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文档简介

1、荧光分析法测定邻-羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸 1一 实验目的学习选择荧光激发和发射波长的方法用荧光分析法进行多组分含量的测定掌握荧光光度计的基本构造和使用方法2二 实验原理1 激发光谱与发射光谱(激发)系间窜跃kf3相对强度萘的激发和荧光光谱激发光谱荧光光谱42 定量分析方法If = 2.3 I0 l c = Kc l c 0.05， If与c方呈线性关系5邻-羟基苯甲酸 间-羟基苯甲酸 pH 5.5和pH 12时的荧光强度相同pH 5.5：无荧光pH 12：发射荧光6pH5.5: 测定邻羟基苯甲酸，间羟基苯 甲酸不干扰pH12: F未知(pH12)=F邻羟基苯甲酸+F间羟基苯甲酸F间羟基苯甲

2、酸= F未知(pH12)-F未知(pH5.5)7三 荧光光度计光源第一单色器第二单色器激发荧光样品池检测系统荧光光度计示意图82 分光系统(双单色器)第一单色器作用：选择激发波长第二单色器作用：分离出荧光发射波长1 光源氙弧灯：250-800 nm连续光谱高压汞灯：线光谱3 样品池 四面透光4 检测器 光电倍增管9四 实验步骤1. 绘制邻羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸的激发光谱与发射光谱，选择定量分析的激发和发射波长。2. 邻羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸标准曲线的测定3. 未知样中邻羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸含量的测定10五 数据记录及处理以荧光强度为纵坐标，邻羟基苯甲酸浓度为横坐标绘制邻羟基苯甲酸标准曲线根据pH5.5未知液的荧光强度及邻羟基苯甲酸标准曲线求出稀释未知液中邻羟基苯甲酸含量，然后计算原未知液中邻羟基苯甲酸含量(mg/L)。绘制间羟基苯甲酸标准曲线计算未知液中间羟基苯甲酸的荧光强度根据间羟基苯甲酸标准曲线及F间羟基苯甲酸求出稀释未知液中间羟基苯甲酸含量，然后计算原未知液中间羟基苯甲酸含

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