大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色谱法测定

1、大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色谱法测定【摘要】目的建立高效液相色谱法测定大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的方法。方法色谱条件：AngilentT-18柱4.6250，5，流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液1585，V/V，检测波长为290n。结果蛇葡萄素的回归方程为Y=24061X+40.07r=0.9999，n=6，线性范围为0.1011.101g；平均回收率为99.65%，RSD为1.49%。结论该方法简单、结果可靠，为大叶蛇葡萄药材的质量控制提供了快速准确的测定方法。【关键词】高效液相色谱法；大叶蛇葡萄；蛇葡萄素Abstrat：bjetiveTdevelpaethdfrdeterinatinf

2、thententfApelpsininA-pelpsisegalphyllaDielset.GilgbyHPL.ethdsTheseparatinasarriedutnAn-gilentT-18(4.6250,5ithAetnitrile-0.1%phsphriaidslutin(15:85)asbilephase，andthedetetinavelengthas290n.ResultsTheregressinequatinandeffiientasY=24061X+40.07(r=0.9999，n=6)frApelpsin.Thelinearrangeasithintherangef0.10

3、11.101g.Theaveragereveryandpreisin(RSD)fApelpsinere99.65%and1.49%,respetively.nlusinThisethdissiple,aurateandanbeusedfrthequalityntrlfApelpsininApelpsisegal-phyllaDielset.Gilg.Keyrds：HPL;Apelpsisegalphylla;Apelpsin大叶蛇葡萄ApelpsisegalphyllaDielset.Gilg是葡萄科蛇葡萄属的一种植物，是湖北恩施地区民间惯用中草药，其性平，味酸、涩，具有清热利湿、活血化淤之成

4、效，用于治疗痢疾、泄泻、小便淋痛、头昏目胀、高血压等病1。现代药理学研究说明，大叶蛇葡萄中的主要化学成分蛇葡萄素具有多种药理活性，如保肝护肝、抗肿瘤和降压等24。本实验室已对大叶蛇葡萄有效部位进展了指纹图谱研究5。为了更好地控制其质量，本文用高效液相色谱HPL法对不同来源的大叶蛇葡萄中的蛇葡萄素进展了含量测定。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：AngilentT-184.6250，5。流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液1585，V/V；流速：1l/i；柱温：30；检测波长：290n；进样量：10l。转贴于论文联盟.ll.2.2对照品溶液的制备精细称取枯燥至恒重的蛇葡萄素对照品适量，加甲醇制成每毫升

5、含蛇葡萄素0.101g的溶液，作为对照品溶液。2.3供试品溶液的制备精细称取样品过60目筛约0.1g置锥形瓶中，甲醇25l，浸泡30in,超声提取30in，甲醇定容至30l，摇匀，过滤，精细汲取续滤液1l于25l量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。2.4系统适用性实验取对照品溶液、供试品溶液于上述色谱条件下进样，得HPL图见图1。结果在该色谱条件下，供试品在对照品色谱保存时间相应处有相应色谱峰，且样品可得到较好的别离，理论塔板数按蛇葡萄素峰计算大于3000。2.5线性范围的考察精细量取对照品溶液1，2，4，6，8，10l于10l量瓶中，加甲醇至刻度，配置成浓度分别为0.0101，0.0

6、202，0.0404，0.0606，0.0808，0.101g/l的对照品溶液，按上述色谱条件依次注入高效液相色谱仪，以峰面积Y为纵坐标，以标准品的浓度X为横坐标，得蛇葡萄素回归方程：Y=24061X+40.07r=0.9999，n=6。结果说明，蛇葡萄素对照品在0.1011.101g范围呈良好的线性关系。2.6精细度实验精细汲取蛇葡萄素对照品溶液10l，连续进样6次，测定峰面积值，计算RSD为0.66%。结果说明，仪器精细度良好。2.7稳定性实验取供试品溶液10l分别于0，2，6，8，12，24h间隔进展测定，测得结果根本一致，峰面积的RSD为1.20。结果说明，供试品溶液在24h内稳定。2

7、.8重复性实验取同一批样品按供试品溶液的制备方法平行制备6份，按上述色谱条件进展测定，测定各自含量，其RSD为1.50%。结果说明，该方法重复性良好。2.9加样回收实验精细称取含量的6份样品各50g，分别精细参加蛇葡萄素对照品适量，按供试品制备和含量测定项下方法操作，结果平均回收率为99.65%，RSD为1.49%。2.10样品含量测定精细称取各样品0.1g，按“23项下方法操作，按上述色谱条件进样10l测定蛇葡萄素峰面积，以外标两点法计算含量。结果见表1。表1不同来源大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量测定结果略3讨论本文在样品制备方面比拟了回流提取法、索氏提取法和超声提取法，发现超声提取法提取完全、操作简便，同时比拟了浸泡时间和超声提取时间发现皆以30in为宜。现代研究说明蛇葡萄素有很多种药理活性2，本次的测定结果说明，其在大叶蛇葡萄中的含量为30%左右，因此，该药物具有广阔的开发利用前景。【参考文献】1湖北省卫生局.湖北中草药志(第2册).武汉:湖北人民出版社，1982:1078.2董倩倩，陈立峰.二氢杨梅素药理研究进展J.中南药学，2022，35：295.3孙晓杰，沈伟，张秀桥，等.大叶蛇葡萄抗高血压有效部位挑选实验研究J.齐鲁药事，2022，2712：74