血清检

42、测结果明显偏高。.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。. 参考文献：.李影林.中华医学检验全书M. 北京：人民卫生出版 社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to

43、Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按 检验科废物处置管理规定 执行。血清碱性磷酸酶（ALP）磷酸对硝基苯酚法测定.实验原理磷酸对硝基苯酚（4-NPP ）在碱性磷酸酶的作用下，将其磷酸基转移到2-氨基-2 甲基-1-丙醇（AMP ）受体分子上，释放出的对硝基苯酚（4-NP ）在碱性溶液中分子重排 形成黄色醍，可

44、在405nm 下检测。黄色醍形成速率与ALP活力成正比。ALP+Mg 2 +4-NPP + H2O 4-NP+ 无机酸 4.标本采集与处理：病人准备：无特殊要求。标本类型：标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。血清分离：应在收集后两小时内分离出来。避免使用含EDTA或草酸盐的血浆。.标本存放：23天内的活性损失：1525 c保存：10% ;标本稳定性：48 c保存稳 定7天；-20 C保存至少可稳定2个月标本。如果分析延迟8小时以上，最好把血清冷藏。 冷冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。.标本运输：常温条件下运输.标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。.实验材料：英诺华ALP测定试剂盒（

45、试剂1 4 X32 ml+ 试剂28 ml ）试剂组成试剂1 :AMP 缓 冲液200 mmol/L氯化镁5 mmol/L氯仿0.1%V/V试剂2 :磷酸对硝基酚20mmol/L氯仿0.1%V/V试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：原试剂避光保存于28C,若无污染，可稳定至失效期。试剂 不可冰冻。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。注意事项：碱性磷酸酶试剂中含叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜。反应过程中产生的 对硝基苯酚有毒性，切勿吸入、吞食、接触皮肤或粘膜。若反应液与皮肤或粘膜接触，请 速用水冲洗。校准品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：参见生化检验校

46、准品和质控品.SOP文件。.仪器：英诺华DS-301 生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化 室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法：以复合校准品ALP校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直 接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行ALP活力检测，可以直接使用 AA/min 均值乘以计

47、算因子得到结 果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算ALP活力的计算因子见下：AA/min X 因子 =ALP 活力U/L.参考值范围男1-12500U/L12-15750 U/L25 以上 40-150 U/L女1-12500 U/L岁以上40-150 U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个 实验室应建立自己的参考值。.临床意义1,2:碱性磷酸酶（ALP）是一种在碱性条件下具有较强活性的水解酶，并 以多种形态存在于血液中，其大多来自骨骼的成骨细胞和肝脏，也来源于其他一些组织 例如肾脏、胎盘、肠、睾丸、胸腺、肺及肿瘤。在儿童生长期和妊娠期，血清

48、中ALP生理 性活性增高，骨疾病与肝胆疾病等引起ALP病理性活性增高。在肝胆疾病中引起ALP活 性增高的原因包括胆道梗阻，例如因胆结石、肿瘤或炎症造成的胆汁郁积。在传染性肝 炎中也可发现ALP活性增高。在骨疾病中，Paget病、骨软化症（佝偻病）、骨转移瘤和 甲状旁腺功能亢进等，使成骨活性升高引起ALP活力增高。.操作性能线性范围0-700U/L精密度：批内精密度CV5%,批间精密度RW10。灵敏度：本试剂的检测限为0U/L.超出范围结果处理：当样品测定值超过上限时，应将样品用9 g/L氯化钠溶液作1+9 稀释，重新测定，结果乘以10。.病危报警值的处理.方法局限性。当样品测定值超过上限时，应

49、将样品用9g/L氯化钠溶液作1+9稀释，重新测定， 结果乘以10。干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度M300mg/L,胆红素浓度E400mg/L,血红蛋白浓度幺00g/L ,甘油三酯浓度20g/L 时没有观察到干扰.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。. 参考文献19. 参考文献：1.李影林.中华医学检验全书M. 北京：人民卫生出版 社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company

50、, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laborator y, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。血清a-淀粉酶 （AMS ）

51、（EPS-G7法）测定.实验原理采用4,6-亚乙基-对硝基苯酚-ot-D-麦芽七糖昔（EPS PNP-G7）底物。EPS PNP-G 7经淀粉酶水解，然后 以口-葡萄糖甘酶为辅助酶水解中间产物释放出对硝基酚，从而引起405nm处吸光度的上升，此种变化与样本中的a-淀粉酶活性成正比。.标本采集与处理：病人准备：无特殊要求。标本类型：血清、肝素或EDTA处理的血浆、尿液。血清分离 血清或血浆应在收集后尽快分离出来。未酸化的尿液，随机或限时收取。.标本存放：不要用嘴吸取标本或对标本吹气，以免唾液污染标本唾液中的淀粉酶使结 果升高。血清淀粉酶在2025 c稳定一个星期，避免微生物降解作用；在28 c时

52、稳定一 个月。尿液样品在28 c可稳定10天，在1525 c可稳定2天。对于尿液，酸性pH值 可使淀粉酶的稳定性减弱，因此，储存前pH值应调至大约7.0。.标本运输：常温条件下运输.标本拒收标准：细菌污染、溶血的不能做测定。.实验材料：AMS 测定试齐【J盒（试齐【J 13 X60 ml +试齐245 ml ）试剂组成试剂1 :GOOD S缓冲液 pH 7.1 、氯化钠、口-葡萄糖甘酶试剂2 :EPS G7试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：原试剂避光保存于28C,若无污染，可稳定至失效期。试剂 有效期为24个月。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。注意事项：唾液和皮

53、肤中含有。-淀粉酶，应避免用嘴吸取试剂，避免皮肤接触试 剂。试剂中含叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜。校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件.仪器：英诺华DS-301 生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见生化检英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化 室室内质控操作规程.SOP文件。.计

54、算方法：无需手工计算，在37c每个标本的结果仪器自动以U/L报告。手工测定计 算方法为：ct-淀粉酶（U/L） = A/ min XF反应总体积（ml ） X 1000F =毫摩尔消光系数X样品体积（ml ） x比色杯光径注：1000 = IU/ml到U/L的转换系数PNP 在405 nm 处 的毫摩尔消光系数：9.50.参考值范围血清或血浆 140U/L随机尿液300U/L 时，在经过复查等确认手段处理后应及时 向临床主管医生汇报。.方法局限性本法线性上限为2000U/L 。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化钠溶液 作1 : 10稀释，重新测定，结果乘以11。干扰物质：当样品中

55、抗坏血酸浓度300mg/L ,胆红素浓度400mg/L ,甘油三酯浓度10g/L时没有观察到干扰。即使极低浓度的血红蛋白都会对检测产生干扰。.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。. 参考文献：.李影林.中华医学检验全书M. 北京：人民卫生出版 社，1996. 2.Bur tis CA , Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S.叶应妩，

56、王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.CLSI/NCCLS C28-A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laborator y, Approved Guideline.产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按 检验科废物处置管理规定 执行。血清葡萄糖（GLU）葡萄糖氧化酶法 （GOD-PAP法）测定法.实验原理葡萄糖氧化酶（GOD ）利用氧和水将葡萄糖氧

57、化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。过氧 化物酶（POD ）在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，使色原性氧受体4-氨 基安替比咻（4-AA ）和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色醍类化合物，即Trinder 反应。红 色醍类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。葡萄糖氧化酶紫外比色测定法。GOD葡萄糖+ 02 葡萄糖酸+ H2O2PODH2O2 +4-AAP+ 对羟基苯 甲酸钠 红 色醍类化合物+4H2O.标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清或血浆（EDTA ,肝素或氟化钠），标本最好不要溶血。迅速分离血清或 血浆，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。.标本存放：血清、血浆应在血液采集

58、1小时内，尽早分离。加入糖分解抑制剂（NaF , KF）后的稳定性：1525 c保存可稳定1天,48 c保存可稳定7天。血清中的葡萄糖，无 溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25 c下可稳定8个小时，在4 c下可稳定72小 时。尿样应保存在28 c下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免蒸发可在28 c下稳定至 少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20 C的条件下。.标本运输：常温条件下保存运输。.标本拒收标准：细菌污染、超时送检的的标本。.实验材料试剂 英诺华血糖测定试剂盒（试齐【J 1 4 X32ml +试齐【J 2 8ml ）试剂组成试剂1 :磷酸氢二钠25 mmol/L磷酸二

59、氢钾50 mmol/L亚铁氧化钾0.05mmol/L对羟基本甲酸钠15 mmol/L4-氨基安 替比林0.5mmol/L过氧化物200U/LTritonX-1000.5%V/V叠氮钠0.5%W/V试剂2 :磷酸氢二钠25 mmol/L磷酸二氢钾50 mmol/L葡萄糖氧化物24000U/L乙二胺四乙酸二钠10 mmol/LSTD5.55 mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于28C,若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰 冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时， 表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞

60、下有害。保护剂为叠氮钠，避免接 触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如 排向下水道请用大量的水冲洗。校准品：使用朗道校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控 品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。.仪器：英诺华DS-301 生化分析仪.操作步骤项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP文件.检验结果的判断与分析.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分 析，以2s为质控警告限，3s为失