荧光光谱法在中药品级鉴别中的应用研究分析 医药学专业额

1、荧光光谱法在中药品级鉴别中的应用研究摘 要本课题运用FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪来测量在不同蒸煮时间下的当归和独活的荧光光谱，通过观察它们的荧光光谱来鉴别和区分出当归和独活这两种中药。通过实验结果可以发现，当归对波长为348nm的光较为敏感，而独活对波长为349nm的光较为敏感；两者的最高峰的高度都随着蒸煮时间的增加而降低，当归的峰高变化的幅度大，而独活的峰高变化幅度小；当归的荧光光谱的宽度较小，而独活的荧光光谱的宽度较大；独活的最高峰的位置在当归的最高峰的右边;当归的荧光光谱曲线较陡，而独活的荧光光谱曲线较为平缓。本研究结果对于鉴别当归和独活有一定的参考价值。该论文有图23幅，表2个，

2、参考文献12篇。关键字：中药 当归 独活 荧光光谱 Radix Angelicae Sinennsis and Heracleum hemsleyanum Diels fluorescence spectrometry identificationAbstract By testing the fluorescence spectrum of Radix Angelicae Sinennsis and Heracleum hemsleyanum Diels, improving the testing can distinguish between the two kinds of tradi

3、tional Chinese medicine (TCM) whether or not. By testing the Radix Angelicae Sinennsiss and Heracleum hemsleyanums excitation spectrum ,emission spectrum and polarization spectrum under different cooking time,the operation will tell us that spectrum characteristics of the two kinds of Chinese medici

4、nal materials in the spectrum curve change rule under different cooking time.Under different cooking time,we will find the difference in the three flourescence spectrum are huge .According to the result of data analysis, the Radix Angelicae Sinennsis is obviously different from Heracleum hemsleyanum

5、 Diels in fluorescence spectrum.And we can distinguish two Chinese medicines through this method.Key words:Chinese medicine Radix Angelicae Sinennsis Heracleum hemsleyanum Diels fluorescence spectrum 目录TOC o 1-3 h u HYPERLINK l _Toc31747 摘 要 PAGEREF _Toc31747 I HYPERLINK l _Toc15403 Abstract PAGEREF

6、 _Toc29369 II HYPERLINK l _Toc29369 图清单 PAGEREF _Toc12528 I PAGEREF _Toc29369 II HYPERLINK l _Toc12528 表清单 PAGEREF _Toc29369 IV HYPERLINK l _Toc15320 变量注释表V HYPERLINK l _Toc18665 1. 绪论 PAGEREF _Toc18665 1 HYPERLINK l _Toc23818 1.1鉴别中药方法 PAGEREF _Toc23818 1 HYPERLINK l _Toc24732 1.2研究对象介绍 PAGEREF _To

7、c24732 2 HYPERLINK l _Toc382 2实验的基本原理 PAGEREF _Toc382 4 HYPERLINK l _Toc3346 2.1分子荧光的产生 PAGEREF _Toc3346 4 HYPERLINK l _Toc1296 2.2 影响分子荧光的因素 PAGEREF _Toc1296 4 HYPERLINK l _Toc12187 2.3荧光激发光谱和荧光发射光谱 PAGEREF _Toc12187 5 HYPERLINK l _Toc29731 3实验 PAGEREF _Toc29731 7 HYPERLINK l _Toc20836 4.实验结果和分析 PA

8、GEREF _Toc20836 10 HYPERLINK l _Toc18481 4.1当归的光谱分析 PAGEREF _Toc18481 10 HYPERLINK l _Toc23 4.2独活的荧光光谱分析 PAGEREF _Toc23 14 HYPERLINK l _Toc15182 4.3当归与独活的荧光光谱的对比 PAGEREF _Toc15182 19 HYPERLINK l _Toc11945 5结论与展望 PAGEREF _Toc11945 22 HYPERLINK l _Toc31515 5.1结论 PAGEREF _Toc31515 22 HYPERLINK l _Toc24

9、704 5.2展望 PAGEREF _Toc24704 22 HYPERLINK l _Toc23060 参考文献 PAGEREF _Toc23060 23 HYPERLINK l _Toc4673 致谢 PAGEREF _Toc4673 24图清单图序号图名称页码图1-1当归3图1-2独活3图3-1FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪实物图7图3-2FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪光路图8图4-1不同蒸煮时间下的当归的荧光光谱10图4-2蒸煮5min下的当归的偏振光谱图4-4 蒸煮15min下的当归的偏振光谱 图4-5 蒸煮20min下的当归的偏振光谱图4-6 蒸煮25min下的当归的偏振光

10、谱11图4-3蒸煮10min下的当归的偏振光谱11图4-4蒸煮15min下的当归的偏振光谱12图4-5蒸煮20min下的当归的偏振光谱12图4-6蒸煮25min下的当归的偏振光谱12图4-7当归在不同蒸煮时间下的平行偏振光谱13图4-8当归在不同蒸煮时间下的垂直偏振光谱13 图4-10不同蒸煮时间下的独活的荧光光谱15 图4-11蒸煮5min下的独活的偏振光谱16 图4-12蒸煮10min下的独活的偏振光谱16 图4-13蒸煮15min下的独活的偏振光谱16 图4-14蒸煮20min下的独活的偏振光谱16 图4-15蒸煮25min下的独活的偏振光谱17 图4-16不同蒸煮时间下的独活的平行偏振

11、光谱17 图4-17不同蒸煮时间下的独活的垂直偏振光谱18 图4-19蒸煮5min下的当归与独活的荧光光谱19 图4-20蒸煮5min下的当归与独活的荧光光谱19 图4-21蒸煮5min下的当归与独活的荧光光谱20 图4-22 蒸煮5min下的当归与独活的荧光光谱20 图4-23 蒸煮5min下的当归与独活的荧光光谱20表清单表序号表名称页码表1 不同蒸煮时间下的当归的偏振度14表2 不同蒸煮时间下的独活的偏振度18变量注释表E电场H磁场起偏器和检偏器平行时的荧光强度起偏器和检偏器垂直时的荧光强度分子的旋转弛豫时间P偏振度绪论中药是我们中国的瑰宝，是中国传统文化之一，有着悠久的历史和丰富的经验

12、。中药相对于西药来说，它的治疗效果好，副作用小，对慢性病和消耗性疾病来说效果显著，中药治本而西药治标。我国有丰富的中药资源，而且中药的来源十分广泛，因为我国的土地辽阔，地形复杂，也导致了中药的品种的复杂多样。所以，中药有真假和易混淆的，许多中药的外形很相似，但是效果完全不同，一旦用错药，将会产生严重的后果，给中药鉴别和鉴定带来许多问题，为了避免严重后果的发生，我们需要接受挑战，研究中药的应用和发展。而且，我们要学会识别中药，学会区分它们，拒绝假冒伪劣产品。鉴别和区分这些中药是有一定难度的，在制备中药的过程中需要对中药进行加工，而在加工过程中以及加工之后，某些中药的外观会变得很相似，甚至用肉眼都

13、分辨不出来；而又因为不同产地或者不同的加工工艺，导致中药的性状和其他特点也会发生变化。对中药的配置的准确度与临床治疗效果的关系是很大的，准确度越高，临床治疗效果越好，这是肯定的。所以，为了提高临床治疗效果，需要提高中药配置的准确度，所以，我们要想办法从根本上解决中药的品种混乱和以假乱真的问题，找到最好、最准确的方法来鉴别和区分这些中药。本实验使用的是荧光光谱法，来鉴定和鉴别当归和独活这两种中药，控制两种中药在不同的蒸煮时间下，分析研究它们的不同之处。分别取样品进行测试，根据数据用软件绘制出图像。当归是临床常用中药，是既能祛邪又可补虚的中品。独活和当归在形状上十分相似，但药效完全不同，非专业人士

14、并不能准确区分，一旦用错将会产生严重的后果。当归的药用和经济价值都比较高，市场容量很大，是中成药的重要原料，由于当归价格上涨，不少黑心人将独活加工后冒充当归出售。因此，鉴别当归和独活是很必要的。1.1鉴别中药方法 鉴别中药的方法有很多，主要分为理化鉴定法和生物鉴定法1,2。其中精度较高的方法是生物鉴定法，但是在实际实验中，不常采用，因为实验所需周期较长，而且要求也很高，而且实验的准备和过程都比较复杂。由于不同的中药师具备不同程度的技术和素质，而且需要人工操作，性状鉴定法很容易造成误差。相比较来说，理化鉴定法比较简单，但是有时候会受操作的影响导致实验产生误差，结果不准确。而荧光光谱法所会更深入的

15、去鉴别，比较准确，实验的准备和操作也很简单。荧光光谱分析法(MFS分析)就是测量物质所发射的荧光中的不同的波长的技术。 荧光光谱分析法是利用某些物质分子或原子受光照射时所发生的荧光的特性和强度，进行物质的定性分析或定量分析的方法3。目前为止，很长一段时间，我国都是利用荧光光谱法对中药进行真伪鉴别和品质鉴定，通过荧光光谱法可以鉴别一些常见的、易混淆的中药，得到它们的特征光谱；如果要区分许多外形相似的且易混淆的中药，我们也可以通过荧光光谱法测出它们的特征光谱，再进行区分。荧光光谱法在中药鉴别领域具有有着重要的地位，发挥着重要的作用，主要是因为它有着特殊的优势。为了测定和分析当归和独活的荧光光谱，本

16、实验使用的仪器是英国Edinburgh Instruments Inc 生产的FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪，控制它们的蒸煮时间，测出它们的的激发光谱、发射光谱和它们的偏振光谱。在根据测试出的数据绘制出它们各自的光谱图像之后，又绘制了两种中药在相同蒸煮时间下的光谱图像，再进行研究分析，找出不同之处，以便于更好的鉴别和区分出它们。1.2研究对象介绍 当归和独活是常用的中药材，形状和颜色相似，功效却大相径庭。1.2.1当归【来源】伞形科植物当归的干燥根【性状】当归性温。柴性大、干枯无油或断面呈绿褐色者不可供药用，以有浓郁的香气，味甘、辛、微苦。以主根粗长、油润、气味浓者为佳。味甘辛，入心、肝、

17、脾经。【功效】杨血补血、润肠通便、眩晕、肠燥难便等症，用于治疗痛经、月经不调、闭经、血虚、抗癌、头痛、调经活血，还可防治冻疮。当归是多年生草本，形状是圆柱形的，表面凹凸不平，根茎直立，有纵深沟纹，光滑无毛，大约有4080厘米长。外表呈黄棕色至棕褐色，有多数肉质须根，归头顶端圆平，有茎叶残基，常有不显著的环形皱纹。质多柔韧，断面黄白色，有裂隙，闻之气清香浓厚，口尝味甘微苦辛。 图1-1 当归1.2.2 独活【来源】伞形科植物重齿毛当归的干燥根【功效】祛风胜湿、散寒止痛，用于治疗头痛齿痛、风寒湿痹、腰膝疼痛、产后中风、手脚挛痛等。【性状】与当归是同科植物，根头及主根粗短，根头部膨大，圆锥状，多横皱

18、纹，顶端有茎，下部分出数条支根。主根表面呈灰棕色或黄棕色，有环纹有纵皱纹、横长皮孔及稍突起的细根痕，有环纹。闻之味道特殊，尝起来先苦辛后辣。独活性微温，味辛苦，入肾、膀胱经。与当归的外观也极为相似。 图1-2 独活2实验的基本原理2.1分子荧光的产生物质吸收电磁辐射后，物质内部的分子和原子受到激发并产生发射光，发出与激发辐射波长相同的发射光，也可能发出不同于激发辐射波长的发射光，这就是荧光（fluoersecnce）。物质内部的分子和原子由最低的基态能级跃迁至电子激发态的高能级或者其他的能级，因为受到辐射吸收了光子，吸收的光子越多，就能跃迁到更高的能级。激发态分子与周围分子撞击而消耗了部分能量

19、，迅速下降至第一电子激发态的最低振动能级，并停留约10-9秒之后，以光的形式释放出多余的能量，下降至电子基态的各个不同振动能级，此时发射出的光即为荧光5。所以，激发辐射光照射到物质上后想要产生荧光必要的两个条件，一是该分子必须具有一定程度的荧光效率，即荧光物质吸光后所发射的荧光量子数与吸收的激发光的量子数的比值6；二是受激发辐射的物质内部的分子要具有能吸收激发光的结构。2.2 影响分子荧光的因素联系学过的知识，可以知道，影响物质内部分子发出荧光强度的主要因素包括几个： （1）受激发辐射物质内部分子的结构和荧光效率。 （2）照射到物质上的激发辐射光的强度。激发辐射光越强，分子发出的荧光强度就越大

20、。 （3）温度会影响分子的荧光强度。升高温度会减弱分子的荧光强度，在高温下，分子间运动速率变大，碰撞的机会变多，产生激烈的碰撞，导致去活化概率增大。 （4）溶液浓度也会影响分子的荧光强度。溶液的浓度越大，分子的荧光强度越小。 （5）析出的杂质的影响。杂质会影响分子的荧光强度，使物质内部的分子荧光强度不断地减弱。而在蒸煮中药的过程中，杂质的析出是不可避免的。 （6）分子荧光的减退。紫外线的长时间照射和空气的氧化作用会使荧光减退7。2.3荧光激发光谱和荧光发射光谱根据学过的知识，我们知道，荧光具有两种特征光谱，依据这两个特征光谱，荧光分析法就可以对研究对象进行定性与定量分析了，这两个特征光谱就是荧

21、光激发光谱（Excitation spectrum）和荧光发射光谱（Emission spectrum）8。下面就是介绍。2.3.1荧光的激发光谱照射到物质上的激发辐射光的波长发生变化，物质内部的分子发出的荧光的强度也会发生变化，激发光谱就是通过测量这种变化而获得的光谱。测量激发光谱的方法是，第一步要扫描激发单色器，这个时候，激发单色器会产生不同波长的入射光，产生的入射光照射物质上后，物质内部分子受到激发后会发出荧光，分子发出的荧光再通过发射单色器照射到检测器上，它的作用是采集并处理接收到的荧光的荧光强度，然后记录荧光的强度与激发光波长的数据，通过软件绘制出图像，来表示它们的关系，这个图像就是

22、激发光谱。选择激发光谱的形状与测量的发射波长无关，但是其相对强度是与所选择的发射波长是有关的9。2.3.2荧光的荧光光谱物质受到激发后，物质内部分子会发出荧光，可以称为发射光，分子荧光的强度随发射光波长的变化而变化，荧光发射光谱就是通过测量这种变化而获得的光谱，又可以称为荧光光谱。扫描发射波长，记录数据后，以荧光强度为纵轴，发射波长为横轴，画出发生波长与荧光强度的关系曲线就是荧光光谱曲线，而扫描的前提要保持激发光的波长和激发光的强度不变。荧光光谱就是指由激发波长引起的，物质内部分子发射的光波长不同，导致荧光强度也不同，而发射光的波长与荧光强度会存在着一定的关系。荧光光谱的形状与选择激发波长无关

23、。但如果激发波长选在远离激发峰处时，荧光强度很低10。2.3.3荧光的偏振光谱物质受到激发辐射后，物质在各个方向都会发出荧光，如果发出的荧光在某个方向很明显，那么此时的荧光就是是一种偏振光，这就是荧光偏振。如果想要了解荧光分子的有序程度和活动性，可以测量分子的荧光偏振，因为分子的有规则排列影响着分子的荧光偏振。光是电磁波,表现在电场E和磁场H的变化。电场、磁场和电磁波的传播的方向都是垂直的，三者相互垂直。若用线偏激发光照射在荧光分子上，如果分子发生了转动则会发射部分偏振的荧光；如果分子方向不变的，则说明测出的荧光是偏振的11。我们用字母P表示荧光偏振度，也可以表示荧光偏振的强弱，起偏器和检偏器

24、平行时的荧光强度用表示，起偏器和检偏器垂直时的荧光强度用表示，即： 荧光的偏振度与分子的旋转弛豫时间成正比12 因此，偏振度也是荧光光谱的一个重要参量。 3实验3.1实验仪器本实验用的仪器是FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪。该仪器的激励发光源使用的是450W的氙灯和脉冲闪光灯（纳秒、微秒），光源照射样品发出光子信号，经单色仪系统进入光电倍增管，它的作用是将接收到的信号放大并处理，最后输出到计算机上。图3-1是FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪，图3-2是FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪光路图： 图3-1 FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪实物图 图3-2 FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪

25、光路图 另外试管、烧杯、移液管、纸杯、电热锅、量筒、比色皿、胶头滴管、计时器、电子秤等仪器也是需要的。3.2样品制备取当归和独活的干燥片各5份，每份5g。每份样品加200ml纯净水进行蒸煮，用计时器进行计时，得到当归和独活蒸煮时间为5min、10min、15min、20min、25min的各5份溶液。将所取溶液静置15min后，再取上层溶液装入试管，做上标记，作为实验样品，共10个样品。3.3实验方法 （1）首先打开FLS920型稳态和瞬态荧光光谱仪。 （2）将比色皿清洗干净，擦干，再将样品溶液倒入比色皿中，再将其放入光谱仪的凹槽中。 （3）设置参数，将激发光和发光的狭缝宽度分别设为5nm、1

26、nm。在操作过程中，不可避免的是会产生误差，所以需要适当调整激发光和发光的狭缝宽度，在每个波长处的扫描时间为1秒。 （4）调节完参数后，扫描样品，首先可以选择任意的激发波长和发射波长，在得出激发光谱和荧光光谱的图像后，记录数据，我们可以知道激发光谱的最大峰值处的波长即为最佳激发波长。之后在实验中就可以以最佳激发波长作为激发波长扫描样品，记录数据，再进行绘制图像就可以得到样品在 不同蒸煮时间下的发射光谱。 （5）再根据得到的样品激发波长和发射波长，控制样品溶液的浓度，在其不同蒸煮时间下对样品溶液进行平行偏振和垂直偏振的扫描，记录数据，根据数据绘制图像，绘制出样品的平行偏振光谱和垂直偏振光谱图像。

27、实验结果和分析将以上实验得出的结果进行处理并分析。4.1当归的光谱分析通过绘制出的图像，分析不同蒸煮时间下的当归的激发光谱、荧光光谱和平行、垂直偏振光谱的结果，找出不同点。4.1.1当归的荧光激发光选择为了选择激发光波长，做了激发光谱，得出当归对波长为348nm的光最为敏感，为测出当归在不同蒸煮时间下的发射光谱和它们的偏振光谱做好铺垫。4.1.2不同蒸煮时间下的当归的荧光光谱分别测当归在蒸煮5min、10min、15min、20min、25min时的荧光光谱，得到下图： 图4-1 不同蒸煮时间下的当归的荧光光谱从上图中我们可以看出，在351-357nm这个区间，5条曲线都是缓慢升高的；曲线的最

28、高峰处的波长都集中在357-360nm之间，而最高峰对应的纵坐标即荧光强度随着蒸煮时间的增加而降低。中药在加热过程中会析出其他物质，这也说明了在不同蒸煮时间下，蒸煮当归所析出来的物质是相对稳定的。当归的荧光光谱的最大峰值处高度（即荧光强度）明显在降低，这主要是因为加热过程中会析出其他物质，而加热时间越长，溶液浓度变大，析出的物质越多，自身发生的荧光被吸收，以致当归的荧光强度减弱。即当归溶液的蒸煮时间越长，它的荧光强度越低。4.1.3不同蒸煮时间下的当归的偏振光谱起偏器和检偏器平行时为平行偏振，记为h-h偏振；起偏器和检偏器垂直时为垂直偏振，记为h-v偏振，测得两偏振片的偏振角度平行与垂直时的偏

29、振光谱。11 图4-2 蒸煮5min下的当归的偏振光谱 图4-3 蒸煮10min下的当归的偏振光谱 图4-4 蒸煮15min下的当归的偏振光谱 图4-5 蒸煮20min下的当归的偏振光谱 图4-6 蒸煮25min下的当归的偏振光谱记录数据后，控制蒸煮时间，把当归在的平行偏振光谱与垂直偏振光谱图像绘制在同一个坐标轴上，共5张图，便于进行对比分析，可以得到下面两张偏振光谱图：图4-7 当归在不同蒸煮时间下的平行偏振光谱图4-8 当归在不同蒸煮时间下的垂直偏振光谱左图为当归的平行偏振光谱图像，右图为当归的垂直偏振光谱图像。当归溶液中的物质分子具有明显的各向异性，因为上图图可以看出当归在不同蒸煮时间下

30、的平行光谱与垂直光谱的最大峰值处的波长相差很大。对比分析，5张当归的平行偏振光谱图像的走势基本一致，但不重合，最大峰值的高度随着蒸煮时间的增加而减小，即荧光强度会随着蒸煮时间的增加而减小，垂直偏振光谱亦是如此。4.1.4 当归的偏振度根据当归的平行偏振光谱和垂直偏振光谱，计算处当归的偏振度。表1蒸煮5min蒸煮10min蒸煮15min蒸煮20min蒸煮25min53570000510900004962000031330000272800003733000032790000249300002132000020810000偏振度P0.1790.2180.3310.190.158由上表可以看出，当归

31、的平行和垂直偏振光强都随着蒸煮时间的增加而降低，平行偏振光强下降幅度比垂直偏振光强下降幅度大；在不同蒸煮时间下，当归的平行偏振光强都大于垂直偏振光强，而且偏振度不同，偏振度随着蒸煮时间的增加后减小，变化的幅度较小。4.2独活的荧光光谱分析蒸煮时间不同，分别测试独活溶液的激发光谱、荧光光谱和平行、垂直偏振光谱，绘制出图像，并进行比较分析。4.2.1独活的荧光激发光选择为了选择激发光波长，做了激发光谱，得出独活对波长为349nm的光最为敏感，为测出独活在不同蒸煮时间下的荧光光谱和偏振光谱做了铺垫。4.2.2不同蒸煮时间下的独活的荧光光谱 图4-10 不同蒸煮时间下的独活的荧光光谱 图4-10是独活

32、在蒸煮5min、10min、15min、20min、25min下的荧光光谱图像，从图中我们可以看出，控制独活的浓度，在不同的蒸煮时间下，独活的最大峰值处的波长的变化不是很大，变化量为2nm左右。中药在蒸煮加热的过程中会析出其他物质，这说明了在不同蒸煮时间下，蒸煮独活所析出来的物质是相对稳定的。而随着蒸煮时间的增加，图像的最高峰的高度在不断地降低，即荧光光谱的强度在降低，原因跟当归的是相同的。4.2.3不同蒸煮时间下的独活的偏振光谱控制蒸煮时间，根据之前得到的激发与发射波长，对独活进行平行偏振与垂直偏振的扫描，记录数据并绘制出图像，得到以下图：图4-11 蒸煮5min下的独活的偏振光谱 图4-1

33、2 10min下的独活的偏振光谱图4-13蒸煮15min下的独活的偏振光谱 图4-14蒸煮20min下的独活的偏振光谱 图4-15 蒸煮25min下的独活的偏振光谱将蒸煮时间相同的独活的平行偏振光谱与垂直偏振光谱绘制在同一个坐标轴上，便于对比分析，可以得到下面两张偏振光谱图： 图4-16 不同蒸煮时间下的独活的平行偏振光谱 图4-17 不同蒸煮时间下的独活的垂直偏振光谱图4-17为在不同蒸煮时间下，独活的平行偏振光谱和垂直偏振光谱。由上图可以看出，独活的平行和垂直偏振光谱走势基本一致，但不重合，最大峰值的高度随着蒸煮时间的增加而减小，即独活的荧光强度会随着蒸煮时间的增加而减小。我们还可以知道，

34、独活溶液中的物质分子具有各向异性，由图中独活平行光谱与垂直光谱的不同的最大峰值处的波长来体现。4.2.4独活的偏振度根据独活的平行偏振光谱和垂直光谱，计算独活的偏振度。表2蒸煮5min蒸煮10min蒸煮15min蒸煮20min蒸煮25min563500004836000046240000418000003590000051360000371000002701000093350008784000偏振度P0.0460.1320.2630.6350.607 由上表可以看出，独活的平行和垂直偏振光强都随着蒸煮时间的增加而降低，平行偏振光强下降幅度比垂直偏振光强下降幅度小；在不同蒸煮时间下，独活的平行偏

35、振光强都大于垂直偏振光强，而且偏振度不同，偏振度随着蒸煮时间的增加后减小，变化的幅度较大。4.3当归与独活的荧光光谱的对比根据以上得到的当归与独活的荧光光谱，将两者进行对比分析。4.3.1当归与独活的激发光的对比在实验过程中，当归对波长为348nm的光比较敏感，而独活对波长为349nm的光比较敏感。4.3.2当归与独活在相同蒸煮时间下的荧光光谱的比较分析图4-19 蒸煮5min下的当归与独活的荧光光谱图4-20蒸煮10min下的当归与独活的荧光光谱 图4-21 蒸煮15min下的当归与独活的荧光光谱图4-22 蒸煮20min下的当归与独活的荧光光谱 图4-23 蒸煮25min下的当归与独活的荧

36、光光谱以上五张图可以看出在不同的蒸煮时间下，当归与独活的荧光光谱之间的区别很大。就曲线弯曲程度来看，当归蒸煮液的荧光光谱曲线较陡，而独活煮液的荧光光谱较缓。独活蒸煮液的发射波长在不同蒸煮时间下都是比当归蒸煮液的发射波长长。还可以看出独活的荧光光谱的宽度要比当归的荧光光谱的宽度宽很多，说明在峰值处附近，独活的荧光强度变化较小，而当归在峰值附近的荧光强度的变化较大。当归与独活的激发波长是不同的，根据上面六幅图可以明显的看出来，但是很接近，不是很容易区分。较明显的差别是两者的荧光强度和光谱的宽度，而最明显的是两者的荧光光谱的走势，所以可以通过观察它们之间明显的差别来区分当归和独活。5结论与展望5.1

37、结论经过测量当归与独活两种中药材在不同蒸煮时间下的溶液的荧光光谱，绘制出它们的激发光谱、荧光光谱和偏振光谱，并进行比较和区分，我们可以得出以下结论： （1）本实验研究的是当归与独活，发现当归的激发波长为348nm，而独活的激发波长为349nm,可以通过它们的荧光激发光谱来区分。 （2）当归溶液峰值处的发射波长随着蒸煮时间的变化而变化，在359nm处左右变化，但变化的幅度是很小的；峰值处的强度随着溶液蒸煮时间的增加在逐渐减弱，即荧光强度会随着蒸煮时间的增加而减小，而荧光光谱的宽度较小，说明峰值附近的荧光强度的变化是较大的。 （3）独活溶液峰值处的发射波长随着蒸煮时间的变化而变化，在360nm处左

38、右变化，但变化的幅度非常的小；峰值处的强度随着蒸煮时间的的增加在逐渐减弱，即荧光强度会随着蒸煮时间的增加而减小。而荧光光谱的宽度较大，说明峰值附近的荧光强度的变化是较小的。 （4）当归溶液与独活溶液之间最大的不同是荧光光谱的走势，当归的荧光光谱较陡，而独活的荧光光谱较为平缓。 （5）当归溶液与独活溶液的偏振光谱的走势也有着明显差异，当归的偏振度的变化幅度较小，而独活的偏振度的变化幅度较大。两者的偏振度都不为0，都有着各向异性。5.2展望本课题运用荧光光谱法鉴别当归与独活两种中药，通过以上实验的结果和分析结论可以看出，使用荧光光谱法可行性大，而且很准确，使用荧光光谱法的实验操作也是很简单的。对鉴

39、别和区分中药来说，荧光光谱法有独到之处，相比较来说也具有优势，在鉴别中药真假和易混淆药品方面具有重要的地位和长远的意义。因此我们国家需要更多的力量，给予更大的支持，坚持打击仿冒伪劣产品，争取检测出全部的中药的荧光光谱图，便于鉴别出真假中药，提高中药配置的准确度，提高临床效果。参考文献1 刘敏莉，李 柏常用中药鉴别方法研究进展J吉林中医药.2005.25：562 张汉明，许铁峰中药鉴别研究的发展和现代鉴别技术介绍J.中成药2000.22:1013 许金钩，王尊本荧光分析法M第三版北京科学出版社20064 胡妮娜,田淑琴,于景伟,张利兵,刘洋,杨国忠. HYPERLINK /kcms/detail/detail.aspx?filename=ZYXN200803006&dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2008&v= t /kcms/de