上海药物研究所-上海绿谷(集团)有限公司

1、上海药物研究所上海绿谷（集团）有限公司丹参联合实验室上海绿谷（集团）有限公司中国科学院上海药物研究所创新中药丹参多酚酸盐粉针剂的产业化 丹 参丹参乙酸镁Mg2+ 丹参作为传统的活血化瘀良药，广泛应用于临床治疗心血管疾病，丹参制剂是目前国内医药市场中销售量最大的品种之一。丹参注射剂的临床使用量每年约30亿支。Salvia miltiorrhiza Bge. 丹参注射液产品1丹参注射液产品2 现有的丹参注射剂由于大多是70年代研制的，受当时研究水平和条件的限制，未能很好地阐明丹参的有效成分。因此这些制剂的质控指标不能充分反映药物疗效，药物质量控制存在的问题导致产品的疗效不稳定，有时出现不良反应。二

2、.技术基础 最大聚集率 (%)IC30 g/ml050 g/ml100 g/ml200 g/ml400 g/mlControl305丹参乙酸镁29 824 617764118紫草酸二钾3212307264168278迷迭香酸钠298233227116311丹参乙酸二钾296256186106134异丹参乙酸二钾28620619875141丹参素钾2710207256124141表1. 丹参乙酸镁及其同系物对ADP诱导兔血小板最大聚集率的影响（ADP 1 mol/L, n=4-8)聚集解聚率 (%)IC30 g/ml050 g/ml100 g/ml200 g/ml400 g/mlControl9

3、6丹参多酚酸盐3238321135666841丹参乙酸镁19111713216791945紫草酸二钾2693072814583461迷迭香酸钠3534431523839丹参乙酸二钾1992493214492490异丹参乙酸二参素钾24163372813384267表2. 丹参乙酸镁及其同系物对ADP诱导兔血小板聚集解聚率的影响（ADP 8 mol/L, n=4-7)MDA (nmol/g wet weight)10 g/ml30 g/mlControl5274510丹参多酚酸盐204142丹参乙酸镁203152紫草酸二钾216163迷迭香酸钠225162

4、丹参乙酸二钾184142异丹参乙酸二钾184152丹参素钾344208表3. 丹参乙酸镁及其同系物对脂质过氧化的抑制作用比较in vitro（n=10)成活时间延长率丹参乙酸镁延长65，P0.01紫草酸二钾延长23，P0.05迷迭香酸钠延长42，P0.05异丹参乙酸二钾延长69，P0.05表5. 丹参乙酸镁及其盐增强小鼠耐缺氧能力的作用比较in vivo（200 mg/kg,n=10)表4. 丹参乙酸镁及其同系物增强小鼠耐缺氧能力的作用比较in vivo（100 mg/kg,n=10)成活时间延长率丹参乙酸镁延长78丹参乙酸延长28丹参多酚酸盐延长78丹参多酚酸延长14图4. 丹参乙酸镁对氧化

5、修饰低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的影响。 A, cells cultured without ox-LDL; B, cells cultured with ox-LDL. 图3. 丹参乙酸镁对Cu2+ 诱导低密度脂蛋白氧化修饰的影响。Lane 1, Normal LDL; Lane 2, ox-LDL; Lane3, ML-B 100 M; Lane 4, ML-B 30 M; Lane 5, ML-B 10 M.图 5. 丹参乙酸镁对缺氧复氧诱导内皮细胞凋亡DNA的影响。 Lane 1: MLB 30 g/mL; Lane 2: MLB 10 g/mL;Lane 3: MLB 3 g/mL;

6、 Lane 4: HR control; Lane 5: normoxia control; Lane 6: 200 bp DNA Ladder.123456200 bp400 bp600 bp800 bp1000 bp1200 bp1400 bp1600 bp1800 bp2000 bp 丹参乙酸镁为主要成分的多酚酸盐是丹参中最重要的有效活性部位，并通过多种机制和途径发挥其保护心血管系统的作用。 国家药典委员会已经明确公布将丹参乙酸镁作为丹参片的质量标准，规定每片含量不低于13 mg。 丹参乙酸镁的药理活性及重要性已经得到了中国药品质量标准最权威的机构国家药典委员会的认定。丹参乙酸镁Mg2+

7、丹参多酚酸盐 丹参多酚酸盐及其粉针剂是以丹参乙酸镁为主要成分（含量达80）和质量控制指标新药。丹参多酚酸盐质量控制丹参多酚酸盐原料药丹参多酚酸盐粉针剂丹参药材丹参多酚酸盐粉针剂与丹参注射液中丹参乙酸镁的含量比较丹参注射液产品1丹参注射液产品2Mg2+丹参乙酸镁 丹参多酚酸盐粉针剂丹参乙酸镁40 mg/支技术基础以冻干粉针剂提高水溶性有效成分稳定性图5 丹参药材和市售丹参注射剂的HPLC比较丹参多酚酸盐粉针剂丹参注射液有效成分 以丹参乙酸镁为主，含量达到80，其余为其同系物。而丹参乙酸镁药理作用最强，它是丹参的主要活性成分。除原儿茶醛和丹参素外，其它的有效化学成分不明确。且它们的药理活性较弱。质

8、量指标 以丹参乙酸镁为质量标准，相当于40 mg/支；丹参多酚酸盐含量近100，保证了的临床疗效。以原儿茶醛为质量标准，不少于2 mg/支（10 ml）,疗效较低。制备工艺技术 以先进的专利工艺富集丹参乙酸镁，减少了药材质量对成品质量制约。精制的原料药可确保成品质量。直接从生药材制备，采用水提醇沉传统工艺，药材质量影响成品的质量。制剂稳定性和质量 冻干粉针剂，有效成分稳定。采用指纹图谱技术对药材、原料药和成品制剂分别进行全面的质量控制。水针剂，有效成分易分解，质量不稳定。大部分的成分无法进行控制。安全性和疗效 不良反应少，安全性、临床疗效好。不良反应多见，疗效不稳定。丹参多酚酸盐粉针剂与丹参注

9、射液的比较临床前药效学研究1. 抗心肌缺血作用 对狗冠状动脉结扎造成心肌梗塞模型的治疗作用 对离体大鼠心脏再灌注损伤的保护作用 2. 心脏血液动力学的影响 对狗心脏血液动力学的影响 对离体豚鼠心脏血液动力学的作用 3. 心脏耗氧量的影响 对狗心肌组织氧耗量的影响 对离体豚鼠心脏氧耗量的影响 4. 抗血小板聚集和抑制血栓形成作用 对ADP诱导的大鼠血小板聚集功能的作用 对大鼠动静脉旁路血栓形成的影响 抗心肌缺血作用(1) 对狗冠状动脉结扎造成心肌梗塞模型的治疗作用 图1. 丹参多酚酸盐对狗冠脉结扎心表面电图ST段总和(ST)的影响（mV，xSD，n=5只/组） 图2. 丹参多酚酸盐对N-BT染色

10、测定心肌梗塞范围的影响抗血小板聚集和抑制血栓形成作用Control给药后5 min给药后10 min给药后20 min对犬血液动力学的影响图5A. 丹参多酚酸盐20 mg/kg静脉注射对犬的血流动力学影响 丹参多酚酸盐对狗冠状动脉结扎造成心肌梗塞模型，能使心肌缺血程度显著下降，心肌缺血范围缩小，减轻心肌缺血时的细胞损害，具有明显的抗心肌缺血作用。同时丹参多酚酸盐能对抗血小板聚集和抑制血栓形成。其特点是在治疗剂量范围内不影响心脏血液动力学功能。 临床前药效学研究的总结1. 一般药理学试验 神经系统、心血管系统和呼吸系统药理学试验2. 急性毒性试验 昆明种小鼠的急性毒性试验3. 长期毒性试验 Be

11、agle狗的长期毒性试验；Sprague-Dawley大鼠的长期毒性试验4. 制剂的安全性试验 局部刺激试验；血管刺激试验；过敏试验 ；溶血试验 临床前安全性评价Control给药后5 min给药后60 min给药后120 min 图1. 麻醉狗静脉注射丹参多酚酸盐100 mg/kg对心率、血压和心电图的影响 心血管系统和呼吸系统Beagle 狗的长期毒性 Beagle 狗静脉注射320 mg/kg30天的毒副反应主要表现为高浓度药液（80 mg/ml）引起消化道的功能紊乱，血管的内皮细胞损伤、血栓形成以及所引起的造血组织变化。停药后均有所恢复。 Beagle 狗静脉注射丹参多酚酸盐 30 天

12、，无毒剂量为 20 mg/kg(约狗最佳有效剂量的6倍)；安全剂量为小于 80 mg/kg；中毒剂量为 320 mg/kg（约狗最佳有效剂量的100倍）。1. 局部刺激试验 家兔股四头肌内局部注射丹参多酚酸盐1毫升（5 mg/ml），观察注射局部刺激反应。结果表明，丹参多酚酸盐无局部刺激作用。2. 血管刺激试验 家兔耳缘静脉注射丹参多酚酸盐，连续三次后观察试药对血管的刺激作用。结果表明，丹参多酚酸盐静脉注射后对血管无刺激作用。3. 过敏试验 豚鼠腹腔间日注射丹参多酚酸盐，连续三次后，分别在第14和21天静脉注射丹参多酚酸盐，观察豚鼠对试药的过敏反应。结果表明，静脉注射丹参多酚酸盐后没有出现过敏

13、性反应。4. 溶血试验 采用丹参多酚酸盐的浓度 5 mg/ml，观察丹参多酚酸盐对家兔红细胞的溶血作用。结果表明，丹参多酚酸盐对家兔红细胞无溶血作用。制剂的安全性试验 丹参多酚酸盐粉针剂是以丹参乙酸镁为质量控制标准的一种创新中药，与现有的丹参注射液的质量指标完全不同，克服了现有制剂的缺点，具有明显的优越性。 丹参多酚酸盐粉针剂不仅有效成分明确，而且采用指纹图谱技术针对药材、原料药和制剂的质量进行全面的控制，从而确保了丹参多酚酸盐粉针剂产品的质量稳定、可控、高效和安全。 丹参多酚酸盐及其粉针剂的创新点丹参多酚酸盐粉针剂的临床研究 I 期临床试验（健康人耐受性试验）单次给药24例多次给药6例II

14、期临床试验（安全性及有效性的初步评价）随机、阳性药对照（丹参注射液）、多中心试验组120例（完成116例），对照组120例（完成114例）安全性分析一般体格检查安全性检测疗效分析心绞痛疗效心电图疗效 中医症状疗效 疾病综合疗效 心绞痛及中医症状记分分析心绞痛总记分、总记分下降率、心绞痛症状消失率中医症状总记分、总记分下降率、中医症状消失率丹参多酚酸盐粉针剂 I期、II期临床研究的耐受性和安全性评价在I期临床试验中，单次给药组及多次(累积)给药组共30例健康受试者，在初始剂量及临床推荐剂量的2倍范围内，观察过程中均未出现不良反应，并在停药后随访3天亦未见不良反应。在II临床试验中，丹参多酚酸盐粉针剂受试组116例患者治疗14天后，一般体格检查、肾功能、尿粪常规未见异常。有1例受试者用药后自觉轻度头胀痛，未经治疗，2 h后消失。表明丹参多酚酸盐粉针剂治疗冠心病心绞痛是安全的。II期临床研究结果不良反应总有效率（）缓解心绞痛发作和减少硝酸甘油用量 改善心电图ST段 中医症状疗效 疾病综合疗效 丹参多酚酸盐粉针剂轻度头胀痛1例92.2* 61.2* 92.2* 86.2* 丹参注射液皮疹1例 、 头痛和四肢乏力1例76.8 39.7 75.4 55.3 多中心、随