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1、同济大学附属同济医院检验科血液组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ128第2版标题: 过氧化物酶染色第1章 第28节第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页 目的:保证过氧化物酶染色检测的准确、可靠。 适用范围:过氧化物酶(POX)染色。 项目名称:过氧化物酶(POX)染色。 检测方法:过氧化物酶(POX)染色法 原理:血细胞内的过氧化物酶分解H2O2,释出初生态氧,使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺,后者进一步变成棕黑色化合物,沉着于胞浆内。 试剂6.1 品牌: 联苯胺 上海远航化工厂 碱性品红 上海试剂三厂 95%乙醇 上海试剂三厂 亚硝基铁氰钠 上海化学试剂厂6.2 货号: 联
2、苯胺 SJYH-02-92 碱性品红 13-201027546II 95%乙醇 13-20102830II 亚硝基铁氰钠 6.3 包装规格: 联苯胺 25g/瓶 碱性品红 25g/瓶 95%乙醇 500ml/瓶 亚硝基铁氰钠 25g/瓶6.4 内含物:联苯染液:联苯胺 0.3g 碱性品红 0.3g 95%乙醇 100ml亚硝基铁氰钠饱和水溶液(360mg/ml)1ml配制后保存在棕色玻璃瓶内810个月。过氧化氢溶液:3%过氧化氢溶液 0.3ml 蒸馏水 25ml 此液临用前新鲜配制 仪器:显微镜 操作步骤:瑞氏染色8.1 用常法制备血涂片或骨髓片,待干。8.2 在涂片上滴加联苯胺染液8-10滴
3、,以覆盖全部血(骨髓)膜,染1分钟。8.3 滴加等量新鲜配制的过氧化氢溶液,轻轻摇动玻片或用洗耳球使之混匀,染色4-5分钟。8.4 用流水冲洗半分钟-1分钟8.5 用95%乙醇脱色,脱至红色退尽为止,水洗,待干。8.6 用瑞氏染液复染15-20分钟。8.7 水洗,待干,镜检。 线性范围:无10. 参考范围:用油镜观察,胞浆内出现蓝色或蓝黑色颗粒为阳性反应,无此颗粒为阴性反应。阳性程度的标准及其表示如下:(-):细胞浆内无颗粒。(+):少数颗粒,分布稀疏或局限性分布。(+):颗粒粗大,分布较密集。(+):颗粒粗大,呈团块状分布。(+):阳性颗粒布满整个细胞,有时胞核也被覆盖。11 临床意义:正常
4、血细胞的染色反应11.1 粒细胞系统:原粒细胞大多呈阴性反应,有的可出现少量蓝黑色颗粒。自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应。随细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强,中性分叶核粒细胞为强阳性反应。嗜酸性粒细胞阳性反应的程度最强,其阳性颗粒比中性粒细胞粗大,有折光性。嗜碱性粒细胞呈阴性反应。11.2 单核细胞系统:原始单核细胞呈阴性反映,幼单核细胞呈弱阳性反应,阳性颗粒数少而细,弥散分布,有的也可呈阴性反映。11.3 其他细胞:各型淋巴细胞,巨核细胞,幼红细胞,浆细胞和组织细胞均呈阴性反映。有的吞噬细胞可呈阳性反应。12 病人准备标本要求:采取病人末梢血13 注意事项:13.1 标本新鲜13.2 染色时间要充分。13.3
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