医学免疫学课件：抗原抗体相互作用及其制备

1、抗原抗体相互作用及其制备23 单克隆抗体与基因工程抗体的制备 1 抗原抗体反应2 免疫原和抗血清制备学习内 容第一章 抗原抗体反应抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。体内杀菌、溶菌、调理、中和毒素免疫病理损伤超敏反应、免疫性疾病等体外：凝集、沉淀、溶血反应等包括本章讲述的抗原抗体反应，主要是指抗原和抗体在体外结合所表现的反应第一节、抗原抗体反应的原理高度互补紧密接触产生结合力抗原抗体带电离子异性相吸静电引力分子极化范德华引力形成氢键氢键引力形成疏水基团 疏水作用力作用最小最具特异性作用最大抗原抗体结合抗原抗体结合力1、静电引力概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基

2、团之间相互的引力，又称库伦引力。引力的大小与两个相互作用基团间的距离的平方成反比；平均键能约为20.9kJ/mol。2、范德华引力概念：抗原和抗体相互接近时，由于分子的极化作用而出现的引力。 结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方成反比，键能约为4.212.5kJ/mol 。 作用力最小 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。 3、氢键结合力供氢体：COOH、NH2和OH 受氢体：氧、氮氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。最具特异性（必须供氢体和受氢体互补才能实现氢键的结合）4、疏水作用力概念：两个疏水基团在

3、水溶液中相互接触时，由于对水分子排斥而趋向聚集的力。 抗原表位与抗体上的结合点靠近，互相间正、负极性消失，亲水层立即失去。 结合力最强，约占总结合力的50。抗原抗体结合力示意图抗原抗体氢键结合力 ONONHH静电引力-+范得华力-+-+-+疏水作用力排斥的水疏水胶体转化当抗原与抗体结合使表面电荷减少，水化层变薄，失去亲水性能，抗原抗体复合物成为疏水胶体NaCl可见反应在电解质作用下，中和胶体粒子表面的电荷，使各疏水胶体之间靠拢，形成可见的抗原抗体复合物亲水胶体转化为疏水胶体亲水胶体血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体。 11抗原抗体结合强度指标平

4、衡常数 K=K1/K2 （K1 结合常数，K2 解离常数）K值越大，亲和力越高， 与抗原的结合越牢固亲和性(affinity)：一个抗体结合点与一个抗原表位间的结合强度。12亲合力与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效抗原表位数目有关。亲合力(avidity)：指整个抗体分子与抗原表位之间结合的强度。13第二节、抗原抗体反应的特点特异性 可逆性比例性 阶段性一、特异性14概念：抗原与抗体结合反应的专一性15决定因素：由抗原表位和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的应用：由于抗原抗体反应具有高度特异性，故可用已知的抗原(或抗体)检测未知的抗体（或抗原）。交叉反应：两种不同的抗原分子具有部分相同或

5、相似结构的抗原表位时，可与彼此相应的抗体反应。外斐氏反应：用与立克次体有相同抗原表位的变形杆菌抗原进行凝集试验，用于诊断斑疹伤寒。16二、可逆性17概念：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性 。原因：抗原抗体的结合是分子表面的非共价键结合，因此形成的复合物不牢固。决定因素:(1)抗体与相应抗原的亲合力亲合力越高，结合越牢固，越不易解离 (2)环境因素对复合物的影响 pH、离子强度应用：亲和层析18三、比例性以絮状沉淀实验为例，受抗原抗体比例性的影响非常明显。根据所形成的沉淀物及抗原抗体比例关系绘制反应曲线。19概念：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系

6、1:21:41:81:161:321:641:128各管抗原倍比稀释加入抗血清各管抗体量不变振摇 混匀、37孵育沉淀量不同出现沉淀量最多的管为最适比例管 絮状沉淀试验絮状沉示意图淀AgAbAg22最适比(optimal ratio)：是指形成沉淀物最多，上清液清晰，几乎无游离抗原或抗体的抗原抗体浓度比。等价带(equivalencezone)：形成沉淀物最多的抗原与抗体分子比例合适的范围。带现象：在等价带前后，由于抗体和抗原过量，形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原的现象。 前带(prozone) 抗体过量时称为。 后带(postzone）抗原过量时称为。一组概念四、阶段性23特异性

7、结合两个阶段可见反应阶段数秒数分钟， 肉眼不可见数分数小时肉眼可见第三节 抗原抗体反应的影响因素一、抗原抗体自身因素（一）抗原理化性状：颗粒性抗原、可溶性抗原等出现不同抗原抗体反应抗原表位数量和种类：单价抗原 24（二）抗体25来源R型抗体 ：等价带宽， 易出现可见反应。H型抗体：等价带窄，易出现前带或后带现象单克隆抗体:不宜用于凝集和沉淀反应。浓度：相对抗原而言，比例要和适，故实验前需滴定，以求最适抗原与抗体比例。特异性与亲合力：关键因素，选择特异性与亲合力高的Ab。二、环境因素1、电解质：中和胶体表面电荷，破坏水化层，使抗原抗体聚集。常用电解质：0.85%NaCl溶液、各种缓冲液。电解质浓

8、度不宜过高，否则会出现盐析现象。2、酸碱度：Ag、Ab多为蛋白质，具两性电离特性，有其故有的PI , pH过高或过低均可影响Ag、Ab反应。一般：pH69为宜，避免自凝现象。3、温度：一般抗原抗体反应以1540为宜，最适温度为37。4、适当的振摇或搅拌可加强抗原抗体分子的结合。26第四节 抗原抗体反应的类型1.沉淀反应2.凝集反应3.补体参与的反应4.中和反应5.标记免疫反应27反应类型实验技术结果判断凝集反应直接凝集试验观察凝集现象间接凝集试验同上抗球蛋白试验同上沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与的反应补体溶血试验观察测定溶血现象补体结合试验同上

9、反应类型实验技术结果判断中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒素中和试验检测外毒素毒性标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免疫技术检测金颗粒沉淀思考题1什么是抗原抗体反应？ 2抗原抗体的结合力有哪些？3抗原抗体反应有哪些特点？ 4如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应？5什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？6如何理解抗原抗体反应的亲和性和亲合力？7抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例？ 8抗原抗体反应有哪些影响因素？9基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些？30第二章 免疫原和抗血清制备31免疫原(及佐剂)

10、的制备免疫动物试血抗血清的保存抗血清的鉴定采血收集血清抗血清的纯化第一节 免疫原的制备颗粒性抗原细胞、细菌、寄生虫可溶性抗原蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、核酸半抗原多糖、多肽、类脂、核酸32免疫原：指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。一、颗粒性抗原的制备33细胞抗原：绵羊红细胞 细菌抗原：菌体抗原、鞭毛抗原 寄生虫体抗原：虫卵特点：制作方法较为简单悬液呈浑浊状或乳浊状免疫时多用静脉注射，不需佐剂颗粒性抗原绵羊红细胞的制备流程图 摇动15-20min 4可保存3周 取适量 NS洗涤3次2000r/min 10minNS稀释至 106个/ml 细菌菌体抗原的制备流程图液体或固体培养基

11、3724h100水浴 22.5h 杀菌无菌试验NS稀释成810亿/ml菌体抗原二、可溶性抗原的制备36来源: 组织、细胞或血液，其成分较复杂，免疫动物前需要进行提取和纯化。蛋白质糖蛋白脂蛋白核酸可溶性抗原（一）可溶性抗原的粗提1、组织匀浆的制备37新鲜或低温保存器官或者组织处理粉碎高速组织捣碎机研磨法离心3000r/min，10分钟沉淀上清1万2万转/分，20到30分钟上清液中含有可溶性抗原2、细胞的破碎38(1)反复冻融法-20冻结，然后室温融化（组织细胞） (2)超声破碎法超声波，120kHz（组织细胞） (3)酶处理法溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶 （微生物） (4)表面活性剂处理法SDS、去

12、氧胆酸钠、二乙基十六烷基溴 （细菌、核酸）（二）可溶性抗原的提取和纯化39盐析法有机溶剂沉淀法聚合物沉淀法核酸沉淀法选择性沉淀法层析法超速离心法凝胶层析法离子交换层析法亲和层析法电泳法 等电聚焦电泳差速离心法密度梯度离心法1、超速离心法40低速离心中速离心高速离心超高速离心A物质B物质C物质D物质上清液1上清液2上清液3差速离心法：低速和高速离心交替进行，用于分离大小差别较大的抗原颗粒 。超速离心法只适用于少部分大分子抗原（如IgM、C1q、甲状腺球蛋白）及某些比重较小的抗原（如载脂蛋白A、B），不适于中、小分子量蛋白质。41密度梯度离心法：利用各颗粒在梯度介质中沉降速度不同，使具有不同沉降速

13、度的颗粒,处于不同密度的梯度层内，达到彼此分离的目的。2、选择性沉淀法42盐析法：在蛋白质溶液中加入中性盐后，由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，可使蛋白质分子周围的水分层减弱乃至消失。同时，由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷大量被中和，又导致蛋白质溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀有机溶剂沉淀法：有机溶剂能降低溶液电解常数，增加蛋白质分子间的静电引力，减弱蛋白质水化膜，破坏蛋白质分子的稳定性，导致蛋白质沉淀析出。乙醇、丙酮。聚合物沉淀法：聚乙二醇核酸沉淀法：硫酸鱼精蛋白、氯化锰、链霉素。43凝胶层析法：利用凝胶的多孔网状结构，大分子在凝胶颗粒间很快通过，小分子进入网孔，难于洗脱，将

14、抗原按分子量大小依次分离。3、层析法44特点：是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。 45离子交换层析法：利用带离子基团的纤维素或凝胶，吸附交换带相反电荷的蛋白质抗原。当梯度洗脱时，逐步增加流动相的离子强度，使加入的离子与蛋白质竞争纤维素上的电荷位 置，从而使不同等电点的蛋白质分别与离子交换剂解离，达到分离纯化的目的。46亲和层析法：利用生物分子间专一亲合力的特异性和可逆性进行分离的技术。47电泳法：各种蛋白质在同一pH条件下，因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同从而得以分开。等电聚焦电泳:利用一种两性电解质为载体，电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度，当带

15、一定电荷的蛋白质在其中泳动时，到达各自等电点的pH位置就停止。（三）纯化抗原的鉴定蛋白含量测定：紫外光吸收法、双缩脲法、酚试剂法分子量测定：SDS纯度鉴定：醋酸纤维膜电泳、SDS、毛细管电泳、等电聚焦、高效液相层析免疫活性鉴定：双向免疫扩散、免疫电泳、ELISA48三、人工抗原的制备（一）人工结合抗原的制备载体：用于偶联半抗原的大分子物质。1、载体的选择(1)蛋白质：牛血清白蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白(2)多肽聚合物：多聚赖氨酸(3)大分子聚合物：羧甲基纤维素49半抗原：仅有抗原性而无免疫原性的物质如多糖、多肽、类脂、核酸、某些药物等。2、半抗原与载体的连接(1)物理方法：通过电荷和微孔

16、吸附半抗原，吸附的载体有聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素等 (2)化学方法：利用某些功能基团将半抗原直接连接到载体上带有游离氨基或羧基以及两种基团都有的半抗原：碳二亚胺法、戊二醛法、混和酸酐法、过碘酸氧化法不带氨基和羧基的半抗原：用化学方法使其转变为带有游离氨基或游离羧基的衍生物，再与载体连接 503、半抗原性免疫原的鉴定一个载体分子至少要连接20个以上的半抗原分子，才能有效地刺激免疫动物产生抗体。半抗原与载体的比例测定： 吸收光谱分析法 放射性核素标记半抗原渗入法 51（二）人工合成抗原的制备用化学方法将活化的氨基酸聚合形成多肽。（三）基因工程抗原的制备用分子生物学技术，将编码抗原氨基酸序列的基

17、因克隆并与适当的载体DNA连接，转入受体细胞使之表达，可获得具有免疫原性的重组蛋白。52第二节 免疫佐剂53免疫佐剂：预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质。一、佐剂的种类1. 具有免疫原性的佐剂，如卡介苗、百日咳杆菌、革兰阴性杆菌内毒素 ( 脂多糖 ) 和细胞因子等。2. 非免疫原性佐剂，如氢氧化铝、明矾、液体石蜡、羊毛脂、表面活性剂、人工合成的多聚肌苷酸：胞苷酸（poly I:C）等。福氏佐剂 (Freund adjuvant,FA) 是目前动物免疫中最常应用的佐剂 。 福氏不完全佐剂 ( 石蜡油 + 羊毛脂 ) 福氏完全佐剂 ( 石蜡油 + 羊毛

18、脂 + 卡介苗 ) 54二、佐剂的作用机制改变抗原物理性状，延缓其降解和排除，更有效刺激免疫系统。刺激单核-吞噬细胞系统，增强其处理和提呈抗原的能力。刺激淋巴细胞增殖和分化。改变抗体的产生类型以及诱导迟发型超敏反应。 55第三节 抗血清的制备56抗血清：将免疫原按照一定的免疫程序免疫动物，一定时间后，采集动物血液，分离得到含有抗体的血清，称为抗血清。抗原通常含有多种表位，免疫动物在含有多种抗原表位的抗原刺激下，体内多个B细胞克隆被激活并产生针对某一抗原多种不同表位的抗体，所以抗血清实质上为多克隆抗体。一、免疫动物的选择抗原来源与动物种属的关系 种属差异越远，免疫原性越强 动物个体的选择 适龄、

19、健康、体重符合要求 R型（带宽，诊断）和H型抗血清（带窄，治疗）抗原的性质与动物物种 对蛋白质抗原 , 大部分动物皆适合, 较常用的是家兔与山羊57二、免疫方法免疫原的剂量不能过大或过小，否则产生免疫耐受，中间剂量范围内，免疫原剂量增加可获得高效价抗体 免疫间隔时间第一次和第二次间隔1020天，三次及以后间隔710天，整个免疫过程一般接种5 8次。免疫途径皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、淋巴结 58三、动物采血法免疫动物后，如抗血清抗体效价经测定合格后即可放血。如血清效价不理想可追加免疫 12 次后再行放血。应选择在末次免疫后 57 天及时采血, 否则抗体效价会下降。颈动脉采血法：家兔、绵羊、山

20、羊 心脏采血法： 家兔、豚鼠、大鼠、鸡 静脉多次采血法： 家兔、绵羊、小鼠59第四节 抗血清的纯化一、特异性抗体的纯化去除杂抗体亲和层析法 将杂抗原交联到琼脂糖凝胶4B上，装柱后，将待纯化的抗血清通过亲和层析，杂抗体吸附在柱上，经洗脱液洗脱即得到特异性抗体。吸附法 用双功能试剂将不含特异性抗原的杂抗原混合液交联，制备成固相吸附剂。将此吸附剂加到抗血清中，杂抗体与相应抗原结合而除去。60二、IgG类抗体的纯化盐析法 硫酸铵盐析法提取g球蛋白，粗提离子交换层析法QAE-sephadex在ph7.5时全部带正电，IgG也全部带正电，QAE-sephadex能吸附血清中除了IgG之外的多种蛋白质。亲和

21、层析法葡萄球菌蛋白A（SPA）或纯化抗原交联琼脂糖凝胶的亲和层析柱。61一、抗血清的鉴定1.特异性鉴定 一般用特异性抗原及其相似的抗原与待鉴定抗体进行免疫双扩散试验，如果出现交叉反应，说明有杂抗体存在。2.效价的鉴定根据抗原性质不同，可采取不同抗体效价测定方法。颗粒性抗原可采用凝集试验， 可溶性抗原常用免疫双扩散法。62第五节 抗血清的鉴定和保存3.抗体的纯度鉴定SDSPAGE，若只出现一条蛋白电泳区带说明抗体纯化已达到要求，而出现多条蛋白区带则表明抗血清中混有杂蛋白，必须进一步纯化。4.抗体亲和力鉴定亲和力高则灵敏度好，亲和力测定主要有平衡透析法、酶联免疫法和放射分析法。63二、抗血清的保存

22、4保存：可保存36个月冷冻保存：-20-70，可保存23年真空干燥保存：制成干粉，封装在普通冰箱可保存510年64思考题1什么是免疫原？ 2如何制备可溶性抗原？ 3常用的细胞破碎方法有哪些？ 4连接半抗原的载体有哪些？制备半抗原性免疫原的方法有哪些？5纯化抗原的鉴定包括有哪些内容？ 6什么是免疫佐剂？免疫佐剂有哪些种类？免疫佐剂的作用机制有哪些？7什么是抗血清？什么是多克隆抗体？ 8如何制备抗血清？ 9抗血清的鉴定包括哪些内容？65第三章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术66抗体种类第一代 多克隆抗体（抗血清、多抗原表位）第二代 单克隆抗体（杂交瘤技术、单一抗原表位）第三代 基因工程抗体（基

23、因重组技术、治疗）一、杂交瘤技术1975年，Koehler和Milstein建立第一个B细胞杂交瘤细胞株，并与Jerne一起获得1984年诺贝尔生理与医学奖。G.J.F KoehlerN. K. JerneC. Milstein第一节 杂交瘤技术的基本原理原理：B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代，但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。免疫脾细胞：抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞瘤细胞：小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0、NS-1） 稳定、易传代 不产生免疫球蛋白或细胞因子 有HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转换酶

24、）或TK（胸腺嘧啶激酶）缺陷 能与B淋巴细胞融合 高融合率融合剂：聚乙二醇PEG（1000-4000D、30-50%）选择培养基：HAT（次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶）克隆化培养：有限稀释法、显微操作法、细胞分选仪、软琼脂平板二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存有限稀释法：将细胞悬液连续稀释，最终至96孔板每个培养孔内平均含1个细胞，培养3-4天后，选择能分泌抗体的单个细胞群落阳性孔，反复多次克隆，获得由单个细胞增殖而形成同源性的杂交瘤细胞克隆。杂交瘤细胞的冻存和复苏 “慢冻”：分步冷冻，4 -20 -70液氮 “快融”：取出立即浸入3740水浴中，使其迅速融化、复苏69第二节 单克隆抗体的制

25、备技术一、单克隆抗体的大量制备动物体内诱生法：小鼠腹腔注射降植烷或液体石蜡（免疫抑制剂），1周后腹腔注射杂交瘤细胞，7-10天后出现腹水，无菌采集。体外培养法：5%CO2，37孵育数天，收集上清，离心。但收集的抗体含量不高。二、单克隆抗体的纯化亲和层析法、盐析、凝胶过滤、离子交换层析70三、单克隆抗体的性质鉴定Ig类型、亚类测定：双向免疫扩散法或ELISA法特异性测定：抗原类似物的交叉反应效价测定：用腹水或培养液的稀释度表示纯度测定：SDS亲和性测定：测定亲和常数K71四、单克隆抗体的特性优点：理化性状高度均一，生物活性专一，只与一种抗原表位发生反应，特异性强，纯度高，易于实验标准化和大量制备

26、缺点：制备复杂，价格昂贵；反应强度不如多克隆抗体；应用有一定的局限性等 72单抗Monoclonal antibody由杂交瘤细胞系产生的，针对同一抗原决定簇的抗体高度均质。由同一个B细胞克隆产生的同质的抗体组成，是针对抗原的单一决定簇抗体。单抗纯度高，专一性强、重复性好，无批次差异。易于标准化，能保证无限量供应。单克隆抗体与抗血清的比较抗血清多克隆抗体polyclonal antibody由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成，是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分特异性差。不同批次的抗体制剂质量差异很大。难以工业化批量制备。 第三节 基因工

27、程抗体技术单抗体内应用和疗效受限原因： 鼠源性单抗对人体有较强的免疫原性 注入人体的单抗在肿瘤部位的摄取量甚少 生产成本高,难于普及应用74基因工程抗体：根据研究者的意图，采用基因工程方法，在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、拼接或修饰后导入受体细胞进行表达，产生新型抗体。主要包括人源化抗体、小分子抗体、抗体融合蛋白和双特异性抗体等。一、人源化抗体将小鼠Ig基因敲除，转染人Ig基因，在小鼠体内产生人Ab，再经杂交瘤技术，产生大量完全人源化抗体751、嵌合抗体方法：从杂交瘤细胞分离出功能性可变区基因，与人Ig恒定区基因连接，插入适当表达载体，转染宿主细胞，表达人-鼠嵌合抗体特点：减少了鼠源性抗

28、体的免疫原性保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力762、改型抗体意义：多种特异的鼠源单抗有可能应用于临床治疗77概念：指利用基因工程技术，将人抗体可变区（V）中互补决定簇（CDR）序列改换成鼠源单抗CDR序列，重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体。RAb亦叫“重构型抗体”，因其主要涉及CDR的“移植”，又可称为“CDR移植抗体。3、人源抗体78人源抗体指完全人源化抗体，是治疗抗体的最理想形式，其主要制备技术是抗体库技术和转基因小鼠技术二、小分子抗体Fab：抗原结合片断，由重链Fd段与完整轻链通过二硫键形成的异二聚体。Fv：可变区片段，由重链和轻链V区经非共价键结合形成的单价

29、小分子。ScFv：单链可变区片段，由重链和轻链的V区经适当的寡核苷酸接头连接形成的单一多肽链。SdAb：单区抗体 ，单独重链可变区。79概念： 分子量较小但具有抗原结合功能的分子片段小分子抗体优点：分子量小，易于穿入细胞可在原核细胞表达，生存成本低不含Fc段，副作用小半衰期短，可及时中和清除毒素80三、抗体融合蛋白重组蛋白既有单链抗体的抗原结合能力又有与之融合的蛋白的生物学活性。81概念：将利用基因生物工程技术重组表达所得的抗体片段与其它生物活性蛋白融合所得的产物。四、双特异性抗体将识别肿瘤抗原的抗体和识别细胞毒性免疫效应细胞表面分子的抗体连结在一起，可使效应细胞更容易与肿瘤细胞结合识别，起到杀伤肿瘤细胞的作用。交联方法：化学交联法、细胞工程法、基因工程法82概念：含有两种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁，激发具有导向性的免疫反应。五、噬菌体抗体库技术利用这一技术可以得到完全人源化抗体，在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特的优越性。83定义：将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体，转染工程细菌进行表达，然后用抗原筛选即可获得特异的单克隆噬菌体抗体。84用PCR扩增人抗体重链可变区