单宁含量测定(三种方法)课件

1、不同方法测定单宁（tannin）含量的比较研究测定单宁含量的方法一、比色法 二、EDTA络合滴定法 三、高锰酸钾滴定法 三种方法的比较 方法一、 比色法一、 实验目的 了解单宁的性质及熟练掌握单宁含量的测定方法二、实验原理 样品中的单宁在碱性溶液中将磷钨钼酸还原，生成深蓝色化合物，其颜色的深浅与单宁的含量成正比，可与标准进行比较定量。三、材料、仪器与试剂 1、材料： 香蕉（未熟透）50g 2、仪器： 天平 组织捣碎机 烧杯 移液管 分光光度计 容量瓶 恒温箱 （30） 3、试剂 ：2、样品测定 果实去皮，迅速称取50g，加入95%乙醇 50mL、偏磷酸50mL、水50mL，置于高速组织捣碎机中

2、打浆1min（或在研钵中研磨成浆状）。称取匀浆20于100容量瓶中，加75%乙醇40mL，在沸水浴中加热20min，冷却后用75%乙醇稀释至刻度。充分混合，以慢速定量滤纸过滤，弃去初滤液。 吸取上述滤液2置于已盛有25mL蒸馏水、2.5mLF-D试剂的50mL容量瓶中，然后加入，剧烈振摇后，以水稀释至刻度，充分摇匀（此时溶液的蓝色逐渐产生）。同时做空白试验。 于30 恒温箱中放置后，用分光光度计在波长处，以试剂空白调零，测定吸光值。 四、结果计算式中: x样品中单宁的质量分数，%； c 比色用样品溶液中单宁的含量（由标准曲线查得 ），g； m 样品质量，g； K 稀释倍数，如按上述方法取样50

3、时，K=（20/200）（2/100）=1/500 五、注意事项 1、样品处理时要尽快进行，以免单宁氧化而造成误差。 2、维生素C也能与F-D试剂作用产生蓝色，因此当样品含有维生素C时需要进行校正，1维生素C相当于0.8单宁酸。方法二、EDTA络合滴定法一、 实验目的 了解单宁的性质及熟练掌握单宁含量的测定方法二、实验原理 根据单宁可与重金属离子形成络合物沉淀的性质，在样品提取液中加入过量的标准Zn(Ac)2溶液，待反应完全后，再用EDTA标准溶液滴定剩余的，根据EDTA标准溶液的消耗量，可计算出样品中单宁的含量。 三、材料、仪器与试剂 1、材料： 香蕉（未熟透）5g 2、仪器：容量瓶 电子天

4、平 研钵 碱式滴定管 3、试剂：1.000 mol/L醋酸锌标准溶液：准确称取Zn(Ac)2H2 O 21.95g,用水溶解后定容至100mL。0.0500 mol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准溶液：准确称取乙二胺四乙酸二钠9.306g,溶解于水，并用水稀释至500mL.pH=10的NH3-NH4Cl缓冲溶液：称取54gNH4Cl 加水溶解后加入浓氨水350mL,用水定容至1000mL。铬黑T指示剂：称取0.59铬黑T，溶于10mL pH=10的NH3-NH4Cl缓冲溶液中，用95%乙醇定容至100mL。四、实验步骤 1.样品处理 称取切碎混匀的样品510g，置于研钵中，加少许石英砂研磨

5、成浆状（干样品经磨碎过筛后，准确称取12g），转入150mL锥形瓶中，用50mL水分多次洗净研钵，洗液一并转入锥形瓶中，振动、提取1015min.2.络合沉淀 在100mL容量瓶中，准确加入Zn（Ac）2标准溶液5mL、浓氨水3.5mL，摇匀（开始有白色沉淀产生，摇动使沉淀溶解）。慢慢将提取物转入容量瓶中，不断振摇，在35水浴中保温结果计算式中: 样品中单宁的质量分数，（）标准溶液的浓度，吸取（）标准溶液的体积，mLEDTA标准溶液的浓度， V2滴定时消耗标准溶液的体积， mL0.1556由实验得出的比例常数，样品质量， 10分取倍数，及样品络合沉淀后定容至100mL，吸取其中的1/10进行滴

6、定。 三角瓶（100mL） 量筒10mL 25mL碱式滴定管 容量瓶 100mL 恒温水浴锅50 3 、试剂 0.01 mol/L KMnO4 标准溶液：称取约1.60g KMnO4溶于1000mL蒸馏水中，盖上表面皿，加热至沸并保持微沸状态约1h。冷却后，放暗处约一周后用垂熔玻璃漏斗或玻璃丝过滤。将滤液转至棕色瓶内暗处保存。用NaC2O4标定KMnO4 。 2.5 mol/L硫酸溶液：取138.8mL浓硫酸稀释至1000mL。 活性炭 四、操作步骤 1、称取5g样品在研钵中研磨成匀浆，用漏斗转移容量瓶定容至 100mL，混匀后用干燥滤过滤，保留滤液。2、吸取样品滤液5.0mL，于100mL三

7、角瓶中，加10mL水和5mL 2.5 mol/L H2SO4，混匀，微热（50）5min后用0.01 mol/L KMnO4 标准溶液滴定至淡粉色维持30s不褪色即为终点，记下消耗的体积V1，重复一次做两个平行样。3、吸取样品滤液5.0mL，于100mL烧杯中，并加3g活性炭，加热搅拌10min，过滤用少量的热蒸馏水冲洗残渣，收集的滤液中加2.5 mol/L硫酸5mL，同样用0.01 mol/L KMnO4 标准溶液滴定至终点，记下消耗的体积V2,重复一次做两个平行样。 式中： CKMnO4 摩尔浓度，mol/L V1滴定样品消耗KMnO4 的毫升数，mL V2活性碳吸附单宁后所消耗的KMnO4的毫升数，mL W样品克数，g 0.04161mL 0.01 mol/L KMnO4 溶液相当于单宁的毫克数，mg六、记录实验结果项目样品活性碳吸附后样品消耗VKMnO4 （mL）平均消耗VKMnO4 （mL）单宁含量（mg/100g）七、注意事项1、过滤时由于溶液粘度大，过滤缓慢，只保留接下来的10mL滤液，以部分代整体。且过滤时要用干燥滤纸。2、开始滴定时反应速度慢，待溶液中产生了Mn2+后，由于