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文档简介

1、维生素B12注射液的定性鉴定及含量的测定实验目的了解紫外可见分光光度计的构造及正确使用方法。掌握吸收曲线的绘制方法。掌握紫外可见分光光度法对物质的定性鉴定和含量测定。实验原理紫外分光光度法仍然是基于LambertBeer定律 A = kcb 其中k为吸光系数。在条件改变时，吸光系数k可以用摩尔吸光系数或比吸光系数 所代替。 实验原理维生素B12是含有Co的有机化合物，为深红色结晶或结晶性粉末。其注射液在2781nm、3611nm、5501nm波长处有最大吸收。实验原理通过对最大吸收峰处吸光度比值的计算，可对其进行实性鉴定。中华人民共和国药典2000版规定维生素B12的定性鉴定标准为：实验步骤1

2、. 参看紫外可见分光光度计仪器简介和使用操作部分，熟悉其性能和操作方法。接通电源，打开仪器，预热20min。实验步骤2. 按药典方法，取维生素B12注射液1支（1mL），倒入25mL容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，充分混匀，置于1cm石英吸收池中以蒸馏水作参比溶液，在波长230nm580nm的范围内，每间隔20nm测定一次吸光度，在最大吸收峰278nm、361nm、550nm附近，每间隔2nm测量一次，然后绘制A吸收曲线图，确定最大吸收峰位置，并计算吸光度之比值，进行定性鉴定。思考题1. 紫外可见分光光度计测定维生素B12含量及定性鉴定的原理是什么？2. 称取0.0500g维生素C，溶于0.01mol/L H2SO4溶液中，然后转移至100mL容量瓶中，稀释至刻度。吸取该溶液2.00mL，准确稀释至100.0mL。取此溶液在1cm厚的吸收池中用245nm波长的单色光测其吸光度

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