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文档简介
1、关于单克隆抗体第一张,PPT共二十七页,创作于2022年6月发明单克隆抗体技术Nobel Prize in 1984第二张,PPT共二十七页,创作于2022年6月抗体发展的三个阶段单克隆抗体基因工程抗体多克隆抗血清第三张,PPT共二十七页,创作于2022年6月传统抗血清抗 原免 疫所有抗体混合123412341234脾 脏淋巴結B 細胞第四张,PPT共二十七页,创作于2022年6月细胞工程杂交瘤技术鼠单抗人单抗大鼠小鼠产量高、操作比小鼠麻烦 少用易操作、多用HAMA反应人人杂交瘤人B细胞、骨髓瘤细胞融合人鼠杂交瘤人B细胞、鼠骨髓瘤细胞融合杂交瘤制备人单抗的问题:染色体易丢失、抗体分泌不稳定第五
2、张,PPT共二十七页,创作于2022年6月美国已上市16种单克隆抗体药物 2002年销售额 29亿美元 2005年 90亿美元我国的单克隆抗体药物市场还处于起步阶段。第六张,PPT共二十七页,创作于2022年6月抗体药物销售趋势图第七张,PPT共二十七页,创作于2022年6月抗体 是对其抗原有极强专一性 的魔弹 或 巡弋飞弹研 究以免疫转印法检测 特定抗原医 疗以毒素连结抗体攻击 病变細胞检 验以 ELISA 侦测特定 病原体第八张,PPT共二十七页,创作于2022年6月SDA批准进入临床的治疗用单抗抗T细胞免疫毒素抗C-ALL免疫毒素131I-抗肝癌单克隆抗体抗人CD25单克隆抗体抗乙脑单克
3、隆抗体抗流行性出血热抗体抗人CD3单克隆抗体抗人IL-8单克隆抗体第九张,PPT共二十七页,创作于2022年6月抗体治疗疾病的机制抗原失活免疫效应细胞吞噬抗原表面弱化易受补体破坏第十张,PPT共二十七页,创作于2022年6月单抗研发的演变历程鼠单抗100% 鼠源OKT-3PanorexZevalin鼠/人嵌合单抗(66-75 % 人源)ReoPro, RituxanRemicadeSimulect人源化单抗(90-95 % 人源)Zenapax, Mylotarg, Herceptin, CampathSynagis100% 人源 第十一张,PPT共二十七页,创作于2022年6月抗体攻击病毒第
4、十二张,PPT共二十七页,创作于2022年6月凝集细菌第十三张,PPT共二十七页,创作于2022年6月抗 SARS 的单抗SARS-CoV第十四张,PPT共二十七页,创作于2022年6月抗体生成技术第十五张,PPT共二十七页,创作于2022年6月Epitope, Antigenic determinant抗原決定基 一个抗原分子上可能有数个抗原決定基 每個 抗原決定基 至少誘生一種專一性抗体 蛋白质性 抗原決定基 含有六个以上氨基酸第十六张,PPT共二十七页,创作于2022年6月1 多克隆抗血清对健康人用疫苗进行主动免疫,免疫前(a)和免疫后10天 (b)分别采血并对血清蛋白进行凝胶电泳分析。
5、免疫前血清中的g 球蛋白条带较宽,免疫之后则相对集中。Bruton 氏病患者血清蛋白中的 球蛋白条带缺失(c)。a1 a2bg白蛋白球蛋白(c)(a)(b)第十七张,PPT共二十七页,创作于2022年6月 绵羊红细胞的制备流程图 摇动15-20min 4可保存3周 取适量 NS洗涤3次2000r/min 10minNS稀释至 25% 第十八张,PPT共二十七页,创作于2022年6月 细菌细胞抗原的制备流程图液体培养或 斜面培养 3724h100水浴 22.5h 杀菌无菌试验NS稀释成810亿/mlO菌体抗原第十九张,PPT共二十七页,创作于2022年6月杂交瘤技术过程第二十张,PPT共二十七页
6、,创作于2022年6月第二十一张,PPT共二十七页,创作于2022年6月可生产有用抗体的 淋巴細胞 若与 癌细胞融合,则形成稳定而可培养的细胞株。癌细胞可培养生长浆细胞B cell可分泌抗体融合瘤HybridomaYYYYYYYYYYYYYYYYYY细胞融合两组染色体混在一起也可以培养生長产生专一性抗体一個 B cell 只产生一种抗体第二十二张,PPT共二十七页,创作于2022年6月1234mmmm12341234单抗细胞融合取出脾細胞+癌細胞各抗体分开第二十三张,PPT共二十七页,创作于2022年6月(3) 鼠单抗人源化将小鼠Ig基因敲除,转染人Ig基因,在小鼠体内产生人Ab,再经杂交瘤技术,产生大量完全人源化抗体恒定区人源化人-鼠嵌合抗体可变区人源化人改型抗体用抗体库技术进行人源化第二十四张,PPT共二十七页,创作于2022年6月鼠单抗人源化第二十五张,PPT共二十七页,创作于2022年6月Pr 鼠VH 人 CH Pr 鼠VL 人 CL免疫球蛋白基因载体的构建H链嵌合载体L 链嵌合载体共转染细胞启动子人-鼠嵌合抗体基因工程改造策略 第二十六张,PPT共二十七页,创作于2022年6月定义:指利用基因工程技术,将人抗体可变区(V)中互补决定簇(CDR)序列改换成鼠源单抗CDR序列。重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体。RAb亦叫
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