实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件

1、实验七 果蝇唾腺染色体遗传育种学实验实验七 果蝇唾腺染色体遗传育种学实验一、实验目的学习剖离果蝇幼虫唾腺和压制唾腺染色体标本的方法了解和观察唾腺细胞的巨大染色体的形态特征遗传育种学实验一、实验目的学习剖离果蝇幼虫唾腺和压制唾腺染色体标本的方法遗二、实验材料 普通果蝇野生型的三龄幼虫活体遗传育种学实验二、实验材料 普通果蝇野生型的三龄幼虫活体遗传育种学实验实验原理果蝇，双翅目，2n=8果蝇三龄幼虫的唾腺细胞中，存在着巨型/多线染色体，比一般染色体大，上面带有很多横纹，易于观察。实验原理果蝇，双翅目，2n=8多线染色体：由体细胞同源染色体配对，经210-215次复制，每次复制后不分开而并列聚合在一

2、起形成的。粗约为其它体细胞染色体的200倍。果蝇染色体模式图2R2L3R3LX4着丝粒多线染色体：由体细胞同源染色体配对，经210-215次复制，果蝇染色体模式图2R2L3R3LX42R2L3R3LX4染色中心着丝粒果蝇染色体模式图2R2L3R3LX42R2L3R3LX4染色唾腺染色体的特征：染色体巨大；体细胞联会；形成染色中心；具有深浅不同、疏密相间的横纹。第IV和第I（X染色体）染色体为端着丝粒染色体第II、第III染色体为中部着丝粒染色体唾腺染色体的特征：染色体巨大；体细胞联会；形成染色中心；具有四、实验用具药品 1仪器用具：显微镜、解剖镜、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、

3、酒精灯、火柴等。2药品试剂：无水酒精、冰醋酸、1%醋酸洋红、改良品红、生理盐水（0.7%NaCl）、1N盐酸、蒸馏水。3培养基：玉米琼脂培养基四、实验用具药品 1仪器用具：显微镜、解剖镜、培养瓶、载玻幼虫培养置于1618下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即为三龄幼虫，此时虫体肥大，便于解剖，是制备唾腺染色体的最理想时期。五、实验步骤 幼虫培养置于1618下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即2.腺体剖取 载玻片 +一滴0.7%生理盐水在解剖镜下辨认头部和尾部（头部稍尖，且有一黑点即口器，不时摆动）两手各持一个解剖针，在解剖镜下一解剖针压住头部口器即黑点处，固定幼虫头部，再用另一针压住虫体后端1/

4、3部位，固定幼虫（或用尖头镊子夹住），平稳快速一拉，使口器部分断开，体内各器官从切口挤出，一对唾腺随之而出。唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处2.腺体剖取 载玻片 +一滴0.7%生理盐水唾腺位于幼虫体前 唾腺是一对透明而微白的长形小囊，呈香蕉状。唾腺侧面常有一些沫状脂肪体（不透明）附着，可用解剖针把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。如果唾腺被拉断或未被拉出，可用解剖针在头部或身体处把其挤压出来。唾腺是一对透明而微白的长形小囊，呈香蕉状。3. 解离 把载玻片上的幼虫其它部分除去，用吸水纸小心吸去生理盐水(注意吸水纸应离唾腺远些，以免吸附唾腺)，加1滴1N HCl，浸23min，使组织疏松，以便压片时细胞

5、分散，染色体散开。 3. 解离 把载玻片上的幼虫其它部分除去，用吸水4.染色 用吸水纸吸去盐酸，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干，加2滴醋酸洋红或改良品红染液，染色520min(此过程应保持腺体一直处于染液的浸泡中)4.染色 用吸水纸吸去盐酸，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干，加25.压片 换新鲜染液用吸水纸包被玻片，吸干多余染色液或用拇指在盖玻片上适当用力压片 5.压片 换新鲜染液6.观察 低倍镜下找分散好的标本移至视野中心，转高倍镜下观察对染色体分散、个体性清楚的片子，应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，以便对照模式照片辨认出不同的染色体臂。 6.观察 低倍镜下找分散好的标本实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件六、作业及思考题1.每人制1张染色体分散、横纹清晰的临时片2.绘制你在显微镜下所看到的果蝇唾腺巨染色体图，标明实际标本在观察中所能分辨的典型部位3.什么是染色中心（chromocenter）