DB12-T650-2016转基因植物及其产品成分筛查Cry1AbCry1Ac试纸条法

1、ICS 67.050B20 备案号：DB12天 津 市 地 方 标 准DB12/T 6502016转基因植物及其产品成分筛查Cry1 Ab/Cry1 Ac 试纸条法Screening method for genetically modified plantCrylAb/CrylAc test strip2016-11-01 实施2016-09-27 发布天津市市场和质量监督管理委员会发布DB12/T 6502016 本标准按照GB/T 1. 12009给出的规则起草。本标准由天津市农村工作委员会提出o本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、中国农业科学院生物技术研究所、天 津市东

2、丽区产品质量监督检验所。本标准主要起草人：兰青阔、李亮、黄凤军、刘雪岩、赵新、宛煜嵩、易萌、陈锐、徐石勇。 本标准2016年9月首次发布。转基因植物及其产品成分筛查Cry1 Ab/Cry1 Ac 试纸条法1范围本标准规定了转基因植物及其产品成分GylAb/CrylAc试纸条法的术语和定义、检测方法、结果判 断。本标准适用于表达CrylAb/CrylAc蛋白的转基因大豆MON87701,转基因玉米MON810, Btll、 Btl76,转基因水稻TT51-1、克螟稻、科丰六号，转基因棉花MON531、MON15985等主要植物及其初 级加工产品中CiylAb/CrylAc蛋白的试纸条筛查。2规范

3、性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理转基因快速检测试纸应用双抗体夹心免疫层析的原理，样本中的抗原在侧向移动的过程中与标记的 特异性单克隆抗体1结合，形成抗原-抗体复合物，继续向前方流动和NC膜检测线上特异性单克隆抗体2 结合形成双抗体夹心复合物，并显色。如果样本中转基因作物含量大于5%,控制线（Control Line,简 称C）和检测线（Test Line,简称T）显色，结果为阳性；反之，控制线（C）显色，检

4、测线（T）不显 色，结果为阴性。4仪器设备及试剂1仪器设备匀浆器；天平；移液枪；振荡器；离心管等。4.2试剂提取缓冲液；实验用水为重蒸馅水或符合GB/T 6682规定的一级水等。5方法步骤5.1样品的采集和预处理使用离心管盖夹取或者打孔的方式，采集植物新鲜组织样品生长点附近约3 cm幼嫩组织100 mg-200 mg,置于2 mL离心管中。作物籽粒可使用铁钳夹碎，取较碎部分置于2 mL离心管中。2样品研磨加1 mL纯水或提取缓冲液于离心管中，使用一次性研磨杵手工研磨或电钻研磨，确保上层液体体 积应至少占总体积三分之一。对于混合样品，应称重后使用大容量研磨仪器研磨至100目大小粉末，然后加入水或提取缓冲液。5. 3涡旋震荡在振荡器上用力震荡30 s-1 min,确保样品充分混匀。5.4试纸条检测震荡后，静置1 min待固体物质沉淀分层，尽快从包装中取出试纸条，按照箭头方向插入离心管， 开始计时。5.5读取结果5-10 min底色褪去后，将试纸条水平放置于观察者正面读取结果。5. 6结果判断测试结果分为阴性、阳性和无效三种。阴性（一）：控制线C显色，检测线T不显色；阳性（+