壳聚糖絮凝法精制红花水提液工艺的研究

1、壳聚糖絮凝法精制红花水提液工艺的研究【摘要】目的优选壳聚糖精制红花水提液的工艺。方法采用L934正交设计表，以羟基红花黄色素A得率为指标，应用高效液相色谱法测定含量，对壳聚糖精制红花工艺进展优化。结果最正确工艺为A3B21，即将药液浓缩至生药药液16，壳聚糖参加量为0.4l/g生药，放置时间6h。结论壳聚糖絮凝法澄清效果好，经济实用，可用于红花水提液的精制。【关键词】壳聚糖；红花；高效液相色谱法；正交实验Abstrat：bjetiveTptiizerefineentfarthaustintriusL.byhitsanflulatin.ethdsApplyingtheL934frthgnalde

2、signandhighperfraneliquidhratgraphy(HPL),iththeyieldratefhydrxysaffleryellA.astheindex.ResultsTheptiizednditinasA3B21,hihasthatediinalherb:physiliqur=1:6,theadditinfhitsanas0.4l/gediinalherb,setting6hurs.nlusinhitsanflulatinethdaseffetiveandenifrthelarifiatinandanbeusedintherefineentfarthaustintrius

3、L.Keyrds：hitsan;arthaustintriusL.;HPL;rthgnaldesign脑得生由三七、红花、葛根、川芎、山楂5味中药材组成，其中红花为菊科植物红花arthaustintriusL的枯燥花，现代药理研究说明，它对心血管系统有广泛而显著的作用，其中查耳酮苷类化合物羟基红花黄色素A为其活血化淤作用的主要有效成分。采用传统精制工艺，需要消耗大量乙醇，消费本钱高，且有效成分易损失，影响制剂的疗效1。为了在纯化过程中尽量保存浸出液的有效成分，采用正交设计法，以羟基红花黄色素A得率为指标对红花提取液精制工艺进展了研究，优选出壳聚糖絮凝法的最正确工艺。1仪器与试药1.1仪器高效液

4、相色谱仪aters2695/2996/Eper色谱系统；电子分析天平(上海梅特勒-托利多公司)；恒温水浴锅天津市泰斯特仪器；离心沉淀机上海医用分析仪器厂。1.2试药红花药材购于哈尔滨市医药药材公司，经黑龙江中医药大学生药教研室王振月教授鉴定为菊科植物红花arthaustintriusL的枯燥花。对照品：羟基红花黄色素A中国药品生物制品检定所，批号：202201；壳聚糖上海伟康生物制品，型号XNJ-1；甲醇为色谱纯；水为超纯水；其余试剂为分析纯。2方法与结果2.1羟基红花黄色素A含量测定22.1.1色谱条件色谱柱：Krasil184.6200,5；流动相：0.7%磷酸-甲醇-乙腈751510；流

5、速：1.0l/in；检测波长：403n；柱温：30。2.1.2对照品溶液的制备精细称定60减压枯燥至恒重的羟基红花黄色素A对照品适量，加水溶解，使成0.078g/l的溶液，备用。2.1.3样品溶液的制备精细汲取精制后的供试品溶液1l，用水定容至25l容量瓶，待含量测定用。转贴于论文联盟.ll.2.1.4标准曲线取对照品溶液0.078g/l，通过系统全自动进样器，分别进样1，2，4，8，16l,在上述色谱条件下,测得峰面积。以峰面积Y为纵坐标,对照品进样量X(g)为横坐标,绘制标准曲线。得回归方程:Y=2.82106X2.53104，r0.9999(n=5)。线性范围为0.0781.248g。2

6、.1.5精细度实验精细汲取上述对照品溶液10l，连续进样5次，测定峰面积值的RSD为0.2%n=5。2.1.6重复性实验精细汲取同一供试品溶液10l，连续进样5次，测定峰面积值的RSD为0.4%n=5。2.1.7稳定性实验取同一供试品溶液10l，分别于0，2，4，8，12，24h各进样1次，测定峰面积值的RSD为0.4%n=6。2.1.8加样回收率实验取含量的样品，精细参加对照品溶液，依法制成供试液,按标准曲线法进展测定，计算回收率，结果见表1。表1加样回收率测定结果略2.2壳聚糖絮凝法精制工艺2.2.1壳聚糖溶液的制备称取1g壳聚糖，溶于1醋酸溶液100l，得到1壳聚糖醋酸溶液，备用。2.2

7、.2供试品溶液的制备取红花药材200g，加适量水潮湿1h，药粉分次装入渗漉筒内，浸渍24h，加至10倍体积水，以一定流速渗漉，搜集渗漉液定容于2000l容量瓶。从2000l药材提取液中取27份，每份30l约含3g生药，按正交实验设计表进展试验，50恒温水浴放置后，离心4000r/in，取上清液过滤后，取适量体积分别测定含量及固形物量。2.2.3正交实验结合文献报道，对影响提取效果的主要因素药液浓缩比例、壳聚糖参加量及放置时间进展考察，每个因素选择三个程度进展实验，因素程度见表2。表2因素程度略根据因素程度表，选择了L934正交表，以羟基红花黄色素A得率为考察指标，实验结果及方差分析见表34。表

8、3正交实验设计及结果分析略表4方差分析略由直观分析及方差分析可知,影响精制效果的因素大小依次是AB,且A，B，均具显著性，最正确工艺为A3B21，即将药液浓缩至生药药液16，壳聚糖参加量为0.4l/g生药，放置50恒温水浴6h后离心过滤即得。经实验验证,按最正确精制工艺条件所得的红花黄色素A占固形物含量为3.43，与正交实验表中A3B21精制工艺的得率根本一致。3讨论壳聚糖的作用机制是利用电荷和大分子的架桥作用，去除溶液中的不溶性颗粒和鞣质、蛋白质、树脂等杂质，得到澄清的溶液。壳聚糖絮凝法不需要任何特殊设备，应用方便，而且壳聚糖本身价格低廉。该工艺不会减少溶液中可溶性总固体物，能有效地进步有效成分的含量，保证制剂的疗效，而且制剂稳定性好，所以在中药水提液的精制工艺中有良好的应用前