“三黄补血汤”对失血小鼠的补血作用评价

1、“三黄补血汤对失血小鼠的补血作用评价【摘要】目的研究三黄补血汤对失血小鼠的补血作用。方法以剪尾法造失血模型，以红细胞RB、白细胞B、血红蛋白Hgb、促红细胞生成素EP为研究指标，评价三黄补血汤的补血效果。结果造模可使红细胞数和白细胞数减少、血红蛋白含量降低,三黄补血汤有明显的增加红细胞和白细胞数量、血红蛋白含量及EP程度。结论三黄补血汤显著的补血效果，有进一步研究的意义。【关键词】三黄补血汤红细胞细胞血红蛋白促红细胞生成素“三黄补血汤是中药成方中补血作用较强的一个复方，见于明代张洁所著?仁术便览?1，其属于中药四物汤的类方，由熟地、生地、牡丹皮、黄芪、柴胡、归身、川芎、升麻、白芍等多味药物组成

2、，有补血益气及升阳之功，用以治疗亡血血虚，六脉俱大，按之空虚者。本实验以红细胞RB、白细胞B、血红蛋白Hgb、促红细胞生成素EP为研究指标，研究三黄补血汤对失血性贫血小鼠的补血效果。1仪器、药品与试剂LYPUSBX51显微镜，LYPUSDP70显微摄像头，SysexF-820半自动血球计数仪。中药熟地、生地、牡丹皮、黄芪、柴胡、归身、川芎、升麻、白芍均购自武汉市国药集团。EP试剂盒(H-162)s-7956Lt.#A2505，SantaruzBitehnlgyin,USA；FIT标记羊抗兔IgG(ZF-0311)Lt.G942496，产地美国Piere。实验用小鼠由华中科技大学同济医学院实验动

3、物房提供。2方法2.1中药的分组及提取中药根据文献1的相关记载，确定方剂组成及药物剂量，将药物提龋提取方法：药材粉碎至一定细度，加8倍量水，浸泡30in，煎煮30in，倾出药液，压滤，药渣参加4倍量水，煎煮25in，压滤。2次煎煮均回收馏出液。合并液体，减压浓缩至一定浓度，参加乙醇至终浓度达60%，低温存放48h，过滤沉淀，回收乙醇，调整至药材与溶液量比gl为12。2.2给药量确实定根据文献2中动物与人体表比换算法,由成人剂量换算成小鼠用药量。2.3血虚动物模型的制备根据文献3取小鼠，以75%酒精擦拭尾部使血管扩张，充血后剪去尾端0.250.3，然后将尾端伤口浸入37温水中,直至小鼠失血0.5

4、l。2.4给药及取血方法将实验小鼠分为正常组、手术组不给药、手术后给药组。各组动物为10只，其中手术组与给药组共3组均需按血虚动物模型制备方式处理，而给药组共3组在失血后1h给予药物，按照人与鼠的体外表积折算给药量，灌胃2次/d。共饲养3d，第4天早晨断头取血，搜集血液。2.5RB、B、Hgb、EP测试进展RB、B及Hgb测试,用SysexF-820半自动血球计数仪进展测定；运用免疫荧光法对EP含量进展测定，老鼠血液离心1500r/in,10in取上清液，涂片，加EP试剂1200孵育12h，再加FIT标记羊抗兔IgG反响30in，在荧光显微镜观察。3结果动物实验后表现:手术组小鼠手术后出现紧张

5、、烦躁。第2天观察，逐渐出现精神活动欠佳,毛欠光泽,少饮少食的现象。给药组手术后也出现紧张，但第2，3天食量及活动量均未与正常组相比有明显变化；随着实验天数的增加，正常组小鼠体重呈稳步增长趋势,手术组及各给药组小鼠,其体重与正常组比拟无显著性差异。给药4d后,模型组小鼠出现精神萎靡,活动缓慢,聚堆,蜷卧,嗜睡,尾色苍白,给药组小鼠行为活动趋于正常。RB、B、Hgb测试结果见表1。EP测试结果见图13。表1RB，B及Hgb测试结果略转贴于论文联盟.ll.4讨论贫血通常是指外周血中血红蛋白浓度、红细胞计数和或红细胞压积低于同年龄和同性别正常人的最低值，其中以血红蛋白浓度低于正常值最为重要。按中医理

6、论解释，血虚当以补血为治疗手段，但血虚易产生血行凝滞现象，所以加活血行气药；血虚还应滋阴，通过配伍到达补血效果。现代研究说明，处方中熟地3、当归4单用均有补血作用，而升麻、白芍、生地、黄芪、柴胡、牡丹皮、川芎均是按中医理论参加的药物：升麻、川芎入气分，柴胡沟通表里，黄芪补气，生地、白芍、牡丹皮滋阴。现有资料显示，黄芪甲苷等成分有补血功能5；升麻有降血压及扩张外周血管功能6；白芍有抑制血小板聚集和镇痛的作用7；柴胡有降低血压及镇痛、镇静作用8；牡丹皮有保护心肌,防止血小板聚集等作用9,均对失血后引起的某些病症有改善。从实验结果来看,三黄补血汤全方有明显的增加红细胞和白细胞数量及血红蛋白含量的效果

7、，使血清EP程度增高。结果显示三黄补血汤有明显的疗效。【参考文献】1明张洁.仁术便览.北京：人民卫生出版社，1985：173.2陈奇.中药药理实验方法.北京：人民卫生出版社，1994：206.3冯雪梅，吕艳，祝彼得，等.熟地和制首乌多糖对贫血小鼠骨髓有核细胞数和细胞周期的影响J.四川中医，2022，24(6):71.4陈慧珍.当归的研究进展J.海峡药学，2022，208：38.5古今.当归补血汤中黄芪对小鼠造血功能的影响J.中国中医根底医学杂志，2022，15(3)：215.6林玉萍，邱明华，李忠荣.升麻属植物的化学成分与生物活性研究J.天然产物研究与开发，2002，14(6):58.7陈四平，张浩，李相冲，等.中药白芍的研究进展J.承德医学院