包载甲氨蝶呤的聚乙交酯丙交酯纳米颗粒的制备与体外释药机制研究

1、包载甲氨蝶呤的聚乙交酯丙交酯纳米颗粒的制备与体外释药机制研究【摘要】目的制备包载甲氨蝶呤TX的聚乙交酯丙交酯PLGA纳米颗粒并研究体外释药机制。方法采用溶剂挥发法制备包载TX的PLGA纳米颗粒，对其形貌、大小进展表征，测定体外释药曲线，并采用药学模型进展拟合。结果纳米颗粒平均粒径为175.9n，具有明显的缓释作用，释药行为最符合双相动力学方程。结论该研究为开发TX的新剂型提供了实验根据。【关键词】甲氨蝶呤；聚乙交酯丙交酯；纳米颗粒；拟合Abstrat：bjetiveTprepareethtrexate(TX)ladedply(lati-glyli)(PLGA)nanpartilesandinv

2、estigatetheehanisnreleaseinvitr.ethdsTX-ladednanpartileserepreparedbyeulsinslventevapratinethd.Therphlgyandsizefnanpartileserestudied,andinvitrreleaseurveaseasured.rever,thereleasedataerefittedithdifferentatheatialdels.ResultsTheeansizefnanpartileasas175.9n,andthebtainednanpartilesshedevidentlysusta

3、inedreleaseeffet.ThereleasebehavirfTXladednanpartilesasellfittedtthedublephasedynaiequatin.nlusinTherkprvidesanexperientbasisfrthedevelpentfnvelidealadinistratinfTX.Keyrds：ethtrexate;Ply(lati-glyli);Nanpartiles;Fit甲氨蝶呤TX是一种抗代谢类抗肿瘤药物，对乳腺癌、急性白血并骨肉瘤等都具有显著的疗效，但其有引起骨髓抑制细胞下降，肝肾功能损伤等毒副作用，甚至危及患者生命1,2。为降低TX的

4、毒副作用，进步药物疗效，本研究以生物可降解材料聚乙交酯丙交酯PLGA为材料，制备了包载TX的PLGA纳米颗粒，考察其在PBS缓冲溶液的释放行为，并采用多种数学模型拟合体外实验数据，确定最正确的拟合模型。1器材ZetaSizer3000HS型激光粒度分析仪英国alvern公司；SPA-400原子力显微镜日本精工公司；v130探头式超声处理机美国Snisaterials公司；UV-1600紫外-可见分光光度计北京瑞利。聚乙交酯丙交酯PLGA，成都航利生物材料研究所；聚乙烯醇湘中精细化学品厂。甲氨蝶呤TX，浙江万马药业公司。2方法2.1纳米颗粒的制备与表征参照文献方法3，加以改良，称取TX5g和50

5、gPLGAL:G=50:50，L:G为共聚物PLGA中乳酸Latide和乙醇酸Glylide单体的质量比溶于2l二氯甲烷，滴参加8l质量百分比为2.5%聚乙烯醇水溶液中，在冰浴下用探针式的超声波超声10in。减压除去二氯甲烷，3000r/in离心别离，所得的沉淀用超纯水洗涤3次，制得包载TX的PLGA纳米颗粒。取少许颗粒加水混匀稀释，取样滴于云母片上，自然枯燥后，利用原子力显微镜表征纳米颗粒形貌。载药的纳米颗粒的平均粒径、粒度分布以及Zeta电位通过alvrenZetasizer3000HS分析仪测定。2.2纳米颗粒的体外释放冻干包载TX的PLGA纳米颗粒，准确称取冻干粉末10g，溶于3l氯仿

6、中，然后参加7l甲醇，沉淀聚合物，10000r/in离心10in，以分光光度法测得上清液中TX的含量。精细称取10g冻干纳米颗粒置于透析袋中，参加PBS缓冲溶液pH=7.45l，将透析袋置于50lPBS缓冲溶液中，保持温度37，每隔一定时间取1l同时补充等量同温介质，用分光光度法测定各时间点的TX的含量，计算药物的释放率，绘制释药曲线。2.3模型模拟法制剂的体外释放数据采用表1中的数学模型进展拟合，以推测释药机理46。表1数学模拟模型略转贴于论文联盟.ll.3结果3.1纳米颗粒的特性表征本研究制备的包载TX的PLGA纳米颗粒为浅棕色的物质，Zeta电位为-18.7V，纳米颗粒的原子力图见图1a

7、，制备出来的纳米颗粒都为较完好的球形，分散性好，颗粒粒径较均匀。粒径分布如图1b所示，颗粒的平均粒径为175.9n，粒径分布范围为18225n，其中小于51n占99%，颗粒大小根本上与原子力图吻合。3.2体外药物释放曲线包载TX的PLGA纳米颗粒的体外释放如图2所示，该纳米颗粒的体外释放存在两相，前4h处于快速释放期，释放的TX累积量到达参加总量的42.9%，在该阶段，存在于颗粒外表的药物较快地释放出来；此后进入缓慢释放期，随后的68h释放量相当于药物总量的36.9%，存在于颗粒中的药物逐渐释放出来。3.3模型拟合R2为决定系数，是判断回归方程拟合度的重要指标。R2越趋向于1，拟合的效果越好4

8、，5。由表2可见，包载TX的PLGA纳米颗粒的释药过程采用双相动力学方程拟合得到的R2为0.9957，最接近1。说明整个释药过程分为两相，前期为快速释放相，后期为缓慢释放相，此释药特点符合缓释原理。表2释放模型拟合结果略4结论本文以生物相容性好、可降解材料PLGA为载体，采用溶剂挥发法，制备了新的TX纳米药物制剂，其制备工艺简便易行。包载TX的PLGA纳米颗粒的颗粒呈典型的球形，粒径较均匀，分散性好。体外释药研究说明，纳米颗粒显示了显著的缓释作用，采用双相动力学方程拟合效果最正确。【参考文献】1NrihikTsuhiya,TakaitsuInue,ShintarNarita,etal.Drug

9、RelatedGenetiPlyrphissAffetingAdverseReatinstethtrexate,Vinblastine,DxrubiinandisplatininPatientsithUrthelialanerJ.TheJurnalfUrlgy,2022,180(6):2389.2张剑锋,魏东芝,周雄,等.甲氨蝶呤-聚乙二醇偶联物的合成及其体外抗肿瘤活性J.药学学报，2022，426：607.3HuJH,JhnstnKP,illiasR.Nanpartileengineeringpressesfrenhaningthedisslutinratesfprlyater-slubledrugsJ.DrugDevelpentandIndustrialPharay,2022,30(3):233.4朱颖,程宁,王雨青,等.硫酸沙丁胺醇脉冲微丸释放特性的模型拟合和比拟J.中国医药工业杂志，2022，371：20.5huD,ShaF.Exainatinfrelatinshipbeteeni