高三生物一轮复习微专题课件：同位素标记法的应用归纳

1、同位素标记法的应用归纳知识整合同位素标记法是用示踪元素标记化合物,根据化合物的放射性确定物质的转移途径或对有关的化学反应进行追踪,也称为同位素示踪法。1.噬菌体亲子代个体与细菌之间的同位素标记关系标记物DNA蛋白质亲代噬菌体32P35S培养细菌31P32S子代噬菌体32P、31P32S(1)该实验不能标记C、H、O、N,因为这些是DNA和蛋白质共有的元素,否则无法将DNA和蛋白质区分开。(2)35S(标记蛋白质)和32P(标记DNA)不能同时标记在同一噬菌体上,因为放射性检测时只能检测到放射性存在的部位,不能确定是何种元素的放射性。2.高中生物其他常用同位素示踪举例放射性元素标记物质研究内容结

2、论(结果)14CCO2暗反应中碳的转移途径发现卡尔文循环3H亮氨酸分泌蛋白的合成分泌 过程核糖体内质网高尔基体细胞膜18OH2O和CO2光合作用中O2的来源产生的O2来自H2O,而不是CO215NDNADNA的复制DNA半保留复制除了同位素标记法,荧光标记法也是常用的标记方法。如绿色荧光标记的小鼠细胞和红色荧光标记的人细胞融合实验、绿色荧光标记的痢疾内变形虫吞噬紫色荧光标记的人体细胞、荧光标记单克隆抗体等。命题探究1.(2021江苏扬州月考)在探索遗传物质的过程中,赫尔希和蔡斯做了T2噬菌体侵染细菌的实验,其中一组实验如下图所示(用32P标记的噬菌体侵染普通大肠杆菌培养物),有关叙述正确的是(

3、 )A.若不经过步骤操作,对该组实验结果无显著影响B.若继续分离出子代噬菌体,其中大部分会含有32P放射性C.若沉淀中含有较强放射性、上清液中几乎不含放射性,即证明遗传物质是DNAD.若中培养液里含有32P,则子代噬菌体的DNA、RNA分子中均会带有放射性A2.如果用3H、15N、35S标记噬菌体后,让其侵染细菌(无放射性),下列分析正确的是( )A.只有噬菌体的蛋白质被标记了,DNA没有被标记B.子代噬菌体的外壳中可检测到3H、15N、35SC.子代噬菌体的DNA分子中可检测到3H、15ND.子代噬菌体的DNA分子中部分含有3H、15N、35SC3.为探究DNA复制方式,生物学家将15N标记

4、的大肠杆菌,放到只含14N的培养基中培养,通过CsCl密度梯度离心技术分别将细胞分裂产生的第一代和第二代细胞中的15N-DNA、14N-DNA及15N/14N-DNA分离开来。因为DNA能够强烈地吸收紫外线,所以用紫外光源照射离心管,透过离心管在感光胶片上记录DNA带的位置就可以显示出离心管内不同密度的DNA带。下列相关说法正确的是( )A.因为15N具有放射性,所以感光胶片上可以记录DNA带的位置B.根据第一代只出现一条居中的DNA条带,可以排除DNA是全保留复制C.大肠杆菌在进行DNA分子复制时需要用到解旋酶、DNA聚合酶和限制酶D.DNA聚合酶是一种能调节DNA分子复制的信息分子B4.(

5、2021江苏扬州月考)研究人员将含14N-DNA的大肠杆菌转移到15NH4Cl培养液中,培养24 h后提取子代大肠杆菌的DNA。将DNA热变性处理,即解开双螺旋,变成单链;然后进行密度梯度离心,管中出现的两种条带分别对应图中的两个峰,则大肠杆菌的细胞周期为( )A.4 hB.6 hC.8 hD.12 hC5.荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针,与染色体上对应的DNA片段结合,从而将特定的基因在染色体上定位。请回答下列问题。(1)DNA荧光探针的制备过程如图1所示,限制酶随机切开了核苷酸之间的 键从而产生切口,随后在DNA聚合酶作用下,以荧光标记的 为原料,合成荧光标记的DNA探针。

6、答案:(1)磷酸二酯脱氧核苷酸5.荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针,与染色体上对应的DNA片段结合,从而将特定的基因在染色体上定位。请回答下列问题。(2)图2表示探针与待测基因结合的原理。先将探针与染色体共同煮沸,使DNA双链中 键断裂,形成单链。随后在降温复性过程中,探针的碱基按照原则,与染色体上的特定基因序列形成较稳定的杂交分子。图中两条姐妹染色单体中最多可有条荧光标记的DNA片段。答案:(2)氢碱基互补配对45.荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针,与染色体上对应的DNA片段结合,从而将特定的基因在染色体上定位。请回答下列问题。(3)A、B、C分别代表不同来源的一个染色体组,已知AA和BB中各有一对同源染