雷诺昔酚对去势后大鼠骨密度、血生化指标的影响

1、雷诺昔酚对去势后大鼠骨密度、血生化指标的影响【关键词】,卵巢切除术InfluenefSERralxifenenbneineraldensityandbldbiheialparaetersinvarietizedrats【Abstrat】AI:Tstudytheinfluenefralxifene(RAL),aseletiveestrgenreeptrdulatr(SER),nbneineraldensityBDlssinanellatedbneandpatbnefvarietizedrats.ETHDS:TentyfurfealeSDratseredividedint3grups(8ratsp

2、ergrup):shaperatingrup,varietizedVXgrupandtherapeutiVX+RALgrup.BilateralvarietiesereperfredinVXgrupandVX+RALgrup.Thelatterastreatedithralxifene7dafterperatin.Sixteeneeksafterperatin,allratseresarified.BDfL3L5vertebrae,prxialferalsegentandferalshaftereeasuredbydualenergyXrayabsrptietry(DEXA).L2verteb

3、raeerehistrphetriallyanalyzedandserubiheialarkersereeasuredbefreandafterdrugadinistratin.RESULTS:Seruttalaliu3.020.38l/Lvs2.240.30l/Landttalalkalinephsphatase2.3360.032kat/Lvs1.8320.028kat/LsignifiantlyinreasedinVXgrupparediththseinshagrup(P0.01,P0.05respetively).TheabveparaetersdereasedinRALgruppar

4、ediththsethevarietizedgrup2.380.39l/Lvs3.020.38l/L,1.9520.023kat/Lvs2.3360.032kat/L(P0.05).Sixteeneeksaftervariety,BDfL3L5vertebrae,prxialferalsegent0.1810.021g/2vs0.2870.025g/2andferalshaft0.1570.034g/2vs0.2600.039g/2dereasedsignifiantly(P0.01)andthetrabeularbeaethinandirregularparediththseinshagru

5、p.AftertreatentfRAL,theabveparaetersrestred(P0.05)butnttthelevelfshagrup(P0.05).NLUSIN:varietyinduesasignifiantdereasefanellatedbneassandpatbneass.RALisaneffetiveediinetinhibitbnelss,inreasetheBDflubarspine,ttalhipbneandttalbdyanddereasethebneturnver.【Keyrds】variety；steprsis;seletiveestrgenreeptrdul

6、atr；ralxifene;etablis;bnedensity【摘要】目的：研究选择性雌激素受体调节剂(SER)雷诺昔酚RAL对去势后雌性大鼠血生化及骨密度(BD)的影响.方法：将5龄未经产雌性二级SD大鼠24只，随机分为假手术(Sha)组、去势(VX)组、去势RAL(VX+RAL)组.VX+RAL组大鼠术后7d开场给药.术后16k处死各组大鼠，对各组大鼠血生化指标、BD进展检测，并进展骨组织形态学观察.结果：VX组与Sha组相比拟，血钙a2+明显增高3.020.38l/Lvs2.240.30l/L,P0.01，血碱性磷酸酶(ALP)升高2.3360.032kat/Lvs(1.8320.02

7、8)kat/L,P0.05，血磷(P)无明显差异.VX+RAL治疗组与VX组相比，血清a2，ALP均降低2.380.39l/Lvs(3.020.38)l/L,(1.9520.023)kat/Lvs(2.3360.032)kat/L,P0.05，血P无明显差异.与Sha组相比，VX组股骨近端0.1810.021g/2vs(0.2870.025)g/2、股骨干0.1570.034g/2vs(0.2600.039)g/2及腰椎BD明显降低(P0.01)；VX+RAL治疗组各部位BD高于VX组(P0.05)，但未到达Sha组程度(P0.05).结论：去势后16k大鼠松质骨、皮质骨骨量、骨组织形态计量学

8、指标均明显下降经RAL治疗后的去势大鼠松质骨、皮质骨密度、骨组织形态计量学指标得到较好维持.【关键词】卵巢切除术；骨质疏松；选择性雌激素受体调节剂；雷诺昔酚；代谢；骨密度0引言绝经后骨质疏松症pstenpausalsteprsis，P是一种严重危害中老年妇女安康的代谢性疾病，以骨转换加快，成骨与破骨失去平衡，骨量减少和骨组织显微构造受损为特点，继而引起骨骼脆性和骨折危险性增加.目前临床上主要是通过雌激素替代疗法来预防和防治P，其骨保护作用主要是通过抑制破骨细胞的增殖和活性，减缓和抑制骨吸收，促进成骨作用来实现的.但其存在体质量增加、不规那么阴道出血、乳房痛、子宫内膜增生等副作用，长期应用会增加

9、乳腺癌和子宫内膜癌的危险性1,2.雷诺昔酚(RAL)是一种选择性雌激素受体调节剂(seletiveestrgenreeptrdulatr，SER)，对骨组织具有雌激素样骨保护作用，在乳腺和子宫那么具有拮抗雌激素的作用，使用RAL预防和防治P可以防止雌激素替代疗法对机体产生的副作用.我们讨论RAL对去势后大鼠P形成过程中骨密度(BD)和血生化指标的影响.1材料和方法1.1材料5龄未经产雌性二级SD大鼠24只，体质量30025g，购自第四军医大学实验动物中心.随机分为3组：假手术(Sha)组、去势(VX)组、VX+RAL组，每组8只.组间大鼠体质量无统计学差异.所有大鼠均以30g/L戊巴比妥钠40

10、g/kg,ip麻醉，在无菌条件下手术，取背部切口.别离、结扎、摘除VX组、VX+RAL组大鼠双侧卵巢，分层缝合关闭切口.别离、提出Sha组大鼠双侧卵巢后，放回腹腔.术后7d开场将RAL片剂(美国礼来公司产品)碾碎制成浓度为0.3g/L的生理盐水悬液，按每只1g/kgd给VX+RAL组大鼠灌胃.Sha组、VX组大鼠按每只3L/(kgd)用生理盐水灌胃.术后3组大鼠均在二级环境下分笼饲养，给予标准饲料，自由摄水.3组大鼠均于术后16k后处死.各组大鼠ip麻醉，经左心室取血4L，离心3000r/in15in，取上清液作血标本，-20冰箱保存.取各组大鼠股骨、腰椎用于测量BD.取L2椎体，40g/L中

11、性甲醛固定，脱钙后常规石蜡切片，切片厚度4，HE染色.1.2方法1.2.1血液生化指标测定血清a2用邻甲酚酞络合酮比色法，血P用亚铁磷钼酸法，血碱性磷酸酶(ALP)用对硝基苯磷酸水解法，均用PB半自动生化分析仪测定.1.2.2BD测量使用Lunar公司的DPXIQ型7040双能X线吸收测量平台，通过计算机中小动物软件系统测股骨颈基底部、股骨干中点及第35腰椎中点BD.1.2.3骨组织形态计量学分析及形态学观察采用德国LEia公司550型计算机全自动图像分析系统测量参数，观察每只大鼠组织切片2张，测定骨量参数：骨小梁体积BVTV骨小梁面积髓腔和骨小梁面积100%；骨小梁平均厚度Tb.Th；皮质骨

12、平均厚度.组织形态学观察，光镜下观察L2椎体HE染色切片形态学特征.统计学处理：采取SPSS软件进展统计分析，所有测量参数均以xs表示.组间差异比拟采用方差分析及LSDt检验.2结果2.1血液生化指标VX组与Sha组相比拟，血a2值明显升高P0.01，ALP升高P0.05，血P无明显差异；VX+RAL组与Sha组相比拟，血a2，ALP值均明显升高P0.05，血P无明显差异Tab1.表1各组血液生化指标ALP，a2+，P测定值略2.2VX组与Sha组比拟术后16k皮质骨及松质骨BD均明显降低.股骨近端、股骨干、L35椎体BD均明显下降P0.01；VX+RAL组与VX组比拟，股骨颈基底部、股骨干B

13、D均明显高于VX组P0.01；VX+RAL组与Sha组比拟，股骨近端、股骨干BD均明显低于Sha组P0.01,Tab2.表2各组BD测定值比拟略2.3形态计量学和光镜下观察与Sha组比拟，VX组骨小梁体积、骨小梁平均厚度、皮质骨厚度显著下降P0.01.VX+RAL组与VX组相比，上述各参数均得到改善Tab3.表3各组大鼠腰椎骨组织形态计量学参数比拟略腰椎HE切片光镜下观察见VX组腰椎骨小梁明显稀疏，皮质骨变薄，小梁及间隙增大，局部区域骨小梁消失，对照组及治疗组腰椎骨小梁丰富，骨皮质增厚，小梁间隔较小(Fig1,2).Fig1A分别为Sha组、VX组、RAL治疗组腰椎骨小粱构造的组织学比照箭头所

14、指为骨小梁；Fig2A分别为Sha组、VX组、RAL治疗组腰椎皮质骨组织学比照箭头所指为皮质骨.3讨论SER是人工合成非甾体化合物，通过与雌激素竟争雌激素受体(ER)而发挥作用，能选择性的与骨细胞上的雌激素受体结合而抑制骨丧失.RAL是新一代SER，有良好的组织选择性，对下丘脑、乳腺和子宫内膜无刺激作用3，对骨骼及心血管系统均具有保护作用.an等4认为，RAL对骨组织的作用是由配基类型、受体类型(ERa,ER)及结合器3个因素所决定.RAL与ER结合影响ER与特异DNA互相作用动力学，进而影响基因转录；因RAL与ER结合的亲和力、结合机制、诱导结果与雌激素不同，使RAL与雌激素同ER结合后形成

15、的复合物存在构造差异，这种差异被细胞内特殊转录因子识别从而产生了与雌激素不尽一样的生物效应.ER包含两个转录构造域：AF1和AF2，两者在不同细胞的分布存在差异，RAL为AF2的拮抗剂，对AF2控制的细胞起抑制雌激素样作用；相反，在AF1占主导地位的受体中，它起协同作用.骨组织中的ER受体以AF1为主，使得RAL对成骨细胞和破骨细胞具有雌激素样作用5.研究说明6：ER与雌激素类物质结合后，激活多个位于DNA上的应答素(respnseeleent)，如雌激素应答素及RAL应答素，通过应答素来调节基因转录，影响蛋白合成.人的成骨细胞、破骨细胞及骨细胞前体上均存在ER，RAL通过ER介导，刺激成骨细

16、胞，抑制破骨细胞，调控骨的形成、吸收和骨改建.去势后大鼠血清a2+，ALP酶明显升高，说明骨形成加快.16k后的大鼠BD明显下降，与Sha组相比，腰椎BD明显下降P0.01，提示去势后松质骨骨量明显减少；股骨干BD亦明显下降P0.01，提示去势后皮质骨骨量亦明显减少.股骨近端BD较Sha组亦明显下降P0.01，提示去势后大鼠皮质骨、松质骨骨量均明显丧失，总体上说明去势后大鼠骨改建呈高转换状态，骨形成和骨吸收同时增加，但骨吸收大于骨形成，骨形成和骨吸收的失衡最终导致了骨质疏松.RAL治疗后，大鼠血清a2及ALP明显降低，与Sha组已无明显差异，说明骨形成降低；同时，各部位BD明显大于VX组，松质

17、骨、皮质骨BD大于VX组，骨小梁体积、骨小梁平均厚度、椎体皮质骨平均厚度均高于VX组P0.01，与Sha组接近，说明RAL抑制了去势大鼠的骨高转换状态，纠正了骨形成和骨吸收的失衡，使骨形成大于骨吸收.本研究显示，去势大鼠经RAL治疗3后腰椎、股骨干、股骨近端BD得到较好的维持，而未经RAL治疗的VX组大鼠BD却呈降低趋势，论证了RAL可以抑制和延缓骨质疏松的发生，对雌激素缺乏引起的骨质疏松有良好的防治作用.【参考文献】1陆叶，于丽，陈春玲，等.雌、孕激素和米非司酮对子宫内膜癌细胞的作用J.北京大学学报(医学版)，2022；3：37.LuY，YuL，henL，etalEffetsfestrgen

18、，prgestinandifepristnenendetrialarinaelllinesJ.JPekingUniv(HealthSi)，2022；3：37.2Shairer，LubinJ，TrisiR，etalenpausalestrgenandestrgenprgestinreplaeenttherapyandbreastanerriskJJAA，2000；283(4)：485-491.3eresiniG，rgantiS，RebehiI，etalAneyearfllupntheeffetsfralxifenenthyridfuntininpstenpausalenJenpause，2022；11(2)：176-l79.4anA，Herenegilddulatinft