高效液相色谱法测定喘平滴丸中东莨菪碱的含量

1、高效液相色谱法测定喘平滴丸中东莨菪碱的含量李晓燕，冯中，吴燕红，朱盛山，霍务贞【摘要】目的创立测定喘平滴丸中东莨菪碱含量的高效液相色谱法。要领接纳ZRBAXSB-184.6250，5为色谱柱，以甲醇0.001lL-1磷酸7030活动相含0.02lL-1十二烷基硫酸钠为活动相，检测波长：216n，流速：1.0lin-1，外标法定量。结果东莨菪碱在0.02850.285g范畴内呈线性干系，要领接纳率为98.86%n=6，RSD为2.54%。结论此法轻便、正确，重复性好，可用于喘平滴丸中东莨菪碱含量测定。【关键词】高效液相色谱法喘平滴丸东莨菪碱喘平滴丸由麻黄、洋金花等中药构成的中药复方制剂。此中洋金

2、花的重要化学身分东莨菪碱，有明显的中枢按捺、麻醉作用，一样平常剂量就能消除感情冲动，使人产生倦意，进入无梦的就寝状态，产生“忘记等症，严峻者嗜睡、昏倒，末了死于呼吸中枢按捺或麻木，呼吸和循环衰竭。方中洋金花处方量固然比例小，为了该复方制剂的用药宁静，本课题组对该复方制剂中微量的东莨菪碱举行含量监控，为该药的宁静利用提供数据参考。1仪器与试药1.1仪器Agilent1100高效液相色谱仪系列(G1311A四元泵、G1313A主动进样器、G1314A-VD检测器)；色谱柱:ZRBAXSB-184.6250，5，SN:USL017850，BP211D电子阐发天平(Sartrius)。1.2试药甲醇为

3、色谱纯试剂，水为三蒸水，别的试剂均为阐发纯。氢溴酸东莨菪碱比拟品由中国药品生物成品检定所提供(批号：100049-202208)，喘平滴丸3批本所研制，批号：20220516，20220518，20220520。2要领与结果2.1溶液的制备2.2色谱条件及体系实用性试验色谱柱为ZRBAXSB-184.6250，5；活动相甲醇0.001lL-1磷酸活动相含0.02lL-1十二烷基硫酸钠70：30，检测波长216n，流速1.0lin-1。在上述色谱条件下，别离汲取比拟品溶液12l，供试品溶液和阴性比拟溶液各3l，注入液相色谱仪，色谱图见图13。供试品与氢溴酸东莨菪碱比拟品雷同的保存时间有一对应色谱

4、峰，阴性比拟溶液在对应位置无滋扰；以氢溴酸东莨菪碱盘算，理论塔板数在3000以上。分散度1.5，故此色谱条件满意测定要求。2.3线性干系观察细密汲取上述比拟品溶液0.0214gl-11，2，4，8，12，16，20l进样，测定其峰面积积分值，以进样量Xg为横坐标，峰面积积分值Y为纵坐标，绘制尺度曲线，氢溴酸东莨菪碱回归方程为：Y743.95X+3.47867，r0.9999。结果表白氢溴酸东莨菪碱在0.02850.285g范畴内线性干系精良。2.4细密度实行细密汲取供试品溶液3l，按上述色谱条件重复进样6次，测定其峰面积，RSD=0.71，表白细密度精良。2.6不变性实行取新制备的供试品溶液批

5、号20220516，按上述色谱条件于0，1，2，4，8，12h别离进样3l，测定其峰面积，RSD为1.73，表白本品在12h内不变性较好。2.7接纳率实行细密称取含量的同一批样品20220516，含量为0.08495%6份，每份8丸，别离细密参加0.8l的东莨菪碱比拟品溶液0.285gl-1，按供试品溶液制备项下操纵，末了定容为10l，依法测定含量，盘算接纳率。结果见表1。表1氢溴酸东莨菪碱接纳率测定结果略3讨论3.1供试品纯化要领的挑选本品处方中洋金花比例较低，目的身分东莨菪碱含量低，且复方中相干身分滋扰，以是检测东莨菪碱颠末了多个实行纯化富集：起首将样品溶解后别离以氨水饱和的醋酸乙酯、氨水

6、饱和的正丁醇、氨水饱和的氯仿作洗脱溶剂洗脱过氧化铝柱，比拟创造饱和氯仿洗脱液得到的峰分散度和基线较好，但接纳率低。然后又别离以氨水饱和的醋酸乙酯、氨水饱和的正丁醇、氨水饱和的氯仿举行萃取3次15，15，10l，归并萃取液，比力创造饱和氯仿萃取的样品基线安稳，色谱峰分散度最好，且接纳率到达检测要求。3.2检测波长的选择在选定的色谱条件下，注入东莨菪碱比拟品、样品和阴性样品，用DAD检测器检测，读取DAD光谱扫描图，创造东莨菪碱比拟品和样品的东莨菪碱洗脱峰在210220n处有较大汲取，而阴性样品在该段汲取弱，以是确定检测波长为216n。3.3活动相的选择HPL法测定氢溴酸东莨菪碱,已报道的活动相有

7、0.07lL-1磷酸钠溶液(用磷酸调pH值至6.0,含17.5lL-1十二烷基硫酸钠)-乙腈(21)1，2，甲醇-水(5347,水中含20lL-1醋酸钠,0.02%三乙胺,0.3%四氢呋喃,pH为6.86)3,甲醇-水(4060,水中含0.02lL-1醋酸钠,0.02%三乙胺,用冰醋酸调pH至6.0)4等。本文曾别离以甲醇-磷酸盐缓冲液、乙腈0.03三乙胺以差异体积比及差异pH值、水乙腈含0.1三乙胺磷酸以差异体积比等为活动相举行测试,均未到达满意的分散结果。后改用反相离子对活动相，经屡次挑选创造:甲醇0.001lL-1磷酸7030活动相含0.02lL-1十二烷基硫酸钠改进了分散结果,使得性子相似的别的滋扰身分能在反相体系中彼此到达基线分散。【参考文献】1国度药典委员会.中国药典，部S.北京：化学产业出书社，2022:188.2于立军.HPL法测定差异产地洋金花中东莨菪碱的含量J.中国药房,2022,1824：18