医学微生物学：第5章 微生物学检验的质量保证

1、第5章 微生物学检验的质量保证质量保证（quality assurance，QA） 概念：有计划地、系统地评估和监测患者诊疗质量的整个过程，以便及时发现问题，采取有效措施，提高质量和服务 随着质量管理理念的发展，质量保证的重点由发现问题转变为质量评估和质量改进 必须严格控制不合格样本进入检验流程 检验前程序，又叫分析前期，指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序启动时终止的步骤，包括检验申请 标本的采集与运送 检验申请患者姓名、出生日期、病房和床号、年龄和性别 临床表现及当前所用抗菌药物 相关旅行史 标本来源 检验项目 感染类型或目标微生物 标本采集时间、实验室收到标本时间 标本的采集 原始标本

2、采集手册，包括患者准备不同部位标本的采集方法标本运送要求延迟运送时标本的贮藏方法安全运送标本的方法标本标识 标本采集指南应方便标本采集、运送者取阅病人准备标本的运送与接收标本运送：根据申请检验项目的性质；标本采集指南规定的运送时间、运送条件、运送培养基；安全运送标本方法以及国家、地区及当地相关法规要求进行监控。标本接收：制定并执行标本接收或拒收标准，包括合适的标本类型、标本量、运送条件、预防拭子干燥、运送培养基等。缺乏正确标识的标本：一般不接收或处理； 若被检测物质不稳定，并且标本不可替代或很重要，可以先处理，待申请医师或标本采集者识别并确认后，再发送报告。 当前医院适用培养瓶类型常规包括5种

3、：英文代码SASNFAFNPF中文全名成人标准成人标准成人中和抗生素成人中和抗生素儿童或小样本患者需氧培养瓶厌氧培养瓶需氧培养瓶厌氧培养瓶培养瓶采血及接种：采血量：成人 ：510 ml /瓶 儿童： 或 应用抗生素以前 或 停药24小时后接种方法：采血后，推荐先接种需氧瓶，并留意不要向厌氧瓶中注入空气。培养瓶组合： SASN FAFNPF适用人群未接受过抗生素治疗的接受过抗生素治疗的儿童或小样本应用穿刺消毒：建议应用碘酊酒精或洗必泰（或者根据医院常规使用的消毒剂）进行皮肤消毒，减少污染。塑料瓶盖应在注射前临时揭起，如用酒精进行消毒，应风干后再穿刺。导管相关性允许拔管时导管尖端培养 患者手臂血一

4、套菌血症采样方法不允许拔管时经导管采血培养一套 患者手臂血一套注意事项：接种后应及时送往实验室上机培养，血培养瓶不可冷藏或冷冻。请勿直接从导管或留置管取血，不要和血沉及血气测试同时采血，并遵照培养瓶要求血量进行采血。2012年CLSI血培养指南推荐：同时采血23套为佳，以提高血培养阳性捕获率，也有助于污染菌鉴别。建议：可同时左右臂采血各一套送检。血培养瓶的选择儿童瓶成人标准 需氧瓶成人中和抗生素厌氧瓶成人中和抗生素需氧瓶成人标准 厌氧瓶血培养采集套数同时从不同部位采集23套，以提高血培养阳性捕获率注意：1“套”是指一次静脉穿刺尽可能短时间内采集23套必须严格执行皮肤消毒程序 (1) 70%酒精

5、擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。 (2) 1%2%碘酊作用60秒或10 %碘伏6090秒， 从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。 (3) 70%酒精脱碘：对碘过敏的患者，用70%酒精消毒60秒，待酒精挥发干燥后采血。微生物检验中的质量保证 人员 试剂 培养基 设备 检验过程 试剂标识：名称、浓度、储存条件、配制日期、 失效期，生物危害性 新批号或同一批号不同货次试剂使用前性能 评估 方法： 分析质控物质 新旧批号平行试验 常规质控 培养基 外观良好：表面平滑、水分适宜、无污染、适当的颜色和厚度。明确标识：能够获得生产日期、保质期、配方（适用时）、质量控制、贮存条件等信息。 自制培养

6、基：检测每批号相应的性能，如无菌试验、生长试验或与旧批号产品平行试验、生长抑制试验（适用时）、生化反应（适用时）等。购买的培养基 最好检查并记录每批号和/或批次产品的破损、污染状况，以及外观、冷冻或受热等信息。遵循一定质量保证标准产品：免除质量控制，保存生产者所遵循的质量保证标准，以及每批号产品完成无菌试验、质量控制性能合格证明等文件。然而，当培养基脱水、溶血、破损、被污染或量不足时，仍应进行质量控制。不能提供所遵循的质量保证标准的产品：进行质量控制（包括相应的性能检测）设备制定并执行标准操作程序定期实施维护、保养、监测，并记录新设备或经搬运、维修后的设备：性能评估及功能验证，或确保实验结果的

7、准确性 常用设备温度依赖检测设备：定时监测温度，使用过程中注意温度变化；存放试剂和标本的冰箱，亦应监测温度。 确保温度计准确、量程适宜并经检定，已保证设备温度符合要求。定量移液器、微量滴定管或自动分配器：核查并记录使用区间内的准确性和重复性。定期监测特殊设备性能：CO2孵育箱内CO2浓度；厌氧系统的厌氧条件；生物安全柜内气流、过滤器（必要时）；压力灭菌器灭菌效果等。 检验过程 检验方法的确认和验证标准化操作程序生物参考区间：定期评审测量准确性内部质量控制体系标本质量评估检验方法的选择与确认通常选择检测方法和程序与所提供的服务相适宜，并且方便操作公认的、权威的教科书经同行评议的书刊、杂志国际、国

8、家、地区法规明确的方法和程序符合相应用途的内部规程所有方法和程序检测患者标本之前，评估准确性、精确性、灵敏度、特异性、检出限、可报告范围，与已有方法比对。使用后，需定期评审。标准化操作程序Standard Operating Procedure, SOP 包括实验所有重要信息及技术说明，内容： 实验原理、临床意义标本类型、容器和添加剂所需设备、性能参数、校准程序检测试剂、定标试剂、质量控制程序操作步骤、干扰和交叉反应、结果计算生物参考区间结果可报告区间、警告/危急值（适用时）、结果解释、安全性警告及措施、潜在变异来源。分析前、后注意事项，特殊操作模式的处理。 测量准确性溯源性：通过一条具有规定

9、不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。 方法：测量系统的校准和验证； 参比到自然常数或规定的参考值能力验证或实验室间比对计划定期性能评估内部质量控制体系 保证检验结果持续满足预期质量标准质控物质的检测方法、检测次数、操作者与患者标本一致。质控频率遵循有关标准，满足仪器和/或检测系统制造商的要求缺乏合适校准和质控物质的项目：验证结果的准确性及时发现并更正重大的文字错误、实验错误以及可能影响患者处理的不寻常的检测结果。VITEK 2-COMPACT 质控计划 人员：IQC应该由每天进行常规工作的实验室工作人员完成。菌株：质控

10、菌株应该被当作常规标本对待。. 以 下表格给出了各试条需要用到的质控菌株类型:检测卡的种类推荐的质控参考菌株GN ATCC 700323 阴沟肠杆菌；GP ATCC 700327铅黄肠球菌YST ATCC 14053 白色假丝酵母NH ATCCBAA-1152啮蚀艾肯菌ANC ATCC 8482 普通拟杆菌，ATCC 13124 产气荚膜梭菌AST-GN ATCC 25922 大肠埃希菌，ATCC27853 绿脓假单胞AST-GPATCC 29212 粪肠球菌，ATCC29213 金黄色葡萄球菌AST-GP68ATCC 49619 肺炎链球菌以上所选菌株的原则如下：- 毒性低- 容易培养保存- 生物可变性低（包括由于培养条件不同引起的变异);-对抗生素广泛敏感怎样完成IQC?梅里埃质谱分析仪质控计划 梅里埃质谱分析仪质控计划 校