天然产物化学全套提取分离方法

1、关于天然产物化学全套提取分离方法第一张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 Chemistry of Natural Products 第一章 总 论 （Generation）第二张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 本 章 内 容第一节 绪论第二节 生物合成第三节 提取分离方法第四节 结构研究方法第三张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 第三节 提取分离方法一、提取法：1.溶剂提取法（extraction with solvent） 原理：相似相溶常用提取溶剂极性顺序： 环己烷、甲苯石油醚（3060、6090）乙醚氯仿（CHCl3，常用二氯甲烷代替）乙酸乙酯（EtOAc）正丁

2、醇（BuOH）丙酮乙醇（EtOH）甲醇（MeOH）KB, 根据值的大小可决定分离采用的方法: 100，简单的一次萃取，可基本分离. 10010，约10次以上萃取。 2，约100次以上萃取。 第三节 提取分离方法2. 根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离P20P21第十九张，PPT共五十一页，创作于2022年6月2.1 影响分离的因素pH值 对于酸性、碱性、两性化合物，pH值可改变它们的存在状态（游离型和解离型），分配比受pH值的影响，因为HA达到99%解离时，pH pKa + 2HA达到99%游离时，pH pKa - 2 第三节 提取分离方法P21第二十张，PPT共五十一页，创作于2022

3、年6月 第三节 提取分离方法（Methods of Extraction and Isolation）pH值的进一步应用pH-梯度萃取法 按酸碱性强弱不同分离酸性、碱性、中性物质，改变pH值使酸碱成分呈不同状态。 第二十一张，PPT共五十一页，创作于2022年6月液-液萃取分离常用方法：1. 逆流分溶法(CCD)： 是一种多次连续的液-液萃取分离过程。特点：条件温和，样品易回收，适用于中等极性、不稳定物质的分离。四、提取分离方法0 1 2 3 n CCD法的分离过程示意图P22第二十二张，PPT共五十一页，创作于2022年6月2.纸色谱法（PC）：也叫纸分配色谱（PPC， Paper Part

4、ition Chromatography）。 第三节 提取分离方法P23补固定相：滤纸纤维中含有的5-7%水流动相：有机溶剂h1h2Rf = h2 / h1注意：如果流动相为缓冲盐溶液，则PC为非极性吸附色谱（纤维素色谱）第二十三张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3. 液-液分配柱色谱正相色谱：固定相极性大，如水、缓冲液等；流动相极性小，如氯仿、乙酸乙酯等。载体：硅胶（含水可达17%），硅藻土，纤维素等。分离极性大或水溶性成分，如苷类、糖、生物碱等。 洗脱顺序：极性小的物质先被洗脱出来。 第三节 提取分离方法（Methods of Extraction and Isolation）P2

5、4补第二十四张，PPT共五十一页，创作于2022年6月反相色谱：固定相极性小于流动相。如HPLC反相柱，反相TLC薄层色谱。 固定相：硅胶硅醇基结合烷基，如RP-2，RP-8，RP-18（ODS）。亲脂性：RP-18 RP-8 RP-2。 第三节 提取分离方法（Methods of Extraction and Isolation）P24流动相(洗脱剂)：MeOH-H2O，CH3CN-H2O洗脱顺序：分离极性大的成分，极性大者先洗脱下来第二十五张，PPT共五十一页，创作于2022年6月流动相(洗脱剂)：MeOH-H2O，CH3CN-H2O加压液相柱色谱法普通柱色谱：固定相粒径大 柱效低 耗时长

6、 溶剂用量大加压柱色谱：固定相粒径小 柱效高 时间短 溶剂用量小P24第二十六张，PPT共五十一页，创作于2022年6月加压液相色谱： a). 中低压液相色谱：lobar柱 b). 高压（效）液相色谱：HPLC c). 超高效液相色谱法：UPLC泵检测器第二十七张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 液滴逆流色谱( DCCC )： 一种液-液分配色谱，流动相呈液滴形式垂直上升或下降，通过固定相的液柱，实现物质的逆流色谱分离。 特点：不易乳化，样品可定量回收，分离效果好，特别适合于分离皂苷等水溶性成分。 第三节 提取分离方法（Methods of Extraction and Isolati

7、on）液滴逆流色谱(DCCC)示意图P26第二十八张，PPT共五十一页，创作于2022年6月高速逆流色谱（HSCCC） 第三节 提取分离方法（Methods of Extraction and Isolation） 通过特定的高速行星式旋转所产生的离心力场作用，使无载体支持的固定相稳定地保留在蛇形管内，并使流动相单向、低速通过固定相，实现连续逆流萃取分离物质的目的。 用于各种物质的分离，包括蛋白、酶、三萜、生物碱、皂苷等。P26第二十九张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3.1 吸附分类：物理吸附：相似相吸，吸附解析发生迅速。吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等；化学吸附：不可逆性。如碱性氧化

8、铝对酚酸性成分的吸附，硅胶对生物碱的吸附等。半化学吸附：聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附。 第三节 提取分离方法3. 根据物质的吸附性差别进行分离吸附色谱法P27第三十张，PPT共五十一页，创作于2022年6月物理吸附：吸附原理：相似相吸影响吸附过程的三要素： 吸附剂（固定相） 溶质（被分离物质） 溶剂（洗脱剂，展开剂，流动相） 第三节 提取分离方法P28第三十一张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3.2 硅胶、氧化铝： 极性吸附剂：载样量大，吸附力强 硅胶：应用最广，适用于各类成分分离 氧化铝：有中性、酸性、碱性氧化铝。碱性氧化铝不适合于分离酸性成分，多用于分离生物碱。 第三节 提取分离

9、方法P28第三十二张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3.2 硅胶、氧化铝： 被分离物质吸附力与结构的关系 被分离物质极性大，吸附力强，Rf值小，洗脱难，后被洗脱下来。 官能团极性大小相对一般排列顺序： -COOH Ar-OH R-OH R-NH2, RNHR , RNR R R-CO-NRR RCHO RCOR RCOOR ROR RH 第三节 提取分离方法P28溶剂(洗脱剂)的极性与洗脱力的关系 洗脱剂极性越大, 洗脱力越强.第三十三张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 练习: 从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷成分, 比较极性大小和硅胶柱上洗脱顺序.名称RR黄夹苷ACHO(D

10、-Glc)2黄夹苷BCH3(D-Glc)2黄夹次苷ACHOH黄夹次苷BCH3H黄夹次苷CCH2OHH黄夹次苷DCOOHH 第三节 提取分离方法第三十四张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 第三节 提取分离方法答案：1. 极性大 小：黄夹苷A黄夹苷B 次苷D次苷C次苷A次苷B2. 硅胶柱上的出柱顺序：后 先 第三十五张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3.3 活性炭非极性吸附剂吸附力与结构的关系 被分离物质极性越小，吸附越牢固。洗脱力与溶剂的关系 100%醇 含水醇 H2O应用: 脱色等。 第三节 提取分离方法P28第三十六张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3.4 聚酰胺(P

11、olyamide) 色谱法： 是由己酰胺聚合成的一类高分子化合物。 第三节 提取分离方法分离原理：主要通过酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成氢键，产生吸附作用。吸附力取决于形成氢键缔合的能力。P31第三十七张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 3.4 聚酰胺 吸附力与结构的关系 a.形成氢键的基团数目越多, 吸附力越强; b.形成分子内氢键者, 吸附力减少; 第三节 提取分离方法P31第三十八张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 c.芳香化程度越高或共轭键越多,吸附力越强; 第三节 提取分离方法溶剂的洗脱能力水醇丙酮NaOH B ASiO2-TLC Rf: A B CPolyamide

12、TLC, Rf: C B A 第三节 提取分离方法答案：第四十二张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3.5 大孔吸附树脂(macro-reticular resin)组成: 苯乙烯，二乙烯苯和致孔剂分离原理:吸附(范德华力和氢键)和分子筛作用(多孔性结构)树脂类型:非极性、中极性和极性三种。 非极性：由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称 芳香吸附树脂。如D101型 弱极性：如AB-8型。 极 性：含酰氨基、氰基、酚羟基等含氮、氧、硫不同极性功能的吸附树脂。 第三节 提取分离方法P32第四十三张，PPT共五十一页，创作于2022年6月3.5 大孔吸附树脂 洗脱剂: H2O 及不同比例的含水醇

13、。 洗脱分离: H2O 洗: 糖,水溶性色素 30% EtOH/ H2O: 极性大的成分 50-75% EtOH: 皂苷类 95% EtOH: 极性小成分 应用: 除多糖, 水溶性色素, 富集苷类成分 第三节 提取分离方法第四十四张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 透析法: 半透膜, 分子筛滤过作用 超滤法: 分子大小不同, 扩散速度不同 超速离心法: 溶质在超速离心作用下具有不同的 沉降性或浮游性 凝胶滤过法: 分子筛的作用(凝胶渗透色谱,分子 筛滤过, 排阻色谱), 被分离物质按分子 由大到小的顺序流出色谱柱.4.根据物质分子大小差别进行分离凝胶滤过法 第三节 提取分离方法4.1

14、主要的几种方法P34第四十五张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 被分离物质按分子量由大到小的顺序流出色谱柱.第四十六张，PPT共五十一页，创作于2022年6月4.2凝胶种类:葡聚糖凝胶(Sephadex G): 只适于在水中应用, 分离多糖、 蛋白质等.羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)： 适用于各类化合物的分离，除具有分子筛的特性外，还起到反相分配色谱的效果。 常用溶剂有甲醇-水、氯仿-甲醇等。 第三节 提取分离方法4.根据物质分子大小差别进行分离凝胶滤过法P35第四十七张，PPT共五十一页，创作于2022年6月 4.3. 膜分离技术 原理：利用小分子物质在溶液中可通过具有一定孔径的膜，而大分子物质不能通过的性质进行分离。常用于蛋白质、多肽、多糖等与小分子物质的分离。 分类：微滤（0.1m）、超滤（10100 nm）、 纳滤（110 nm）、 反渗透（1 nm） 应用：大豆蛋白的工业化生产（超滤）、生产注射液、口服液、医用酒精、医疗用水等四、提取分离方法P37第四十八张，PPT共五十一页，创作于2022年6月5.根据物质离解程度不同进行分离离子交换法 固定相：离子交换树脂（聚苯乙烯高分子化合物，引 入交换基团） 分类： 阳离子交换树脂：强酸型 RSO3-H+ 弱酸型 RCO