中药防治脑出血的实验研究进展课件

1、中药防治脑出血的实验研究进展 第一部分 实验性脑出血动物模型1 脑内注入胶原酶诱导脑出血模型 Rosenberg 等于1990年首先报道Rosenberg GA, Mun-Bryce S, Wesley M, et al. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke, 1990, 21 (5): 801-807在立体定位下用微量注射泵向200300 g的Sprague-Dawley大鼠尾状核注入含0.5 U 胶原酶（型）的生理盐水2 l，诱导大鼠脑出血。原理：胶原酶是一种金属蛋白酶，能够分解细胞间基质和血管基底膜上的

2、胶原蛋白。脑内注入胶原酶后20 min即可损伤脑血管基底膜上的胶原蛋白，破坏血脑屏障。血管壁受损后引起渗血，血液逐渐积聚，约4 h时出血区融合成片状出血。出血区的大小由胶原酶注入量的多少决定。该模型操作简单，所产生的出血大小、形态及部位基本一致，重复性好。但注射胶原酶后，需要一段时间才能产生出血，而且出血区实为一弥漫性渗血区，并非一个完全的血肿。与临床自发性脑出血发病情况不同。 脑内直接注入自体动脉血或凝血块是最常用的脑出血模型。20世纪60年代多采用狗、猫、猴等大动物，80年代末以后较多使用大鼠作为实验动物。该方法造成的脑出血模型在一定程度上类似人脑出血的病理过程，而且操作简单，通过立体定向

3、手术可造成各种部位的脑出血。 2 脑内注血方法制作脑出血模型Yang等于1994年在立体定位下将100l新鲜未肝素化的自体动脉血注入到250350g的Sprague-Dawley大鼠尾壳核内，制成脑出血模型。Yang GY, Bets AL, Chenevert TL, et al. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J Neurosurg, 1994, 81 (1):

4、 93-102 首次研究了大鼠脑出血从开始发生到7d时脑含水量、局部脑血流量和血脑屏障通透性改变的时程变化规律，并使用MRI证实尾壳核区血肿及水肿情况，结果发现该模型的脑水肿为血管源性与细胞毒性混合性脑水肿，其形成时程与局灶性脑缺血时脑水肿的时程变化大致相似。其主要的方法改进是：以较低压力（100 mmHg）、缓慢（5 min）注血是控制血肿大小一致的关键。该模型适合于研究脑出血的占位效应、脑水肿及来自血管的活性物质等在脑损伤中的作用。Wagner等选择家猪作为实验动物：（1）猪脑体积大，沟回多，白质发育好。且具有健康状态一致、费用较低等优点，是制作脑叶出血的理想动物。（2）猪脑出血可产生20

5、30倍于啮齿类的出血量，适合于检查外科手术清除血肿的疗效。（3）猪等大动物白质体积较大，使血清能够在血肿周围聚积而形成脑水肿，与临床脑出血接近。 Wagner等采用68 kg猪在全麻、气管插管、呼吸机通气、股动脉插管取血及监测血压、股静脉插管输液及注射药物等条件下，用三通开关分别连接立体定向插到尾状核水平的20号塑料管、插入股动脉的导管以及IVAC压力控制注射泵，从股动脉抽取10 ml自体血后，调节三通开关用泵在超过15 min的时间将1.7 ml血液注入到右侧额叶白质内，制成脑出血模型。Wagner等指出：实验性猪脑叶出血模型具有显著的人脑出血病理特征：该种组织间水肿类似于人脑出血早期血肿周

6、围出现的CT低密度影和MRT2高信号。该模型适用于对减轻脑水肿形成，防止白质损伤及改善脑出血后脑预后等治疗方法的评价。Wagner等在该模型上证明脑出血后血凝块的形成过程在产生脑白质与灰质水肿中起重要作用13，并发现超早期（4 h）应用组织型纤溶酶原激活物（tPA）溶解血凝块后再行血肿抽吸的方法可快速、容易、较完全地（血肿大小的70 %以上）清除血肿、显著减轻血肿周围的水肿并防止血管源性水肿的发展。第二部分 中药防治脑出血实验研究进展1 防治脑出血后脑水肿作用脑水肿是脑出血的重要并发症，其产生和发展是导致患者神经功能恶化甚至死亡的重要原因，积极、有效地防治脑水肿是降低患者死亡率与致残率的关键。

7、实验性脑出血研究表明：血肿周围脑水肿为血管源性（血脑屏障破坏所致）与细胞毒性（脑实质细胞受损所致）混合性脑水肿，远离出血灶的脑水肿是血管源性脑水肿扩散的结果。血肿周围缺血区内自由基大量生成、兴奋性氨基酸过度释放及钙离子超载等与血肿周围脑水肿形成有关。近年还发现，凝血过程中产生的凝血酶、红细胞溶解释放的血红蛋白及其降解产物均可破坏血脑屏障和产生细胞毒性，是导致脑出血后脑水肿的重要原因。现代医学临床主要使用脱水剂、利尿剂和糖皮质激素三类药物治疗脑水肿，它们虽然能够部分减轻脑出血后脑水肿，但对其病理生理机制针对性较差，且副作用较多。大量实验研究显示，治疗脑出血急性期的中药制剂均具有良好的防治脑水肿作

8、用, 其可能的作用机理如下。1.1 保护血脑屏障清开灵注射液，中风脑得平冲剂李克玲，黄启福，蒋玉凤，等. 清开灵注射液治疗家兔脑血肿的实验研究. 中国中西医结合杂志，1997，17（2）：91-93李克玲，黄启福，朱陵群，等. 中风脑得平冲剂对实验性兔脑血肿的作用. 北京中医药大学学报，1996，19（1）：22-242.1 降低血液粘度、调整脑血管舒缩功能、改善脑微循环 毛冬青甲素，救脑宁注射液 刘茂才，陈根成，张壮战，等. 毛冬青甲素治疗高血压性脑出血的实验研究. 广州中医学院学报，1995，12（4）：42-43庞鹤，王晓梅，王硕仁，等. 醒脑健神丹合清开灵注射液治疗急性脑出血的实验研究

9、. 中国中医急症，1995，4（2）：69-71黄世敬，黄启福，孙塑伦，等. 救脑宁注射液对实验性脑出血大鼠脑组织内皮素含量及一氧化氮合酶的影响. 中国中医基础医学杂志，2000，6（8）：16-192.2 促进脑微血管及胶质增生，加快脑组织损伤修复朱培纯，吴海霞，陈浩，等. 3种方药对脑出血大鼠因子相关蛋白和胶质纤维酸性蛋白的影响. 北京中医药大学学报，1997，20（1）：34-37 3 神经保护作用 有效地保护神经元是卒中等神经系统疾病治疗的关键 中药神经保护作用机理3.1 改善脑组织能量代谢还原注射液，脑溢安，醒脑健神胶囊、中风脑得平冲剂、清开灵注射液张春燕，李亚明. 还原注射液对脑出

10、血大鼠神经行为、乳酸、自由基的影响. 现代中西医结合杂志，2000，9（8）：667-668唐涛，梁清华，黎杏群，等. 脑溢安对实验性脑出血大鼠细胞色素c氧化酶活性的影响. 湖南医科大学学报，2000，25（6）：542-544张秋菊，张希晨，金焕，等. 醒脑健神胶囊、中风脑得平冲剂、清开灵注射液的实验及临床研究. 中国中医基础医学杂志，1999，5（s:s）：291-2943.2 抗自由基损伤脑溢安颗粒剂，复方北芪口服液胡随瑜，金益强，王勇华，等. 脑溢安颗粒剂主要药效学研究. 中药新药与临床药理，1997，8（3）：150-152黄燕，陈根成，连新福，等. 复方北芪口服液治疗脑出血实验研究

11、. 现代中西医结合杂志，2000, 9（10）：872-873何纲，黎杏群，梁清华，等. 脑溢安颗粒对实验性大鼠脑出血继发性脑缺血损伤的保护作用. 湖南医科大学学报，1999，24（6）：546-550何纲，黎杏群，张花先，等. 脑溢安颗粒对脑出血大鼠脑组织病理改变及一氧化氮生成的影响. 现代康复，2000，4（12）：1832-18333.3 抗兴奋性氨基酸毒性醒脑健神胶囊，中风脑得平冲剂，清开灵朱陵群， 蒋玉凤，黄启福，等. 醒脑健神胶囊对SHRSP出血性中风海马EAA和神经的影响. 临床神经病学杂志，1998，11（3）：131-134蒋玉凤，朱陵群，黄启福，等. 中风脑得平冲剂对卒中型

12、自发性高血压大鼠出血性中风海马兴奋性氨基酸和神经元的影响. 中国中西医结合杂志，1998，18（5）：296-298岳少杰，曾庆善，周建华，等. 清开灵抗大鼠谷氨酸神经毒性脑损伤的实验研究. 中国中西医结合杂志，2000，20（11）：842-8453.4 钙拮抗剂样作用 清开灵，逐瘀化痰汤，救脑宁注射液岳少杰，曾庆善，周建华，等. 清开灵抗大鼠谷氨酸神经毒性脑损伤的实验研究. 中国中西医结合杂志，2000，20（11）：842-845杨万章，万中民，李丽富，等. 逐瘀化痰汤等三方对大鼠脑出血脑组织MDA、Ca2、Fe2影响的实验研究. 北京中医药大学学报，1997，20（6）：35-37何丽

13、云，范吉平，孙塑伦，等. 救脑宁注射液对神经细胞凋亡及胞浆钙变化的影响. 中国病理生理杂志，2001，17（4）：312-3143.5 神经营养作用 清开灵注射液，三七总皂甙，脑溢安颗粒陈浩，朱培纯. 清开灵对脑出血大鼠前额皮层生长抑素mRNA表达影响的实验研究. 神经解剖学杂志，1998，14（1）：61-64张俊敏, 朱培纯. 三七总皂甙对脑出血大鼠前脑碱性成纤维细胞生长因子受体影响的实验研究. 中国中医基础医学杂志，2000，6（10）：30-33贺双腾，黎杏群，何泽云，等. 脑溢安对大鼠脑出血后神经生长因子和白细胞介素-1表达的调节作用. 湖南中医学院学报，2000，20（3）：22-25贺双腾，黎杏群，张花先，等. 脑溢安对血红蛋白损伤神经元神经生长因子和白细胞介素-1表达的影响. 湖南医科大学学报，2001，26（1）：26-30 4 结语及展望 防治脑出血的中药作用特点： （1） 多环节、多靶点作用方式，即对于脑出血 损伤过程中的多个重要病理环节 （2）不同治法、不同药物组成的中药复方防治 脑出血损伤的作用及机理往往存在重叠性 （ 3）绝大多数化学药物的脑出血保护作用仅停 留在动物实验阶段，离临床运用尚有相当 距离。防治脑出血中药除了对实验性脑出 血具有保护作用之外，对脑