康媛颗粒质量标准研究

1、康媛颗粒质量标准研究【摘要】目的建立康媛颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中黄芪、白芍、枸杞子和干草进展鉴别；用高效液相色谱法测定制剂中芍药苷的含量,采用aihrbnd-aq-18色谱柱(4.6150,5),流动相：水-乙腈(8515),检测波长为230n,柱温30,流速1l/in。结果薄层色谱专属性强；芍药苷的线性范围为0.05450.545g,r0.9995,平均加样回收率为97.90%,rsd1.06%(n6)。结论该方法简便、准确,重现性好,可作为康媛颗粒的质量控制标准。【关键词】康媛颗粒；芍药苷；高效液相色谱法；薄层色谱法；质量标准abstrat：bjetivetestabli

2、shthequalitystandardfrkangyuangranula.ethdsradixastragali,radixpaeniaealba,frutuslyiiandradixetrhizaglyyrrhizaeinthispresriptinereidentifiedbytl.thententfthepaeniflrinasdeterinedbyhpl.thelunfaihrbnd-aq-18(4.6150,5)asused,thebilephaseasater-aetnitrile(8515),attheflf1.0l/in,thelunteperaturef30,andpeak

3、seredetetedat230n.resultstheharateristifidentifiatinbytlasdistintandhighlyspeifi.thelinearrangefpaeniflrinas0.05450.545g,r0.9995,theaveragereveryas97.90%,rsd1.06%(n6).nlusintheethdaseasytperateithaurateresultandgdreprduibility.itanbeusedeffetivelyfrthequalityntrlfthispreparatin.keyrds：kangyuangranul

4、a；paeniflrin；hpl；tl；qualitystandard康媛颗粒是本院新研制的中药6类新药,由黄芪、白芍、当归、枸杞子、茯苓、续断、柴胡、香附、白术、陈皮、甘草等组成,具有疏肝解郁、理气止痛、养血调经的成效,适用于经前期紧张综合征及原发性痛经,经前期乳房胀痛,经来小腹疼痛。为了控制该制剂的质量,笔者对黄芪、白芍、枸杞子和甘草进展了薄层色谱鉴别,同时采用高效液相色谱法测定了制剂中芍药苷的含量,建立了可靠、准确、专属性强的质量控制方法。1仪器与材料aters-515高效液相色谱仪、2487紫外检测器、eper色谱工作站。药材购于江苏省药材公司,由南京中医药大学王春根教授进展品种和质量

5、鉴定。芍药苷(批号0736-200219)、黄芪甲苷(批号0781-200210)、阿魏酸(批号0773-9910)对照品及当归、陈皮、甘草、枸杞子和香附对照药材均购自中国药品生物制品检定所。康媛颗粒3批产品由江苏省某药业消费并提供(批号分别为060101、060201、060301)。所有试剂均为色谱纯或分析纯。2定性鉴别2.1黄芪的薄层色谱鉴别取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1l含1g的溶液,作为对照品溶液。取本品适量,研细,称取5g,加水50l,超声处理30in,滤过,滤液用水饱和的正丁醇提取2次,每次20l,合并正丁醇液,再用氨试液提取2次,每次20l,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇

6、0.5l使溶解,作为供试品溶液。取除黄芪以外的其它药材按处方比例制得的阴性样品5g,用与供试品溶液一样的方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(10102)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105加热至斑点显色明晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显一样颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。2.2白芍的薄层色谱鉴别取芍药苷对照品,加甲醇制成每1l含1g的溶液,作为对照品溶液。取本品适量,研细,称取5g,加乙醇60l,超声处理30in,滤过,滤液浓缩至干,残渣加水20l使溶解,用乙醚提取2次,每次20l,弃去乙醚液

7、,再用水饱和的正丁醇提取3次,每次20l,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1l使溶解,作为供试品溶液。取除白芍以外的其它药材按处方比例制得的阴性样品5g,用与供试品溶液一样的方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-甲酸(540150.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛浓硫酸溶液,在105加热至斑点显色明晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显一样颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。2.3甘草的薄层色谱鉴别1取甘草对照药材2g,加乙醇20l,按“2.2项下方法制得对照药材溶液。用“2.2项下的供试品溶液,作为供试品溶液

8、。取除甘草以外的其它药材按处方比例制得的阴性样品5g,按“2.2项下方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(40101)的下层液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105加热至斑点显色明晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显一样颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。2.4枸杞子的薄层色谱鉴别2取枸杞子对照药材1g,加水35l,加热煮沸15in,放冷,滤过,滤液用乙酸乙酯15l提取1次,弃去水液,乙酸乙酯液浓缩至约1l,作为对照药材溶液。取本品5g,用与对照药材溶液一样的方法制得供试品溶液。取除枸杞子以外的其它药材

9、按处方比例制得的阴性样品5g,用与供试品溶液一样的方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(321)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365n)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显一样颜色的荧光斑点,而阴性对照液无此斑点。3含量测定33.1色谱条件aihrbnd-aq-18色谱柱(4.6150,5),流动相为水-乙腈(8515),流速1l/in,检测波长为230n,柱温30,进样量10l。3.2对照品溶液的制备精细称取在五氧化二磷枯燥器中真空枯燥至恒重的芍药苷对照品,加甲醇制成每1l含0.545g的溶液,摇匀,

10、作为母液。精细量取对照品溶液5l,置50l容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,制成0.0545g/l芍药苷溶液,分别精细汲取此对照品溶液1、3、5、7、10l置10l量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,制成5.45、16.35、27.25、38.15、54.5g/l的系列溶液。3.3供试品溶液的制备取本品细粉约2.5g,精细称定,置具塞锥形瓶中,加乙醚20l,超声处理10in,滤过,弃去乙醚液,残渣挥去乙醚,加水饱和的正丁醇25l,密塞,称定重量,超声处理30in,放冷,再称定重量,用水饱和正丁醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液。3.4系统适应性考察分别汲取芍药苷对照液和各供试品溶液

11、10l,注入液相色谱仪,理论板数以芍药苷峰计,不低于2000,此时,芍药苷峰与其它组分峰基线别离,别离度1.5,保存时间约为10.5in。3.5线性关系的考察精细汲取5个不同浓度的对照品溶液各10l,注入液相色谱仪,各进2针,以进样量(g)对芍药苷平均峰面积a进展回归处理,得回归方程310-6a0.0117,r0.9995,结果说明,指标成分进样量在0.05450.545g之间线性关系较好。3.6精细度试验精细汲取浓度为38.15g/l的对照品溶液10l,连续进样5次,结果芍药苷峰面积值的rsd0.62%,说明仪器的精细度良好。3.7稳定性试验精细汲取批号为060101的供试品溶液10l,每间

12、隔2h进一针,连续考察10h,结果芍药苷峰面积值的rsd1.79%,说明指标成分在10h内根本稳定。3.8专属性试验取除白芍以外的其它药材,按处方比例制得的阴性样品2.5g,用与供试品溶液一样的方法制得阴性对照液。在与样品测定完全一样的条件下,精细汲取白芍阴性对照液10l,注入液相色谱仪,结果阴性无干扰,说明在康媛颗粒中,芍药苷的专属性较强。见图1。3.9重复性试验取批号为060201的康媛颗粒约2.5g,共6份,精细称定,按样品测定项下的方法测定,测得样品中指标成分芍药苷的含量,rsd1.55%,说明重复性良好。3.10加样回收率试验取批号为060301的康媛颗粒约1.25g,共6份,精细称

13、定,分别置三角烧瓶中,各精细参加浓度为54.5g/l的对照液6l,用与“3.3项下方法制得供试品溶液。汲取供试品溶液10l注入液相色谱仪中,采用随行标准,外标二点法定量,结果见表1。表1加样回收率试验结果(略)3.11样品测定取3个批号的康媛颗粒约2.5g,每批2份,精细称定,分别按供试品溶液的制备方法制成供试品溶液。按上述色谱条件,分别汲取10l注入液相色谱仪,采用随行标准,外标二点法定量,结果见表2。表2康媛颗粒样品含量测定结果(略)由实验结果可知,仪器的精细度、指标成分的稳定性、方法的重现性和加样回收率等均较好,符合定量要求。根据测定结果,暂定每1g康媛颗粒中含白芍以芍药苷(23h281

14、1)计,不得少于0.20g(取3批平均含量的80%为其下限)。4小结本试验建立的黄芪、白芍、陈皮、枸杞子、甘草鉴别专属性强,重现性好,操作简便。而香附、当归的鉴别,因阴性有干扰,专属性不强,故未纳入质量标准中。本试验对芍药苷含量测定方法进展了系统的研究,所建立的方法简便、系统适用性、仪器的精细度、指标成分的稳定性、方法的重复性和加样回收率等均较好,且专属性较强,符合定量要求。本试验建立的质量标准可用于该制剂的质量控制。【参考文献】1夏厚林,盛燕.复方肾茶颗粒质量标准研究j.中成药,2022,7(10)：1143.2国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)s.北京：化学工业出版社,2022.1

15、74.3曾惠芳,黄鸣清.调经止血颗粒的质量标准研究j.中药新药与临床药理,2022,16(5)：356.【摘要】目的建立康媛颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中黄芪、白芍、枸杞子和干草进展鉴别；用高效液相色谱法测定制剂中芍药苷的含量,采用aihrbnd-aq-18色谱柱(4.6150,5),流动相：水-乙腈(8515),检测波长为230n,柱温30,流速1l/in。结果薄层色谱专属性强；芍药苷的线性范围为0.05450.545g,r0.9995,平均加样回收率为97.90%,rsd1.06%(n6)。结论该方法简便、准确,重现性好,可作为康媛颗粒的质量控制标准。【关键词】康媛颗粒；芍药苷

16、；高效液相色谱法；薄层色谱法；质量标准studynqualitystandardfrkangyuangranulapanping,panjin-hullegefpharay,nanjinguniversityft,nanjing210046,hinaabstrat：bjetivetestablishthequalitystandardfrkangyuangranula.ethdsradixastragali,radixpaeniaealba,frutuslyiiandradixetrhizaglyyrrhizaeinthispresriptinereidentifiedbytl.thenten

17、tfthepaeniflrinasdeterinedbyhpl.thelunfaihrbnd-aq-18(4.6150,5)asused,thebilephaseasater-aetnitrile(8515),attheflf1.0l/in,thelunteperaturef30,andpeakseredetetedat230n.resultstheharateristifidentifiatinbytlasdistintandhighlyspeifi.thelinearrangefpaeniflrinas0.05450.545g,r0.9995,theaveragereveryas97.90

18、%,rsd1.06%(n6).nlusintheethdaseasytperateithaurateresultandgdreprduibility.itanbeusedeffetivelyfrthequalityntrlfthispreparatin.keyrds：kangyuangranula；paeniflrin；hpl；tl；qualitystandard康媛颗粒是本院新研制的中药6类新药,由黄芪、白芍、当归、枸杞子、茯苓、续断、柴胡、香附、白术、陈皮、甘草等组成,具有疏肝解郁、理气止痛、养血调经的成效,适用于经前期紧张综合征及原发性痛经,经前期乳房胀痛,经来小腹疼痛。为了控制该制剂的

19、质量,笔者对黄芪、白芍、枸杞子和甘草进展了薄层色谱鉴别,同时采用高效液相色谱法测定了制剂中芍药苷的含量,建立了可靠、准确、专属性强的质量控制方法。1仪器与材料aters-515高效液相色谱仪、2487紫外检测器、eper色谱工作站。药材购于江苏省药材公司,由南京中医药大学王春根教授进展品种和质量鉴定。芍药苷(批号0736-200219)、黄芪甲苷(批号0781-200210)、阿魏酸(批号0773-9910)对照品及当归、陈皮、甘草、枸杞子和香附对照药材均购自中国药品生物制品检定所。康媛颗粒3批产品由江苏省某药业消费并提供(批号分别为060101、060201、060301)。所有试剂均为色谱

20、纯或分析纯。2定性鉴别2.1黄芪的薄层色谱鉴别取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1l含1g的溶液,作为对照品溶液。取本品适量,研细,称取5g,加水50l,超声处理30in,滤过,滤液用水饱和的正丁醇提取2次,每次20l,合并正丁醇液,再用氨试液提取2次,每次20l,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇0.5l使溶解,作为供试品溶液。取除黄芪以外的其它药材按处方比例制得的阴性样品5g,用与供试品溶液一样的方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(10102)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105加热至斑点显色明晰。供试品色谱中

21、,在与对照品色谱相应的位置上,显一样颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。2.2白芍的薄层色谱鉴别取芍药苷对照品,加甲醇制成每1l含1g的溶液,作为对照品溶液。取本品适量,研细,称取5g,加乙醇60l,超声处理30in,滤过,滤液浓缩至干,残渣加水20l使溶解,用乙醚提取2次,每次20l,弃去乙醚液,再用水饱和的正丁醇提取3次,每次20l,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1l使溶解,作为供试品溶液。取除白芍以外的其它药材按处方比例制得的阴性样品5g,用与供试品溶液一样的方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-甲酸(540150.2)为展开

22、剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛浓硫酸溶液,在105加热至斑点显色明晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显一样颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。2.3甘草的薄层色谱鉴别1取甘草对照药材2g,加乙醇20l,按“2.2项下方法制得对照药材溶液。用“2.2项下的供试品溶液,作为供试品溶液。取除甘草以外的其它药材按处方比例制得的阴性样品5g,按“2.2项下方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(40101)的下层液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105加热至斑点显色明晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置

23、上,显一样颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。2.4枸杞子的薄层色谱鉴别2取枸杞子对照药材1g,加水35l,加热煮沸15in,放冷,滤过,滤液用乙酸乙酯15l提取1次,弃去水液,乙酸乙酯液浓缩至约1l,作为对照药材溶液。取本品5g,用与对照药材溶液一样的方法制得供试品溶液。取除枸杞子以外的其它药材按处方比例制得的阴性样品5g,用与供试品溶液一样的方法制得阴性对照液。汲取上述3种溶液各10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(321)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365n)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显一样颜色的荧光斑点,而阴性对照液无此斑点

24、。3含量测定33.1色谱条件aihrbnd-aq-18色谱柱(4.6150,5),流动相为水-乙腈(8515),流速1l/in,检测波长为230n,柱温30,进样量10l。3.2对照品溶液的制备精细称取在五氧化二磷枯燥器中真空枯燥至恒重的芍药苷对照品,加甲醇制成每1l含0.545g的溶液,摇匀,作为母液。精细量取对照品溶液5l,置50l容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,制成0.0545g/l芍药苷溶液,分别精细汲取此对照品溶液1、3、5、7、10l置10l量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,制成5.45、16.35、27.25、38.15、54.5g/l的系列溶液。3.3供试品溶液的制备取本品细粉约2

25、.5g,精细称定,置具塞锥形瓶中,加乙醚20l,超声处理10in,滤过,弃去乙醚液,残渣挥去乙醚,加水饱和的正丁醇25l,密塞,称定重量,超声处理30in,放冷,再称定重量,用水饱和正丁醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液。3.4系统适应性考察分别汲取芍药苷对照液和各供试品溶液10l,注入液相色谱仪,理论板数以芍药苷峰计,不低于2000,此时,芍药苷峰与其它组分峰基线别离,别离度1.5,保存时间约为10.5in。3.5线性关系的考察精细汲取5个不同浓度的对照品溶液各10l,注入液相色谱仪,各进2针,以进样量(g)对芍药苷平均峰面积a进展回归处理,得回归方程310-6a0.0117,r0.9995,结果说明,指标成分进样量在0.05450.545g之间线性关系较好。3.6精细度试验精细汲取浓度为38.15g/l的对照品溶液10l,连续进样5次,结果芍药苷峰面积值的rsd0.62%,说明仪器的精细度良好。3.7稳定性试验精细汲取批号为060101的供试品溶液10l,每间隔2h进一针,连续考察10h,结果芍药苷峰面积值的rsd1.79%,说明指标成分在10h内根本稳定。3.8专属性试验取除白芍以外的其它药材,按处方比例制得的阴性样品2.5g,用与供试品