选修1知识归纳

1、文档编码 : CS1L6R1W9T3 HY5N10G9O4V2 ZS5P8G4I2A4选修 1生物技术实践学问归纳图解果 酒 和 果 醋 的 制 作留意：留意：原理： 主要菌种是酵母菌； 要 先 清 洗 后 除 枝 梗留意：酵母菌是异养兼性原理： 主要菌种是醋酸杆菌异养需氧型 防止除去枝梗时引厌氧微生物起葡萄破旧,增加被榨汁机要清洗干净,C6H12O6C 2H5OHC02 温度： 20左右最适合酵杂菌污染的机会,同并晾干 防杂菌污染 当氧气糖源均充分时,糖醋酸时,防止葡萄汁流失 防止将果核压破 因当氧气充分、缺少糖源时,乙醇乙醛醋酸母菌繁殖,一般把握不能反复冲洗防止果核含有多种有害葡温度： 3

2、0 35；在 18 25；挑选新颖的葡萄菌种流失 萄酒风味的物质 挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵果酒果醋留意：留意： 需适时通入空气发酵装置要清洗干净,并用体积分数为70的酒精消毒发酵瓶装入葡萄汁后留有l/3 的空间 目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖,耗尽氧气后再进行酒精发酵；其次,防止发酵过程中产生的CO2 造成发酵液的溢出 如用带盖的瓶子制葡萄酒,每隔 12 h 左右将瓶盖拧松一次高考警示 ：由于醋酸菌和乳酸菌属于原 核生物,所以在利用者两类 微生物时,其环境中确定不 能加入抗生素；酵母菌在养分和氧气充分时 进行出芽生殖留意不是打开瓶盖,防杂菌污染,之后再将瓶盖拧紧目的:排出余外的气

3、体放炸裂 装入葡萄汁封闭充气口无氧环境和放杂菌污染 发酵过程中,随着酒精度数的提高,葡萄酒显现深红色因红葡萄皮的色素也进入发酵液 酒精的鉴定 :与酸性重铬酸钾呈灰绿色 对比组2mL 白酒 3mL/L 的 H2SO43 滴混匀试验组2mL 发酵液重铬酸钾 3 滴观看试管甲2mL 发酵前液3mL/L 的 H2SO43 滴混匀试管乙2mL 发酵后液重铬酸钾 3 滴观看1 （一）培养基的基本学问 微生物的试验室培养 1 培养基的养分成分养分物质定义作用主要来源及所涉及的微生物碳源凡是能供应微生物所需碳元构成生物细胞、生物体及细胞代谢产物,无机化合物： C02、NaHC0 3 等 自养生物 素的物质有些

4、能为异养生物供应能源有机化合物：糖类、脂质、花生粉饼、石油等 异养生物 氮源凡是能供应微生物所需氮元合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物,也无机化合物： N2、NH3、铵盐、硝酸盐,自养生物有机化合素的物质可为异养微生物供应能源物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等,异养生物水分生物体内含量最高的组成成良好的溶剂、细胞生活及生化反应的介质、培养基、大气、代谢产物分,分为结合水和自由水参与物质运输及参与生化反应的反应物无机盐为微生物供应大量除C、H、0细胞组成成分,生命调剂物质,自养菌的培养基、大气等环境以外的各种元素能源或其他养分来源,酶的激活剂生长因子微生物正常生长繁殖, 必不行可作为酶与核酸等的组成成分维

5、生素、氨基酸、碱基等少的微量有机物自养微生物与异养微生物所需的养分物质不同高考警示钟1 自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物,而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物,因此可依据培 养基中养分物质判定微生物的代谢类型；2 含氮无机物不但能给自养微生物供应氮源,也能作为能源物质,供应能量,如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源；2培养基的配制原就 1 目的明确；要依据微生物的种类、培养目的等挑选原料、配制培养基； 2 养分要和谐；各种养分物质要保证适当的浓度和比例；养分物质比例过低,不能中意微生物生长；浓度过高就会抑制微生物的正常生长；营养物质的浓度比 如 C/N仍会直接影

6、响某些微生物的代谢产物,如谷氨酸生产,C/N=4 1 时,菌体大量繁殖,谷氨酸产量少；而C/N=31 时,菌体繁殖受抑制,但谷氨酸合成量大； 3pH要适当；不同微生物生长所需pH 不同；如细菌pH保持在 6.5 7.5 之间；放线菌保持在7.5 8.5 之间；真菌应保持在5.0 6.0 之间；3培养基的分类及作用：培养基种类很多,作用也不同；依据不同的分类标准,可将培养基分为不同种类；划分标准培养基种类特点用途及实例物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基观看微生物的运动、分类鉴定、保藏菌种加凝固剂,如：琼脂固体培养基微生物分别、鉴定、活菌计数、化学成分自然培养基含化学成分不明确的自然

7、物质工业生产合成培养基培养基成分明确 用化学成分已知的化学物质配成 分类、鉴定用途挑选培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物培养、分别出特定微生物 如：培养酵母茵或霉菌,可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌,的生长,促进所需要的微生物的生长可在培养基中加入高浓度食盐 鉴别培养基依据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂鉴别不同种类的微生物,如可用伊红一美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌 如有,茵落或化学药品呈深紫色,并带有金属光泽 2 说明： 病毒为非细胞结构的生物体,专营活细胞寄生,目前不能利用人工培养基来培养,需接种在动植物组织中才能增殖；常用于培养病毒的

8、是活鸡胚；加入培养基中的凝固剂 如琼脂 ,一般不能被微生物利用,只起到凝固作用；挑选培养基一般只生长具有特定的微生物,鉴别培养基可以存在其他微生物,而且能鉴别特定的微生物；留意： 挑选培养基的挑选方法1在培养基中加入某种化学物质；例如,加入青霉素可以分别出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌；这里的加入是在主要养分成分完整的基础上加入；2转变培养基中的养分成分；例如缺乏氮源时可以分别出固氮微生物；石油作为惟一碳源时,可以分别出排除石油污染的微生物；3转变微生物的培养条件；例如,将培养基放在高温环境下培养,可以得到耐高温的微生物；（二）灭菌技术1无菌技术的概念在微生物培养中,获得

9、纯洁培养物的关键是防止外来杂菌入侵,其主要技术是无菌操作；无菌技术是指通过确定物理、化学的手段,防止试验室培养物被外来微生物污染；无菌技术主要围绕如何防止杂菌污染开放的；2消毒、灭菌的方法项目概念常用方法应用范畴消毒使用较为温存的物理或化学方法,仅杀死巴氏消毒法：7075水中煮 30min 或在 80水中煮 15min 一些不耐高温的物体如牛奶煮沸消毒法：在100水浴中煮沸56 min 一般物品物体表面或内部一部分对人体等有害的微化学药剂消毒法：用乙醇、氯气、漂白粉、KMnO 4 等药剂来可用来对环境、双手和衣物等消毒生物 不包括孢子和芽孢 杀死或抑制细菌生长或繁殖灭菌使用猛烈的理化因素杀死物

10、体内外全部的紫外线消毒法： 30W紫外灯照射30min 接种室灼烧灭菌法：酒精灯火焰接种工具如接种环、接种针等3 微生物,包括芽孢和孢子干热灭菌法：在160 170加热 12h 如玻璃器皿 吸管、培养皿 和金属用具高压蒸汽灭菌：压力为100 kPa ,温度为 12l 的条件下,培养基及容器的灭菌保护 15 30 min 留意：无菌操作是微生物培养过程中,防止杂茵污染的关键步骤；消毒只能毁灭或抑制养分体的活动,而不能达到完全灭菌；酒精消毒用体积分数为70% 的酒精成效最好,因浓度过高,会使菌体表面蛋白凝固成一层爱惜膜,乙醇分子不能进入其中；浓度过低,杀菌力减弱；而灭菌除杀死养分体外,仍必需杀死芽

11、孢和孢子；灭菌消毒的原理,就是通过确定理化手段,使病原茵蛋白质变性,失去生命活性；（三）微生物的纯化培养技术1常用细菌培养基蛋白胨培养基配制流程：留意：留意：溶化琼脂时要把握火力的大小并不 断搅拌,以免培养基溢出或烧焦；留意： 分装至试管时 可用高压蒸汽灭菌法 用干热灭菌法时温度 160 170 留意： 据配方运算配 制确定体积培养基 时各成分的用量 加热过程中部分水分蒸发,待琼脂 完全溶化后应补加蒸馏水,以保持 溶液的浓度 培养基的高度 不要超过试管 高度的 1/5 不能超过 180 ,否就易引起报纸等燃烧 一般是培养基先灭菌再倒平板,也可先倒 平板 ,再灭菌 运算 称量 溶化（调 PH）装

12、瓶 灭菌 倒平板留意：留意：留意：牛肉膏较粘稠,应玻棒挑取,在称 由于不同微生物适宜 倒平板时,烧杯口要通过酒精灯火焰灭菌；量纸上称量 的 pH 不同, 因此在熔 平板冷凝后要将平板倒置,以确保拿放便利, 同时防止水分蒸发,牛肉膏蛋白胨易吸潮,动作要快速 化后,必需用 NaOH 以利微生物生长,也可防止皿盖上凝结的水滴滴入培养基,影响或 HCl 来调剂 pH pH ；其次防止细菌透过皿底、皿盖的缝隙,落在培养基上；倒平板时, 不能将培养基溅在皿底与皿盖之间,以防止杂菌滋生,污染培养基2纯化大肠杆菌原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落；4 微

13、生物接种方法：1平板划线法：平板划线法中细胞的分别和稀释 过程发生在接种环在固体平板表 面上的划线和移动过程中；在线 的开头部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延长,菌数逐步削减,最终可能形成纯种的单个菌落；如 图 2稀释涂布平板法：10 倍系列稀释操作划线操作时留意：（1）用接种环取菌种之前、每次划线之前和划线终止都要进行灼烧灭菌,灼烧后要在酒精灯邻近冷却后再操作；第一次操作：杀死接种环上原有的微生物；每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端；划线终止后：杀死接种环上残存的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者 （2）划线时不要划破培养基,假如接

14、受分段划线法操作从其次次操作应总在上一次划线末端开头,首尾区不能相连；（3）操作必需始终在酒精灯火焰旁进行；涂布操作时留意：（1）配制系列梯度稀释液时,所用的试管和移液管均需灭菌,必需用无菌水配制；（2）涂布器用 70% 的酒精消毒, 余外酒精在烧杯中滴尽,沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰引燃；不要将过热的涂布器放入盛有酒精的烧杯中,一面引燃其中的酒精；5 （3）配制系列梯度稀释液和转移菌液以及涂布过程等必需都在酒精灯火焰旁进行,移液管头不能接触任何物体；3菌种的储存 对于频繁使用的菌种,可以接受临时保藏的方法；对于需要长期储存的菌种,可以接受甘油管藏的方法；留意： 菌种保藏的原理是：低温、干

15、燥和隔绝空气,使微生物代谢才能和繁殖才能降低；不同菌种的保藏方法因不同菌种而异；需氧型,必需低温有氧,而厌氧型必需低温无氧；腐生微生物可供应牛肉膏蛋白胨培养基,而寄生微生物需供应活体组织等非人工培养基,如病毒需供应活鸡胚；（三）微生物的挑选与计数（以“ 土壤中分解尿素的细菌” 为例）挑选菌株菌落计数菌种的鉴定原就：人为供应有利于目对比：将不接种的培养基置于相同温度恒温箱培养 目的 : 证明培养基是否被杂菌污染方法：检测培养基pH统计茵落数目的方法：的菌生长的条件,的变化判定1 显微镜直接计数法同时抑制或阻挡其原理：在细菌分解尿素原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下运算确定容积样品

16、中微生物数量他微生物的生长时,分泌的脲酶方法：用计数板计数；缺点：不能区分死菌与活菌；培养基的成分：尿素作为将 尿 素 分 解 为2 间接计数法 活菌计数法 惟一的氮源 挑选培氨,氨使培养基原理：当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过养基、固体培养基 碱 性 增 高 , pH统计平板上的菌落数,就能估量出样品中大约含有多少活菌；上升运算公式：每克样品中的菌株数C V M,其中, C 代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积mL ,M代表稀释倍数；操作：设置重复组,增强试验的说服力与精确性；同时为了保证结果精确,一般

17、挑选菌落数在30300的平板进行计数；菊 花 的 组 织 培 养 6 温度： 1822有利愈伤组织光照 ：在初期菊花的组织培养需光照,月季的花药培养不需光照形成 ,二者后期均需要光照 留意： 生长素和细胞分裂素的使用有利叶绿素形成和光合作用使用次序不同结果不同先生长素,后细胞分裂素：有利于细胞分裂,但不分化材料： 植物的种类、年龄、储存时间 先细胞分裂素,后生长素：细胞既分裂也分化消毒缘由： 大部分来自田间, 带有大量病毒、同时使用：分化频率提高 用量比例不同发育方向不同菊花茎段消毒：细菌所用消毒剂为体积分数为 高：利用根的分化,抑制芽的形成低：利用芽的分化,抑制根的形成 留意： 培养一株完整

18、的试管苗,必需70的酒精和质量分数为汞溶液,所使用的清洗液是无菌水；0.1的氯化适中：促进愈伤组织的生长 先进行生芽培养,然后进行生根培养,假如次序颠倒,先诱导生根,留意： 不同植株或同一植株的不同部位,所选用的消毒剂种类及浓度可能不同；培养 就不好诱导生芽了；制备 MS培养基 外植体消毒 接种 愈伤组织 胚状体 或不定芽 试管苗 移栽 炼苗 栽培脱分化 再分化成分： 无机物 大量元素、微量元素 、有机 方法： 始终在酒精 脱分化阶段只分裂；人工种子制备阶段 缘由： 因试管苗光合作用才能低,对物：糖类 最常使用的糖是蔗糖,供应 灯火焰旁进 再分化阶段既有分裂也有分化 不良环境耐受力差,确定要在

19、能源和保护渗透压 、维生素、氨基酸、灼烧灭菌；保温、保湿一段时间以增强适有机添加剂（生长因子） 、激素 留意： 将菊花茎段 应力pH：5.8 左右 插入培养基 方法： 流水清洗根部,移栽至消过毒灭菌： 高压蒸汽灭菌 时不要倒插 的蛭石或珍宝岩环境培养留意：为降低工作量、 削减误差, 可通过配制母 原理：细胞的全能性 高度分化的植物细胞,仍具有发育为完整个体的潜能 液,达到一次称量药品、多次使用； 1 缘由： 体细胞携带有本物种全部的遗传信息配制培养基时, 母液的应用应先摇匀,移 2 实现的条件： 离体状态和适宜条件 水分、无机盐、有机养分及激素、温度、pH 等 液用的移液管或量筒需清洗两次,以

20、免造 3 细胞的全能性大小与细胞种类的关系：成误差；受精卵生殖细胞体细胞；植物细胞动物细胞；分化程度低的细胞分化程度高的细胞一般的,离体的植物细胞的全能性在确定条件下可充分地表达出来；离体的动物细胞的全能性受到限制,但其细胞核的全能性借助卵细胞的细胞质可表达出来；未离体的细胞的全能性不能表达,只是在机体的调控下进行定向分化；胡 萝 卜 素 的 提 取7 一、胡萝卜素基础学问 1原理：依据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点,可实行有机溶剂萃取的方法来提取胡萝卜素；即将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡,使胡 萝卜素溶解在有机溶剂中,再蒸发出有机溶剂可获得；2萃取剂的挑选（1）有机溶剂的分类：分为水溶性（如乙醇和丙酮）和水不溶性（如石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳）两类；多数对人体有确定毒性；（2）选取萃取胡萝卜素的有机溶剂的原就 具有较高的熔点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶；萃取效率高；对人无毒、不易燃、易与产品分别、不影响产品质量 萃取胡萝卜素的有机溶剂应当具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素且不与水混溶；另外,仍要考虑对人体是否有毒性等安全问题；因乙醚 的沸点较低,苯和四氯化碳对