女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别

1、- -女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别女贞子为木犀科植物女贞LigustrumlucidumAit.的干燥成熟果实。甘、苦，凉。归肝、肾经。能补肝肾阴，乌须明目。主治眩晕耳鸣，腰膝酸软，须发早白，目暗不明，视力减退，阴虚发热。为常用的扶正固本中药。药理研究表明其提高免疫的主要有效成分为齐墩果酸、熊果酸及乙酰齐墩果酸。齐墩果酸以游离态和结合成苷的形式同存于女贞子中。女贞子还含有橄榄苦苷、D-甘露醇、硬脂酸、植物蜡等，其他成分尚有特女贞子苷、女贞苦苷、女贞子酸、芹黄素、甘露醇、葡萄糖、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、槲皮素和B-谷甾醇等。一、实验目的掌握三萜类化合物的提取分离原理和操作方法；掌握三萜

2、类化合物的结构和一般性质的关系；熟悉三萜类化合物的基本鉴别方法。二、仪器与试药（一）仪器RE-52旋转蒸发仪SHB-循环水式多用真空泵HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（500mL）ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）分液漏斗（125mL）（二）试药女贞子乙醇氢氧化钠盐酸氯仿pH试纸活性炭醋酐浓硫酸苯甲酸乙酯甲酸甲醇甲苯乙酸乙酯冰醋酸三、主要成分的结构与性质表91黄芩中主要成分的物理性质中英名称分子式性状熔点溶解性齐墩果酸(Oleanolicacid)CHO30483白色针状结晶（乙醇）308310C溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮和氯仿，不溶于水。乙酰齐墩果酸

3、(acetyloleanolicacid)CHO32505白色簇晶258260C溶于氯仿、乙醚、无水乙醇，不溶于水熊果酸(ursolicacid)CHO32505白色针状结晶（95%乙醇）286287C易溶于吡啶。可溶于热乙醇，微溶于苯、氯仿、乙醚，不溶于水。齐墩果酸R=H乙酰齐墩果酸R=COCH3四、实验原理1利用齐墩果酸，乙酰齐墩果酸可溶于95%乙醇的性质进行提取；2在碱性条件下水解乙酰齐墩果酸，然后酸化，用氯仿将萃取出已游离的齐墩果酸3用无水乙醇水对齐墩果酸进行重结晶。五、实验内容（一）齐墩果酸的提取分离和精制女贞子粗粉100g95%乙醇200mL回流提取1小时，过滤滤液药渣95%乙醇1

4、50mL回流提取1小时，过滤滤液药渣（弃去）减压回收乙醇至总体积约5080mL,加入10%氢氧化钠适量调pH至10-11,水浴回流20分钟，离心机离心5分钟，残渣（弃去）上清液滴加浓盐酸调pH23,用氯仿萃取3次（30、20、20mL）氯仿液残液回收氯仿至干，用无水乙醇20mL多次将残留物转溶出来，放在小烧杯中，滴加蒸馏水，产生大量沉淀，过滤，滤渣用热蒸馏水洗35次滤液沉淀（粗品）加95%乙醇约lOOmL加热溶解后，加活性炭1g回流脱色10-15分钟，过滤，在滤液中滴加蒸馏水，产生大量沉淀，过滤，用热蒸馏水洗35次滤液沉淀在沉淀中加入无水乙醇约20mL水浴加热溶解，再滴加蒸馏水，产生大量沉淀，

5、放冷析晶，过滤，抽干齐墩果酸纯品（二）鉴别实验1化学检识（1）醋酐-浓硫酸反应：取少量样品，加ImL醋酐溶解，再加5滴浓硫酸，观察颜色变化，可产生黄f红f紫f蓝等颜色变化，最后变为褐色。（2）氯仿-浓硫酸反应：取少量样品，溶于氯仿，加入浓硫酸后，观察颜色变化，可发现在氯仿层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。2薄层层析法吸附剂：青岛硅胶G以0.4%CMC-Na水溶液制板，105C活化40分钟。展开剂：（1）苯-甲酸乙酯-甲酸（5：4：1）（2）氯仿-甲醇（40：1）（3）甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（12：4：0.5）显色剂：（1）喷10%硫酸的95%乙醇溶液显色（105C加热5分钟显紫色）；（2）喷磷钼酸试液显色（110C加热10分钟显兰色）六、实验结果1记录齐墩果酸提取分离和纯化的过程。2详细记录定