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文档简介
1、生物信息学第三章:序列比较(第一部分)序列两两比较之打点法:Dotlet 界面介绍打点法确实简单,用笔和纸就可以搞定。到此为止,我知道你一定在怀疑它的实际可操作性。如果是条长度 20 的序列,可能你还会硬着头皮拿笔画一画。如果是条长度 200 的序列,你一定觉得,老师在逗你玩!没错,没有人真的拿笔画,老师我都是用自动完成的。可以自动打点的有很多(表 1)。挑其中最常用的 Dotlet做为演示()。Dotlet 基于 Java 开发,所以页面打开后会蹦出 JAVA框。像对待 Jsmol 一样,接受 JAVA,信任 JAVA,运行 JAVA。当然前提是你的电脑已经安装了 JAVA。如果还没有安装,
2、可以到课程附件或者 JAVA 官网安装。别忘了安装后,重启浏览器,JAVA 才能生效。同样的,IE 如果不好使,可以尝试其他浏览器。表 1. 打点法看到上边一行是参数设置选项,包括选择水平位置的网页正常打开后如图 1 所示。序列,选择垂直位置的序列,选择替换记分矩阵,选择以多长的序列为单元打一个点,还有窗口显示的比例,以及计算按钮。左边是打点图的显示窗口,右边是调控打点图显示效果的区域,下面还有一块是序列信息显示区。网页打开时除了 input 按钮,其他位置都是灰的。图 1. Dotlet打点工具界面山东大学 基础医学院 生物信息学课题组荣誉http /bioinfo点击 input 按钮输入
3、要打点的序列。在新打开的窗口里把要打点的序列拷贝进来。这里用附件文件 dotlet1.fasta 里面的序列。拷贝,黏贴。注意,序列输入窗口里只能输入纯序列部分。fasta 格式里带大于号的第一行不能拷贝进来,否则 Dotlet 会把这部分内容也当成序列进行打点。由于 Dotlet 不能自动识别 FASTA 格式里哪是名字,哪是序列,所以要手动的给这条序列取个名字,比如叫 seq1,然后点 ok,一条序列就输入进来了。还需图 1. 打点序列的输入窗口序列输入之后,参数设置行里水平序列的名字和垂直序列的名字都变成了 seq1(图 2)。在第一个例子里面让输入的这条 seq1 序列自己和自己打点。
4、也就是水平位置的序列和垂直位置的序列都是 seq1。替换记分矩阵可以选讲过的各种 BLOSUM 矩阵或者 PAM 矩阵。如果选了这两种矩阵,表明并不是完全一致才打点,而是相似就打点。如果想要严格要求只有完全一致才打点的话,选 Identity。再来看这个打点单元长度下拉条。这里如果选择 1 的话,就是一次只比较一个字母,这跟前面手动打点时的情况是一样的。如果选其他的,比如选择 15,那就是一次比较 15 个字母,也就是看 15 个字母长度的序列整体的相似度如何来确定打不打点。注意这里不是比较完前 15 个字母,然后再从第 16 个字母开始比较后面的 15 个字母,而是第 1 次比较第 1 到第 15 个字母,然后再比较第 2 到第 16 个字母,再是第 3 到第 17 个字母,依次类推。所以选 15 和选 1 所进行的比较的次数是几乎一样多的,只是每次比较的序列单元长度不一样而已。显示比例窗口可以选择打点结果图是 1:1 原图显示,还是缩小为原图的 50%,或者 25%显示。因为对于比较长的序列,这么小的窗口很难把原图显示完整。总结一下,第一个例子里水平序列 seq1,垂直序列也是 seq1,替换积分矩阵选 Blosum62,比较单元长度 15 个字母,窗口显示比例 1:1,最后点compute。山东大学 基础医学院
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