高效液相色谱法测定感冒清热颗粒中50甲基维斯阿米醇苷的含量

1、高效液相色谱法测定伤风清热颗粒中5-0-甲基维斯阿米醇苷的含量【摘要】目的测定伤风清热颗粒中5-0-甲基维斯阿米醇苷的含量。要领接纳高效液相色谱法,hypersil18色谱柱(4.6250,5)；甲醇-水(4456)为活动相；流速1.0l/in；检测波长：292n。效果5-0-甲基维斯阿米醇苷在0.09220.922g范畴呈精良的线性干系(r0.9999),均匀接纳率为97.9%,rsd0.71%(n6)。结论本测定要领轻便、正确、重复性好,可用于伤风清热颗粒质量操纵。【关键词】伤风清热颗粒；5-0-甲基维斯阿米醇苷；高效液相色谱法；含量测定keyrds：ganaqingregranule；4

2、-d-glusyl-5-ethylvisainl；hpl；ntentdeterinatin伤风清热颗粒收载于2022年版?中华人民共和国药典?(一部),由荆芥穗、防风、柴胡、葛根等11味药材构成,具有疏风散寒、解表清热成果,临床用于风寒伤风所见的头痛发热、恶寒身痛、鼻流清涕、咳嗽咽干等症。原尺度有测定葛根中葛根素含量的要领1。为提拔伤风清热颗粒的质量操纵尺度,包管临床疗效的不变,本试验创立以高效液相色谱法测定此中主药防风的有用身分5-0-甲基维斯阿米醇苷含量的要领。1仪器与试药日本岛津l-10atvp高效液相色谱仪,spd-10at型紫外检测器,lass-vpv5.02色谱事情站,qx25-0

3、6超声洗濯仪。伤风清热颗粒(批号20220602、20220606、20220617、20220622、20220809、20220813)及阴性样品,由广西某药业提供；5-甲基维斯阿米醇苷比较品由中国药品生物成品检定所提供(批号1523-200203)。甲醇为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为阐发纯。2要领与效果2.1测定波长的选择5-甲基维斯阿米醇苷比较品溶液经紫外分光光度计扫描,在291.8n处有最大汲取峰,应选择292n为测定波长。2.2色谱条件色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱(hypersil18,4.6250,5)；活动相：甲醇-水(4456)；检测波长为292n；流速：1.0l/in

4、；柱温：室温。2.3体系实用性试验别离汲取5-甲基维斯阿米醇苷比较品溶液、阴性样品溶液和供试品溶液各20l,注入液相色谱仪,得色谱图(见图1)。试验效果表白,供试品和比较品溶液有一保存时间雷同的色谱峰,而且阴性样品在5-甲基维斯阿米醇苷峰四周无滋扰,5-甲基维斯阿米醇苷与别的组分到达基线分散。阐发时间相宜,理论板数定为不低于5000。2.4比较品溶液的制备细密称取5-甲基维斯阿米醇苷比较品适量,置棕色容量瓶中,加50%甲醇制成每1l含20g的溶液,即得。2.5供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物,研细,取约4g,细密称定,加甲醇50l,超声处置惩罚(功率250,频率33khz)1h,放冷

5、。称定重量,用甲醇补足减失的重量。细密汲取25l续滤液,蒸干,残渣加水20l分次充实溶解,转移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇提取3次,每次20l。归并正丁醇液,用正丁醇饱和的氨试液洗涤3次,每次10l。分取正丁醇液,置水浴上蒸干,残渣用50%甲醇分次溶解,转移到10l量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。2.6阴性样品溶液的制备取阴性样品,照“2.5项下要领制备,即得。2.7线性干系观察细密称取5-甲基维斯阿米醇苷11.52g,置50l容量瓶中,加甲醇至刻度(0.2304g/l),摇匀,作为比较品储藏液。细密汲取比较品储藏液1.00、3.00、5.00、7.00、10.00l于50l容

6、量瓶中,以50%甲醇稀释至刻度,摇匀过滤,别离细密汲取20l,注入液相色谱仪,测定。以峰面积对浓度(g/l)举行线性回归阐发,得回归方程：a4.48781044.5665103,r0.9999,表白5-甲基维斯阿米醇苷在0.09220.922g范畴内线性干系精良。2.8细密度试验细密吸劝2.7项下比较品溶液20l,一连进样6次,测定,rsd0.15%(n6),表白细密度较好。2.9不变性试验取同一供试品溶液(批号20220617),别离在安排0、2、4、6、8、12h后,依法测定1次,效果表现,12h内供试品溶液中5-甲基维斯阿米醇苷峰面积不变,rsd0.17%,表白不变性较好。2.10重复性

7、试验取同一批样品(批号20220617)6袋,研细,细密称定6份,按供试品溶液制备要领制备6份供试品溶液,依法测定,5-甲基维斯阿米醇苷均匀含量为1.025g/袋,rsd0.42%(n6),表白重复性较好。2.11加样接纳率试验细密称取含量的样品(批号20220617,含量为1.025g/袋,0.084g/g)6份,别离细密参加必然量的5-甲基维斯阿米醇苷比较品,依法测定,盘算接纳率,效果见表1。表1加样接纳率试验效果(略)2.12样品测定取差异批次的样品,根据供试品溶液制备项下要领操纵,得供试品溶液,按上述色谱条件阐发测定,效果见表2。表25-0-甲基维斯阿米醇苷含量测定效果略根据6批测定效果,我们将含量限度确定为本品每袋含防风以5-甲基维斯阿米醇苷(22h2810)盘算不得少于0.60g。3讨论由于本品是含糖型颗粒,应在样品溶液的处置惩罚历程中思量去糖。笔者曾试验在样品超声提取后,细密汲取25l提取液,浓缩至5l加至d101型大孔吸附树脂柱上举行去糖处置惩罚。效果表现,对样品去糖与不去糖处置惩罚,两者色谱图无显着差异,且不去糖样品5-0-甲基维斯阿米醇苷无丧失,5-0-甲基维斯阿米醇苷的含量较高。我们观察了甲醇-水、乙腈-磷酸水、乙腈-水体系,效果以甲醇-水(4456)为活动相时,5-0-甲基维斯阿米醇苷的分散度和峰形