同济医院检验科ISO15189体系文件06EB病毒抗体测定（E-VCA）测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ706第2版标题： EB病毒抗体测定（E-VCA）测定第7章 第06号第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的：检测血清标本中的EB病毒抗体。2. 适用范围：同济医院检验科免疫室。3. 项目名称：EB病毒抗体抗体测定4. 检测方法：酶免疫分析法。 检测原理：本品系用带EB病毒壳抗原(VCA)的类淋巴母细胞株作抗原靶细胞，以辣 根过氧化物酶标羊抗人SIgA抗体(HRP-抗SIgA)检测人血清中EB病毒的兔疫球蛋白A。可供鼻咽癌等辅助诊断之用。 试剂：6.1 品牌：购自于捷门公司。6.2 包装规格:24人份

2、. 6.3 内含物:每盒试剂含以下成分：6.3.1 EB病毒细胞涂片(二片)，密封干燥冷存。6.3.2 辣根过氧化物酶标羊抗人SIgA(l支)，冻干品，用酶标抗体稀释液0.3m1溶解后。6.3.3 酶标抗体稀释液(1支)，lml。6.3.4 3-3二氨基联苯胺（OPD）2支，冻干制品，避光保存。6.3.5 底物缓冲液 (2瓶，10ml/瓶)，供溶解二氨基联苯胺。6.3.6 阳性对照1支(用0.1ml蒸馏水溶解)。7. 操作：7.1 打印工作单:7.1.1 打开电脑及打印机电源，7.1.2 双击齐效检验系统，登陆工号与密码；7.1.3 双击报告处理，单击标本申请信息，打开标本申请明细信息查询，打

3、开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。7.1.4 在检验项目处选择EVCA，执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。7.2 排列被检测标本:根据工作单上的库位号找出相应标本，并按工作单上的顺序排列。7.3 按以下步骤开始操作:7.3.1 细胞涂片从冷存处取出，放室温去除水汽。7.3.2 用PH7.4 0.01MPBS将待检血清作1:5.1:10稀释，滴加于细胞涂片各小孔内，右侧二孔分别加阳性对照和PBS阴性对照。7.3.3 37湿盒作用30分钟，用以上PBS轻洗3次，每次5分钟，末次洗后放室温待干。7.3.4 滴加酶标抗体于各小孔内，放37湿盒中作用30分钟、同法轻洗4次。7.3.5 将少量

4、底物缓冲液加入OPD的安瓶中使充分溶解，再混匀在10ml的底物缓冲液中。7.3.6 将30.过氧化氢溶液用蒸馏水作10倍稀释，吸0.1mI加入己溶解的OPD溶液中，混匀，滴加于待显色的涂片上，使各孔浸没，避光作用1520分钟。本液于临用前配制。7.3.7 倾去显色液，置于无水酒精中浸3分钟脱水。7.3.8 滴加中性树胶于涂片上，加盖玻璃片封固，用普通显微镜观察结果。7.4 结果：阴性：细胞不着色，或呈浅棕色的背景颜色。阳性：细胞呈棕色，在胞膜周围着色较深，按阳性细胞的数量和着色的强度划分+ +阳性。7.5 发送报告：详见免疫报告发送程序。8. 参考范围：正常人阴性。9. 临床意义：EB病毒感染后，患者血清中均可出现VCA抗体。IgA类抗体虽对鼻咽癌有较高的特异性，但仍需结合临床进行判断.本法可用于早期筛查鼻咽癌患者并对判断疗效与预后有一定帮助。10. 标本要求：血清，脂血、溶血不可使用11. 注意事项：11.1 各项试剂，应按本说明书规