兽医免疫学专题知识讲座

1、兽医免疫学专题知识讲座兽医免疫学专题知识讲座第1页兽医免 疫 学绪论第一篇 免疫学基础理论第四章 免疫学技术概述第五章 凝聚性反应第六章 标识技术第七章 单克隆抗体技术第三篇 临床免疫 第一章 免疫系统 第二章 抗原和抗体 第三章 免疫应答 第二篇 免疫学技术及其应用 第八章 变态反应 第九章 抗感染免疫 第十章 免疫性疾病 兽医免疫学专题知识讲座第2页绪论主要内容：基础概念，简史和进展重点：了解免疫学历史、现实状况和研究及应用新动态，免疫新概念，在生命科学中地位作用。一、免疫概念 什么是免疫，免疫学研究处理什么问题。免疫传统概念：防御疫病（传染病）免疫当代概念：免疫:是机体识别和去除非本身大

2、分子物质,从而保持机体内外环境平衡生理反应。免疫学:是一门新兴学科，它是研究机体免疫系统组织结构和生理功效科学。兽医免疫学专题知识讲座第3页绪论一、免疫概念二、免疫基础特点 2 特异性和多样性：氨基酸、核酸序列 3 记忆：免疫接种理论基础 4 自我调控：基础生理特点1.识别本身和非本身: 抵抗.监视：肿瘤（本身改变）、病原（外源）兽医免疫学专题知识讲座第4页三、免疫基础功效 绪论一、免疫概念二、免疫基础特点2.免疫耐受: 本身稳定3.免疫监视: 抗肿瘤 1.免疫防御: 抗感染兽医免疫学专题知识讲座第5页三、免疫基础功效四、免疫学发展简史 1. 免疫学经验时期(17世纪前) 绪论一、免疫概念二、

3、免疫基础特点2. 经典免疫课时期(18-20世纪) 3.近代免疫课时期(至上世纪50年代) 4.当代免疫课时期(上世纪60年代以来) 超敏反应，免疫耐受，抗体生成克隆学说，免疫学技术( 血凝等）免疫应答细胞分类，免疫调控，分子水平， 免疫学技术兽医免疫学专题知识讲座第6页三、免疫基础功效四、免疫学发展简史绪论一、免疫概念二、免疫基础特点五、当代免疫学进展和热点 1. 理论: 分子和细胞2. 应用: 免疫学方法免疫遗传学和免疫调控机理(MHC) ， 肿瘤免疫学(肿瘤发生、发展)，免疫病理学(本身免疫病：变态反应(过敏反应)，免疫缺点) 试验免疫学(单克隆抗体，基因疫苗，标识技术，肿瘤治疗) 兽医

4、免疫学专题知识讲座第7页三、免疫基础功效四、免疫学发展简史绪论一、免疫概念二、免疫基础特点五、当代免疫学进展和热点六、免疫学应用 诊疗：血清学预防：疫苗治疗：抗血清超微量测量 兽医免疫学专题知识讲座第8页第一章 免疫系统第一节 免疫器官 中枢免疫器官：骨髓、胸腺、法氏囊 外周免疫器官：脾脏、淋巴结 关键点：起源、结构和功效第二节 免疫细胞 淋巴细胞：B细胞、T细胞 其它细胞：单核吞噬细胞、粒细胞 关键点：种类、形态、结构和功效第三节 免疫因子 抗体、补体、细胞因子 关键点：组成、结构和功效 兽医免疫学专题知识讲座第9页第一章 免疫系统第一节 免疫器官 中枢免疫器官： 骨髓 胸腺 法氏囊 外周免

5、疫器官： 脾脏 淋巴结 其它兽医免疫学专题知识讲座第10页第一章 免疫系统第二节 免疫细胞 淋巴细胞：B细胞、T细胞、NK细胞 其它细胞：单核吞噬细胞、粒细胞 关键点：种类、发生发育、形态和功效第一节 免疫器官 兽医免疫学专题知识讲座第11页B细胞在免疫应答中活化增殖和分化兽医免疫学专题知识讲座第12页第一章 免疫系统第二节 免疫细胞 一、淋巴细胞：B细胞、T细胞、NK细胞 第一节 免疫器官 1.种类与形态: 小淋巴细胞(T.B细胞 5 -7，NK细胞，亚群) 免疫母细胞 （2 -20 30） 浆母细胞 (7 - 15)浆细胞 (8 -20)2.发生和分布: 骨髓多能干细胞-胸腺(成熟)-胸腺

6、依赖区(淋巴结等)-活化(抗原) 骨髓多能干细胞-法氏囊(淋巴干细胞-前B细胞-B细胞)-淋巴结等 兽医免疫学专题知识讲座第13页第一章 免疫系统第二节 免疫细胞 一、淋巴细胞：B细胞、T细胞、NK细胞 第一节 免疫器官 淋巴细胞主要特征 特征 T B NK 主要功效 Ab识别、 Ab识别细胞毒 细胞免疫 体液免疫 免疫调整 免疫调整免疫受体 TCR 表面Ig CD16其它表面标志 CD3，4，8 CD19-21 CD56分布%： 血液 70-75 10-1510 淋巴节 70-75 20-25 少 脾 40-50 40-5010兽医免疫学专题知识讲座第14页第一章 免疫系统第二节 免疫细胞

7、一、淋巴细胞：B细胞、T细胞、NK细胞 二、单核吞噬细胞第一节 免疫器官 1.形态与种类 单核细胞(血液. 15-25) 巨噬细胞(组织.80) 其它: 枯否氏(肝),小神经胶质细胞(脑),星形胶质细胞(脑) 滤泡细胞(甲状腺),内皮细胞(血.淋巴组织), 成纤维细胞(结缔组织)2.功效 吞噬.细胞毒(Fc).调整(抗原处理浓缩等,APC,antigen presenting cell).白细胞介素兽医免疫学专题知识讲座第15页第一章 免疫系统第二节 免疫细胞 一、淋巴细胞：B细胞、T细胞、NK细胞 二、单核吞噬细胞第一节 免疫器官 嗜中性，嗜酸性，嗜碱性，肥大细胞等三、粒细胞其它细胞兽医免疫

8、学专题知识讲座第16页免疫细胞发生发育示意图兽医免疫学专题知识讲座第17页第一章 免疫系统第二节 免疫细胞 一、淋巴细胞：B细胞、T细胞、NK细胞 二、单核吞噬细胞 三、粒细胞其它细胞第一节 免疫器官 四、细胞表面标志：CD分子兽医免疫学专题知识讲座第18页第三节 免疫因子 一、补体2. 生物学活性2.1 含量相对稳定:10-15%，动物种间有差异2.2 不稳定:不耐热,对各种理化原因敏感2.3 能被抗原抗体复合物激活（IgM、IgG和个别物质）2.4 代谢率高,半衰期短（58H）2.5 组成：comlement：C1-C9(共11种成份)1.概念 存在于人和动物正常新鲜血液中含有酶样活性一组

9、不耐热球蛋白。兽医免疫学专题知识讲座第19页第三节 免疫因子 一、补体1. 概念2. 生物学活性3. 激活路径： 经典路径: C1q,C1r,C1s(识别单位),C4,C2,C3(激活单位),(攻膜单位) 旁路路径(替换路径):C3,(攻膜单位)C6,C7,C8,C9兽医免疫学专题知识讲座第20页补体激活途经示意图经典途经示意图旁路途经示意图兽医免疫学专题知识讲座第21页第三节 免疫因子 一、补体1.概念 机体免疫细胞和非免疫细胞能合成和分泌小分子多肽类因子, 它们含有调整各种细胞生理功效, 这些因子统称为细胞因子(cytokines)。二、细胞因子兽医免疫学专题知识讲座第22页第三节 免疫因

10、子 一、补体1.概念二、细胞因子2.种类 淋巴因子(淋巴细胞), 单核因子(单核细胞)等白细胞介素(interleukin,IL)干扰素(interforen,IFN)集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF)肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)转化生长因子(transforming growth facteor,TGF-)兽医免疫学专题知识讲座第23页第三节 免疫因子 一、补体1.概念二、细胞因子2.种类3.功效 调整免疫细胞（白细胞介素、干扰素） 免疫效应分子（肿瘤坏死因子、干扰素）刺激造血细胞（集落刺激因子）促进炎症反应（白细

11、胞介素）兽医免疫学专题知识讲座第24页细胞因子种类及其对T、B细胞作用兽医免疫学专题知识讲座第25页第一章 免疫系统思索题与作业:1.免疫系统分哪几个层次，各有哪些组分？2.免疫系统不一样层次和各个组分之间有何区分与联络？3.参加特异性免疫与非特异性免疫不一样组分有何特点？ 举例说明。4.设计一个图或表，把全部参加免疫反应组分都归纳进去。 要求：既要把全部组分均表现在图或表内，又要能表现出 它们之间内在关系。兽医免疫学专题知识讲座第26页第二章抗原和抗体第一节 抗原 抗原概念、性质和分类起源第二节 抗体和免疫球蛋白 抗体与免疫球蛋白概念及其区分 免疫球蛋白结构、分类及作用 抗体功效及应用第三节

12、 抗原与抗体关系 抗原诱导机体产生抗体 抗原抗体特异性结合 兽医免疫学专题知识讲座第27页第二章抗原和抗体第一节 抗原 一、概念 凡是能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞并能与之结合引发特异性免疫物质抗原属性：免疫原性和反应原性 抗原和半抗原变应原性和耐受原性兽医免疫学专题知识讲座第28页第二章抗原和抗体第一节 抗原 一、概念 二、抗原性质1.异源性2.分子量(10,000.5,000较弱,1,000为半抗原)3.化学性质: 组成.蛋白质 多糖; 分子结构. 环状 立体( 三级) 结构4.物理状态: 吸附于颗粒物质( 多糖类或氢氧化铝)兽医免疫学专题知识讲座第29页第二章抗原和抗体第一节 抗原 一

13、、概念 二、抗原性质三、抗原决定簇 （抗原表位） 抗原决定簇： 与抗体结合部位（基团） 抗原价：单、多价及功效价 性质: 化学基团. 旋光性. 构象. 次序 数量: 多价. 单价; 功效价. 非功效价 大小: 5-7个氨基酸，5-6个糖基，5-8个核苷酸兽医免疫学专题知识讲座第30页抗原与抗原决定簇 一个抗原分子含有数个抗原决定簇 每个 抗原决定簇 最少诱导一种特异性抗体 蛋白质抗原决定簇 由5-7个氨基酸组成抗原抗原决定簇氨基酸残基序列兽医免疫学专题知识讲座第31页第二章抗原和抗体第一节 抗原 一、概念 二、抗原性质 四、抗原种类 三、抗原决定簇 天然抗原人工抗原半抗原兽医免疫学专题知识讲座

14、第32页第二章抗原和抗体第一节 抗原第二节 抗体和免疫球蛋白 关键点： 抗体与免疫球蛋白概念及其区分。 免疫球蛋白结构、分类、作用。兽医免疫学专题知识讲座第33页第二章抗原和抗体第二节 抗体和免疫球蛋白 一、抗体与免疫球蛋白概念 抗体概念： 在抗原和免疫系统相互作用下由B细胞产生 能与对应抗原发生反应特异性Ig：种类：异种、同种抗体；本身抗体，异嗜抗体； 完全、不完全抗体等免疫球蛋白概念： 体液中含有免疫功效一大类含有相同化学性质 球蛋白。兽医免疫学专题知识讲座第34页第二章抗原和抗体第二节 抗体和免疫球蛋白 一、抗体与免疫球蛋白概念 二、免疫球蛋白基础结构和功效 Ig基础结构兽医免疫学专题知

15、识讲座第35页Ig结构示意图兽医免疫学专题知识讲座第36页五种Ig结构示意图兽医免疫学专题知识讲座第37页第二章抗原和抗体第二节 抗体和免疫球蛋白 一、抗体与免疫球蛋白概念及其区分 二、免疫球蛋白结构和功效 三、各类免疫球蛋白理化特征和功效IgG: 70-80%； 单体；160,000-180,000； 再次反应IgM: 10-15%；五聚体；900,000； 首次反应IgA: 少 双聚体；170,000-390,000； 分泌型IgE: 少 单体；170,000不耐热(56C,1h); 过敏IgD: 少 单体; 170,000 表面兽医免疫学专题知识讲座第38页第二章抗原和抗体第二节 抗体和

16、免疫球蛋白 一、抗体与免疫球蛋白概念及其区分 二、免疫球蛋白结构和功效 三、各类免疫球蛋白理化特征和功效 四、抗原抗体结合：亲和力与亲协力兽医免疫学专题知识讲座第39页抗原抗体结协力组成氢键离子键范德华力 疏水力 抗原分子 抗体分子 兽医免疫学专题知识讲座第40页第二章抗原和抗体第二节 抗体和免疫球蛋白 一、抗体与免疫球蛋白概念及其区分 二、免疫球蛋白结构和功效 三、各类免疫球蛋白理化特征和功效 四、抗原抗体结合：亲和力与亲协力 五、抗体功效及应用1.医学与兽医学：免疫治疗（被动免疫）； 病原诊疗（判定微生物和抗原分型）； 血型判定2.生物学其它领域：生物活性物质检测； 抗原抗体在细胞和亚细胞

17、定位。兽医免疫学专题知识讲座第41页第二章抗原和抗体第一节 抗原第二节 抗体和免疫球蛋白第三节 抗原与抗体关系 抗原诱导机体产生抗体兽医免疫学专题知识讲座第42页传统抗体(多克隆抗体)抗 原免疫（刺激机体）123412341234脾 脏淋巴結B 細胞兽医免疫学专题知识讲座第43页第二章抗原和抗体第一节 抗原第二节 抗体和免疫球蛋白第三节 抗原与抗体关系 一、抗原诱导机体产生抗体 二、抗原抗体特异性结合 兽医免疫学专题知识讲座第44页抗体由抗原诱导免疫细胞所产生，并与之结合1111抗体结合抗原B细胞浆细胞抗体抗原兽医免疫学专题知识讲座第45页第二章抗原和抗体第一节 抗原第二节 抗体和免疫球蛋白第

18、三节 抗原与抗体关系 思索题与作业:1.什么是抗体？什么是免疫球蛋白？二者同异是什么？2.免疫球蛋白分类与它们免疫功效有何关系？3.免疫球蛋白结构与它们功效有何关系？举例说明。4.作出图或表概括免疫球蛋白结构与理化特征。兽医免疫学专题知识讲座第46页第三章 免疫应答第二节 特异性免疫与非特异性免疫应答 第三节 免疫调整 第一节 免疫应答基础特点 关键点：特异性免疫与非特异性免疫 相互作用、调整等关系。兽医免疫学专题知识讲座第47页第三章 免疫应答第一节 免疫应答基础特点二、组成 三、特点 组织器官: 皮肤粘膜；血脑屏障、血胎屏障等。 脾脏、淋巴结等。 细胞：吞噬细胞、粒细胞；淋巴细胞 分子：补

19、体、细胞因子；抗体。非特异性免疫：先天(不感染）性； 识别本身和非本身；无再次反应； 作用快范围广。 特异性免疫：取得性；特异性；记忆性。一、种类 非特异性免疫；特异性免疫兽医免疫学专题知识讲座第48页第三章 免疫应答第二节 特异性免疫与非特异性免疫 一、非特异性免疫应答过程 第一节 免疫应答基础特点 1炎症反应2. 吞噬：去除异物3补体激活4干扰素等兽医免疫学专题知识讲座第49页非特异免疫应答（一）： 巨噬细胞反抗原吞饮、消化兽医免疫学专题知识讲座第50页非特异性免疫应答(二) APC对两类抗原吞饮、消化、处理和呈递兽医免疫学专题知识讲座第51页第三章 免疫应答第二节 特异性免疫与非特异性免

20、疫 一、非特异性免疫应答过程 第一节 免疫应答基础特点 二、特异性免疫应答过程 1.普通过程：激活、反应、效应2. 反应类型： 细胞免疫应答； 抗体免疫应答兽医免疫学专题知识讲座第52页特异性免疫应答示意图激活反应效应兽医免疫学专题知识讲座第53页第三章 免疫应答第二节 特异性免疫与非特异性免疫 一、非特异性免疫应答过程 第一节 免疫应答基础特点 二、特异性免疫应答过程 1.普通过程：激活、反应、效应2.反应类型：细胞免疫应答；抗体免疫应答3.特异性免疫应答首次反应和再次反应及其特点兽医免疫学专题知识讲座第54页体液免疫应答特点：首次和再次反应兽医免疫学专题知识讲座第55页第三章 免疫应答第二

21、节 特异性免疫与非特异性免疫 一、非特异性免疫应答过程 第一节 免疫应答基础特点 二、非特异性免疫应答过程 三、影响免疫应答原因 1. 抗原 2. 机体 3. 免疫方法兽医免疫学专题知识讲座第56页第三章 免疫应答第三节 免疫调整 一、 特异性与非特异性免疫应答关系兽医免疫学专题知识讲座第57页非特异免疫应答： 几个免疫反应途经示意图兽医免疫学专题知识讲座第58页第三章 免疫应答第三节 免疫调整 一、 特异性与非特异性免疫应答关系非特异性免疫是特异性免疫基础非特异性免疫与特异性免疫相互作用特异性免疫是非特异性免疫补充兽医免疫学专题知识讲座第59页第三章 免疫应答第三节 免疫调整 二、 免疫应答

22、调整机制 一、 特异性与非特异性免疫应答关系 1. 神经内分泌调整中枢神经系统内分泌系统免疫系统垂体激素激素免疫因子激素神经肽免疫因子IL-1兽医免疫学专题知识讲座第60页第三章 免疫应答第三节 免疫调整 二、 免疫应答调整机制 一、 特异性与非特异性免疫应答关系 1. 神经内分泌调整 5. 基因调整: 对不一样抗原反应性(MHC识别抗原)， 个体差异，品种间差异，种间差异， 免疫缺点等3. 细胞因子调整: IL，IFN，TF,MF 2. 免疫细胞之间调整: T细胞 Th Ts B，NK，CD, 红细胞(CR1) 4. 抗原抗体调整: 反馈 兽医免疫学专题知识讲座第61页第三章 免疫应答 思索

23、题与作业:1. 特异性免疫应答与非特异性免疫应答主要有何区分？2. 怎么了解特异性免疫应答与非特异性免疫应答 是相辅相成、不可分割？举例说明。3. 调整免疫应答主要成份是什么？主要路径是什么？4. 设计一免疫应答图解。 要求：能够显示参加免疫应答全部调整原因及其 相互关系。兽医免疫学专题知识讲座第62页第四章 免疫学技术概述概念 免疫学技术与血清学技术免疫学技术 免疫细胞试验技术(源于细胞免疫) 抗体抗原试验技术(源于体液免疫)兽医免疫学专题知识讲座第63页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 1.凝聚性反应:沉淀 凝集 兽医免疫学专题知识讲座第64页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类

24、型 1.凝聚性反应 沉淀: 可溶性抗原与抗体凝集: 颗粒性抗原与抗体 兽医免疫学专题知识讲座第65页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 1.凝聚性反应:沉淀 凝集 2.有补体参加反应兽医免疫学专题知识讲座第66页补体结合试验原理（结果阳性）待检系统 抗原指示系统补体消耗+ 抗体不溶血兽医免疫学专题知识讲座第67页补体结合试验原理（结果阴性）待检系统指示系统补体未消耗+ 抗体溶血 无抗原兽医免疫学专题知识讲座第68页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 1.凝聚性反应:沉淀 凝集 2.有补体参加反应 3.标识抗体技术 1.种类：酶标识，同位素标识，荧光标识，其它标识3.特点：放大作用,

25、敏感性，微量化2.原理：化学方法连接兽医免疫学专题知识讲座第69页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 1.凝聚性反应:沉淀 凝集 2.有补体参加反应 3.标识抗体技术 4.中和反应 抗体与毒素或病原体结合 方法：细胞、鸡胚和动物试验兽医免疫学专题知识讲座第70页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 二、血清学反应普通特点 1.特异性和交叉性(交叉:多价抗原抗体反应） 2.亲和力和亲协力 亲和力:抗体对简单单价半抗原或抗原决定簇结协力、 结合簇大小,吻合严密性和分子间力性质和强度结协力: 氢键. 静电力.Van-der Waals-力 疏水键(50%)亲协力:抗原抗体复合物稳定性 (取

26、决于亲协力和抗体抗原所饱和价数) 兽医免疫学专题知识讲座第71页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 二、血清学反应普通特点 1.特异性和交叉性(交叉:多价抗原抗体反应） 2.亲和力和亲协力 3.抗原抗体反应二阶段性和可逆性 结合阶段:快、不可见可见阶段:凝集,沉淀等.较慢兽医免疫学专题知识讲座第72页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 二、血清学反应普通特点 1.特异性和交叉性(交叉:多价抗原抗体反应） 2.亲和力和亲协力 3.抗原抗体反应二阶段性和可逆性 4.抗原抗体结合百分比: 带现象前带: 抗体过多 在沉淀反应中稀释抗原；后带: 抗原过多 在凝集反应中稀释抗体.兽医免疫学专题

27、知识讲座第73页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 二、血清学反应普通特点 1.特异性和交叉性(交叉:多价抗原抗体反应） 2.亲和力和亲协力 3.抗原抗体反应二阶段性和可逆性 4.抗原抗体结合百分比: 带现象5.血清学反应影响原因a. 电解质: b. 温度: 37 - 56C c. pH: 6-8 低于3 解离兽医免疫学专题知识讲座第74页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 二、血清学反应普通特点三、应用1.抗原、抗体检测2.生物活性物质检测 3.抗原在细胞和亚细胞定位4.微生物判定和分型5.血型判定兽医免疫学专题知识讲座第75页第四章 免疫学技术概述一、血清学反应类型 二、血清学

28、反应普通特点三、应用四、血清学试验发展趋势 样品微量化 方法标准化 试剂商品化 检测伎俩自动化兽医免疫学专题知识讲座第76页思索题与作业:1.常见免疫学试验方法有哪些？怎样归类？2.血清学方法应用于哪些方面？3.血清学方法主要特点是什么？第四章 免疫学技术概述 兽医免疫学专题知识讲座第77页第五章 凝聚性反应第一节 沉淀反应一、原理二、常见方法: 1.絮状沉淀试验和免疫浊度法（液相）2.环状沉淀试验（液相）兽医免疫学专题知识讲座第78页液相沉淀反应絮状沉淀反应环状沉淀反应+抗血清抗原抗原抗体兽医免疫学专题知识讲座第79页第五章 凝聚性反应第一节 沉淀反应一、原理二、常见方法: 1.环状沉淀试验

29、（液相）3.免疫扩散试验（固相） 单向单扩散;双向单扩散(辐射扩散);双向双扩散 2.絮状沉淀试验和免疫浊度法（液相）兽医免疫学专题知识讲座第80页免疫扩散技术单向扩散试验双向扩散试验固相沉淀反应应用（定量分析）：抗原或抗体效价测定兽医免疫学专题知识讲座第81页抗原性质分析应用（定性分析）：多抗原成份分析兽医免疫学专题知识讲座第82页第五章 凝聚性反应第一节 沉淀反应一、原理二、常见方法: 1.絮状沉淀试验和免疫浊度法（液相） 2.环状沉淀试验（液相） 3.免疫扩散试验（固相） 单向单扩散;双向单扩散(辐射扩散);双向双扩散 4.免疫电泳: 原理： 抗原电荷;电场强度(10V/cm); 溶液离

30、子强度(0.02-0.2)5.对流免疫电泳兽医免疫学专题知识讲座第83页免疫电泳原理与结果兽医免疫学专题知识讲座第84页免疫扩散技术免疫电泳技术单向扩散试验双向扩散试验火箭电泳对流电泳免疫电泳+固相沉淀反应兽医免疫学专题知识讲座第85页第五章 凝聚性反应第一节 沉淀反应一、原理二、常见方法: 1.絮状沉淀试验和免疫浊度法（液相） 2.环状沉淀试验（液相） 3.免疫扩散试验（固相） 单向单扩散;双向单扩散(辐射扩散);双向双扩散 4.免疫电泳: 原理： 抗原电荷;电场强度(10V/cm); 溶液离子强度(0.02-0.2)5.对流免疫电泳6.火箭免疫电泳兽医免疫学专题知识讲座第86页第五章 凝聚

31、性反应第二节 凝集反应 一、原理 二、常见方法: 1.直接凝集试验 (玻片法; 试管法. 细菌; 红血球) 2.间接凝集试验 兽医免疫学专题知识讲座第87页颗粒性抗原凝集素(抗体) 直接凝集反应兽医免疫学专题知识讲座第88页正向间接凝集反应可溶性抗原载体颗粒抗体颗粒性抗原兽医免疫学专题知识讲座第89页反向间接凝集反应抗体可溶性抗原载体颗粒连接抗体标识颗粒兽医免疫学专题知识讲座第90页间接凝集抑制反应凝集凝集抑制待检样品待检样品凝集抗原兽医免疫学专题知识讲座第91页第五章 凝聚性反应第二节 凝集反应 一、原理 二、常见方法: 1.直接凝集试验 (玻片法; 试管法. 细菌; 红血球) 2.间接凝集

32、试验 a.乳胶凝集试验 (聚苯乙烯乳胶作载体,0.8微米) b.炭素凝集试验 (抗血清致敏.猪囊虫) c.间接血凝试验 (血球选择. 醛化. 致敏) 3.凝集试验结果判断:定性;定量兽医免疫学专题知识讲座第92页凝集反应判断兽医免疫学专题知识讲座第93页思索题与作业: 设计一个血清学方法，用于诊疗鸡新城疫病毒抗原。兽医免疫学专题知识讲座第94页第六章 标识技术 标识技术基础特点： 间接、放大；敏感，快速，微量 主要介绍酶标技术原理、常见酶种类。免疫酶检测技术所使用常见方法和应用范围。重点是固相酶联吸附法和酶标斑点法。 兽医免疫学专题知识讲座第95页第六章 酶标技术 一、原理 二、常见标识酶：

33、高效催化活性，稳定，易于得到，有可见反应HRP（辣根过氧化物酶）等 抗原与抗体特异反应将待测物与酶连接，然后经过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定对象能够是抗体也能够是抗原。酶（生物催化剂，催化活性）+ 抗体（免疫学活性）兽医免疫学专题知识讲座第96页一、原理二、常见标识酶第六章 酶标技术 三、酶联免疫吸附检测（ELISA）实例 Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay 兽医免疫学专题知识讲座第97页标识技术 直接法兽医免疫学专题知识讲座第98页兽医免疫学专题知识讲座第99页标识技术夹心法兽医免疫学专题知识讲座第100页标识技术竞争法兽医免疫学专题知识讲座第1

34、01页标识技术兽医免疫学专题知识讲座第102页一、原理二、常见标识酶第六章 酶标技术 四、免疫酶技术种类 免疫酶沉淀技术，免疫酶定位技术，免疫酶定量测定技术五、抗体酶标识法 戊二醛法，过碘酸钠法，SPA系统，亲和素生物素系统六、酶结合物判定 抗体活性测定七、酶结合物保留三、酶联免疫吸附检测（ELISA）实例兽医免疫学专题知识讲座第103页思索题与作业:酶标技术原理和优点是什么？第六章 酶标技术 兽医免疫学专题知识讲座第104页第七章 单克隆抗体技术一、单克隆抗体技术特点 常规抗体与单克隆抗体比较 兽医免疫学专题知识讲座第105页 多克隆抗体与单克隆抗体比较多克隆抗体反应单克隆抗体反应抗原 抗原

35、 产生针对各种抗原决定簇隆抗体产生针对单一抗原决定簇抗体保留期短永久保留质量难以控制质量稳定兽医免疫学专题知识讲座第106页第七章 单克隆抗体技术一、单克隆抗体技术特点 常规抗体与单克隆抗体比较 常规抗体：多克隆（多决定簇） 保留时间短 质量难控制单克隆抗体：针对单一抗原决定簇 永久保留 质量稳定兽医免疫学专题知识讲座第107页短命浆细胞与骨髓瘤细胞融合产生特异性抗体脾脏浆细胞瘤细胞杂交瘤细胞免疫小鼠第七章 单克隆抗体技术一、单克隆抗体技术特点二、单克隆抗体技术原理长久存活+兽医免疫学专题知识讲座第108页第七章 单克隆抗体技术二、单克隆抗体技术原理一、单克隆抗体技术特点三、制备方法1免疫小鼠

36、（Balb/c，NZB品系)。高纯度抗原。免疫4次后取脾脏， 分离淋巴细胞。2细胞融合：免疫鼠脾细胞和鼠源B细胞株（Sp/O2），融合剂PEG3选择培养： Sp/O2细胞株为营养缺点型，便于筛选。核苷酸合成路径核苷酸次黄嘌呤（H）胸腺嘧啶核苷（T）核苷酸合成替换路径氨基喋呤（A）叶酸兽医免疫学专题知识讲座第109页第七章 单克隆抗体技术二、单克隆抗体技术原理一、单克隆抗体技术特点三、制备方法1免疫小鼠（Balb/c，NZB品系)。高纯度抗原。免疫4次后取脾脏， 分离淋巴细胞。2细胞融合：免疫鼠脾细胞和鼠源B细胞株（Sp/O2），融合剂PEG3选择培养： Sp/O2细胞株为营养缺点型，便于筛选。

37、4筛选阳性细胞株：抗体检测（酶标，同位素标识，荧光标识）5克隆和亚克隆兽医免疫学专题知识讲座第110页2. 单克隆抗体筛选克隆兽医免疫学专题知识讲座第111页第七章 单克隆抗体技术二、单克隆抗体技术原理一、单克隆抗体技术特点三、制备方法1免疫小鼠（Balb/c，NZB品系)。高纯度抗原。免疫4次后取脾脏， 分离淋巴细胞。2细胞融合：免疫鼠脾细胞和鼠源B细胞株（Sp/O2），融合剂PEG3选择培养： Sp/O2细胞株为营养缺点型，便于筛选。4筛选阳性细胞株：抗体检测（酶标，同位素标识，荧光标识）5克隆和亚克隆6单克隆抗体生产：方法（体内法，培养法）及其关键点7细胞保留（超低温冷冻）和预防变异。兽

38、医免疫学专题知识讲座第112页第七章 单克隆抗体技术二、单克隆抗体技术原理一、单克隆抗体技术特点三、制备方法五、应用 四、单克隆抗体技术历史和进展其它：抗体芯片、生物导弹基于单抗抗体工程表位结构分析：噬菌体展示技术特异性检测:蛋白分子（病原抗原、其它分子）兽医免疫学专题知识讲座第113页第八章 变态反应关键点 介绍参加各种变态反应组分（细胞、因子）、过程和机制、特点、区分和临床实例。概念 变态反应（allergy）是免疫系统对再次进入机体抗原作出因过于强烈或不适当而造成组织器官损伤一类免疫反应。除伴有炎症反应维持机体正常功效免疫反应并无实质性区分。兽医免疫学专题知识讲座第114页第八章 变态反

39、应第一节 过敏反应 依据变态反应中所参加细胞、活性物质、损伤组织器官机制和产生反应所需时间，分为四型。第二节 细胞毒型第三节 免疫复合物型第四节 细胞免疫（迟发）型 兽医免疫学专题知识讲座第115页 概念：机体再次接触抗原时引发在数分钟至数小时内以炎症为特点反应第八章 变态反应第一节 过敏反应兽医免疫学专题知识讲座第116页抗原（过敏原）Th-细胞B-细胞IL-4记忆细胞浆细胞抗体（IgE）肥大细胞平滑肌毛细血管黏液腺血小板末梢神经嗜碱性粒细胞过敏反应示意图兽医免疫学专题知识讲座第117页激活肥大细胞表面受体机理示意图兽医免疫学专题知识讲座第118页第八章 变态反应第一节 过敏反应第二节 细胞

40、毒型 由抗体介导细胞毒，即抗体与为抗原细胞发生反应，激活补体，形成以细胞损伤为特征一个变态反应兽医免疫学专题知识讲座第119页细胞毒型变态反应示意图新生儿溶血性贫血首次妊娠抗原溢出母体再次妊娠记忆细胞浆细胞产生抗体溶血胎盘兽医免疫学专题知识讲座第120页第八章 变态反应第一节 过敏反应第二节 细胞毒型 由抗体与可溶性抗原结合形成免疫复合物，沉积于局部血管壁，激活补体和吞噬细胞，产生局部组织损伤为特征变态反应第三节 免疫复合物型兽医免疫学专题知识讲座第121页免疫复合物型变态反应示意图抗原抗体复合物嗜中性粒细胞兽医免疫学专题知识讲座第122页第八章 变态反应第一节 过敏反应第二节 细胞毒型 由细

41、胞免疫介导一个变态反应。T细胞与对应抗原再次反应时，分泌细胞因子，使单核巨噬细胞迁移于局部组织，产生炎症或肉芽肿。第三节 免疫复合物型第四节 细胞免疫（迟发）型 兽医免疫学专题知识讲座第123页细胞免疫型变态反应抗原致敏T细胞释放细胞因子活化巨嗜细胞局部反应兽医免疫学专题知识讲座第124页四种变态反应特征 参加成份机理致病机理 病例 IgE 补体 补体 T细胞 肥大细胞Ab+Ag(细胞) Ab+Ag(可溶) 吞噬细胞致敏 IgE结合肥大细胞 活性介质 Ab+Ag(本身细胞)Ab+Ag沉积血管组织细胞壁 Ts机能下降 介质机制紊乱 补体+Ab+Ag前提：长久炎症 巨噬细胞 +淋巴细胞局部免疫加剧

42、细胞转移 青霉素反应花粉 输血反应 新生儿溶血性贫血 血清病本身免疫复合物病 结核菌素肉芽肿 型 型型 型 慢性感染兽医免疫学专题知识讲座第125页第八章 变态反应第一节 过敏反应第二节 细胞毒型思索题与作业: 写出参加各种变态反应组分（细胞、分子）、过程和机制、特点、区分及临床实例。 第三节 免疫复合物型第四节 细胞免疫（迟发）型 兽医免疫学专题知识讲座第126页重点：感染：病原体侵入机体，定居生长繁殖，直接或经过产生毒素引发机体组织细胞、器官或全身性病理改变。第九章 抗感染免疫抗感染免疫：机体在病原体感染后所产生生理性和病理性反应过程。概念：了解不一样病原诱导免疫机理特点兽医免疫学专题知识

43、讲座第127页第一节 抗细菌感染免疫第九章 抗感染免疫1.细菌种类及抗原种类、性质和特点 O、H、K等。一、特点： 因细菌感染部位、结构特点和抗原性质，引发不一样免疫反应。2.细菌感染方式：细胞内和细胞外感染。二、抗细菌感染免疫机制： 特异性非特异性免疫机制和调整1.溶菌酶、补体等；吞噬、消化；2.细胞免疫；3.体液免疫：产生抗体和中和作用：毒素、酶类、K抗原；4.调理作用：抗体依赖性性细胞毒。兽医免疫学专题知识讲座第128页细菌结构示意图菌毛细胞浆鞭毛核糖体DNA细胞膜细胞壁荚膜兽医免疫学专题知识讲座第129页第九章 抗感染免疫第二节抗病毒免疫1.病毒结构和抗原一、病毒生物学性质和感染特点二

44、、抗病毒感染免疫机制1.非特异性免疫：干扰素（种类及特点）；2.特异性免疫：3.病毒连续性感染特点细胞免疫：细胞毒：消除病毒（感染细胞，K细胞）；抗体：中和作用，抗体依赖性细胞毒；2.感染细胞特点：寄生部位（胞内外、核内外）和吸附侵入、复制和释放过程，以及对宿主细胞影响。兽医免疫学专题知识讲座第130页壳粒纤突囊膜衣壳芯髓核衣壳病毒结构示意图兽医免疫学专题知识讲座第131页第九章 抗感染免疫第三节 抗寄生虫免疫一、畜禽寄生虫种类及其寄生特点1.种类：原虫、蠕虫、昆虫等（进化特点和机体生理活动）2.寄生虫抗原性质：免疫原性低3.机体抗寄生虫免疫基础特点（IgA,IgE,过敏反应）兽医免疫学专题知

45、识讲座第132页第九章 抗感染免疫第三节 抗寄生虫免疫二、抗原虫感染免疫1.非特异性免疫：终生不感染一、畜禽寄生虫种类及其寄生特点3.原虫对免疫应答逃避：（抑制，变换、隐蔽） 吞噬不消除，抗原变换，抗原隐蔽2.特异性免疫：T细胞和抗体兽医免疫学专题知识讲座第133页原虫感染示意图孢子体裂殖子配子体兽医免疫学专题知识讲座第134页第九章 抗感染免疫第三节 抗寄生虫免疫三、抗蠕虫感染免疫1.非特异性免疫：宿主与寄生虫，寄生虫之间拮抗一、畜禽寄生虫种类及其寄生特点二、抗原虫感染免疫2.特异性免疫：体液免疫：IgE，IgA（肠道血液） 细胞免疫：迟发型变态反应，局部炎症环境 细胞毒杀伤幼虫等3.对免疫

46、应答逃避：MHC，吸附宿主抗原，抗原变换， 抑制免疫反应，诱导耐受。兽医免疫学专题知识讲座第135页抗蠕虫感染免疫示意图兽医免疫学专题知识讲座第136页第四节 疫 苗一、对疫苗要求二、疫苗种类1. 传统疫苗：减毒疫苗，灭活疫苗基因疫苗创造与后基因组计划安全性，有效性2. 工程疫苗：多肽疫苗，重组疫苗3. 基因疫苗（核酸疫苗）基因疫苗制作原理兽医免疫学专题知识讲座第137页亚单位疫苗基因操作示意图保护性抗原基因转入表示质粒转入工程菌表示质粒重组质粒诱导表示多肽疫苗兽医免疫学专题知识讲座第138页缺失霍乱毒素A1肽示意图兽医免疫学专题知识讲座第139页重组疫苗重组病毒疫苗示意图兽医免疫学专题知识讲

47、座第140页重组质粒示意图兽医免疫学专题知识讲座第141页第四节 疫 苗一、对疫苗要求二、疫苗种类1. 传统疫苗：减毒疫苗，灭活疫苗基因疫苗创造与后基因组计划2. 工程疫苗：多肽疫苗，重组疫苗3. 基因疫苗（核酸疫苗）基因疫苗制作原理基因疫苗作用机制基因疫苗评价与发展前景安全，作用持久，可连接多价表位，问题：免疫路径，高效表示兽医免疫学专题知识讲座第142页核酸疫苗免疫反应示意图T细胞B细胞组织中抗原提呈细胞杀伤性T细胞Th1细胞靶细胞T细胞增殖分化杀伤靶细胞记忆T细胞记忆B细胞Th2细胞分泌细胞因子浆细胞组织中抗原提呈细胞Th细胞抗体兽医免疫学专题知识讲座第143页第四节 疫 苗一、对疫苗要

48、求二、疫苗种类三、疫苗佐剂与免疫载体1. 佐剂作用：增强机体免疫效果2. 佐剂种类：化学，生物学，物理学3. 免疫载体兽医免疫学专题知识讲座第144页第四节 疫 苗一、对疫苗要求二、疫苗种类四、疫苗生产、储运和使用三、疫苗佐剂与免疫载体1. 疫苗生产工艺与规程2. 疫苗储运条件要求3. 疫苗接种路径、质量与安全保障兽医免疫学专题知识讲座第145页第十章 免疫性疾病种类 免疫系统或免疫调整系统异常所致本身免疫与本身免疫病；免疫缺点病原因 兽医免疫学专题知识讲座第146页第十章免疫性疾病第一节本身免疫与本身免疫病 本身免疫病：因本身免疫应答而产生本身组织损伤或功效障碍，出现临床症状。一、概念 本身免疫：泛指机体免疫系统对本身成份产生免疫应答，产生本身抗体或致敏淋巴细胞兽医免疫学专题知识讲座第147页第十章免疫性疾病第一节本身免疫与本身免疫病二、本身免疫病种类1.原发型：与遗传相关一、概念 器官特异性: 特定器官,如胰岛素依赖性， 人糖尿病，桥本氏甲状腺炎非器官特异性:各种器官组，如：类风湿性关节炎 人重症肌无力。兽医免疫学专题知识讲座第148页因本身免疫引发甲状腺亢进示意图兽医免疫学专题知识讲座第149页ACh：胆碱能神经递质 兽医免疫学专题知识讲座第150页第十章免疫性疾病第一节本身免疫与本身免疫病二、本身免疫病种类1.原发型：与遗传相关一、概念 器官特异性: