红景天苷对3T3-L1脂肪细胞分化及糖代谢的影响

1、PAGE 6 -红景天苷对3T3-L1脂肪细胞分化及糖代谢的影响摘要：目的探究红景天苷对3T3-L1脂肪细胞分化及糖代谢的影响，对改善糖代谢的可能机制进行分析。方法1）采取比色法分析脂细胞分化程度;2）检测红景天苷干预的脂肪细胞对3H-葡萄糖的摄取情况;3）RT-PCR检测PPAR-与C/EBG-mRNA的表达。结果1）OD值：红景天苷组（0.440.12）Key words：Salidroside;3T3 cells;Cell differentiation;Sugar metabolism糖尿病的發生发展与糖脂代谢紊乱有关，10%-20%肥胖易出现糖尿病1，60%糖尿病者超重，50%被定义

2、为肥胖2。因此，肥胖是能量代谢紊乱的必然结果。红景天苷具有抗氧化作用、保护心脑血管等作用，参与成熟脂肪细胞与环境间的物质交换3，具有调控脂肪细胞分化的能力，但其机制尚未阐明。本文探究红景天苷对脂肪细胞分化和糖脂代谢的作用。1资料与方法1.1材料3T3-L1细胞株（American Type Culture Collection）、红景天苷（复旦大学药理研究室）、马来酸罗格列酮（浙江万马医药化工有限公司）、3H-葡萄糖（北京原子高科核技术应用股份有限公司）、DMEM（Gibco）、牛血清白蛋白（BSA;Gibco）、油红O（Sigma）、AMV第一链cDNA合成试剂盒（Bio Basic）和PC

3、R扩增试剂盒（上海生工公司）。1.2方法（1）3T3-L1细胞培养及分化依照文献资料4进行3T3-L1前脂肪细胞培养和诱导分化。将分化成熟的脂肪细胞用含0.2%的BSA的DMEM培养基培养12h后，分别给予1mg/L红景天苷、5mol/L罗格列酮进行干预，对照组未作任何干预。（2）检测3T3-LI脂肪细胞3H-葡萄糖摄取干预24h后，根据试剂盒说明书检测3H-葡萄糖摄取率。葡萄糖摄取率=各组/正常对照%。（3）油红O染色分析3T3-L1前脂肪细胞的分化情况干预第8天，行油红O染色：异丙醇处理，吸光度（CD）值：570nm波长检测，以定量分析分化程度。（4）RT-CRP检测PPAR-、C/EBP

4、-mRNA表达干预第8天，抽提RNA。cDNA：AMV第一链cDNA合成试剂盒逆转录。基于小鼠PPAR-、C/EBP-、-action序列（Genebank公布），设计上下游引物（表1），PCR扩增后，2%琼脂糖凝胶电泳，经Synegen图像分析系统扫描，利用Gene Tool软件进行定量分析。1.3统计学分析运用SPSS24.0软件进行分析，计数资料以（%）表示，采用方差进行检验;计量资料以均数标准差表示，符合正态分布的计量资料采用t检验，不符合正态分布的采用秩和检验;=0.05，P0.05说明存在统计学差异性。2结果2.1紅景天苷对3T3-L1脂肪细胞3H-葡萄糖摄取的影响3T3-L1脂肪

5、细胞3H-葡萄糖摄取率：空白对照组101.69%红景天苷组112.35%罗格列酮对照组185.86%（P0.05;表2），提示红景天苷能提高3T3-L1脂肪细胞3H-葡萄糖摄取情况。2.2红景天苷对细胞分化的影响OD值：红景天苷组（0.440.12）空白对照组（0.540.14）罗格列酮对照组（0.730.13）（P0.05;表3），提示红景天苷能阻滞细胞内脂质积聚，抑制前脂肪细胞向成熟细胞分化，而罗格列酮能促进脂肪细胞分化。2.3红景天苷对脂肪细胞PPAR-和C/EBP-mRNA表达的影响红景天苷对PPAR-、C/EBP-mRNA表达无明显的促进作用，而罗格列酮具有明显的促进作用（P0.05

6、;表4）。3讨论人体中，脂肪组织属能量贮备系统，具有维持机体能量代谢稳定的作用。若脂肪组织堆积如分化异常，进而诱发肥胖、胰岛素抵抗等发生。药物可影响脂肪细胞分化，对糖尿病、高血压等与肥胖、胰岛素抵抗相关疾病和（或）代谢性疾病的防治具有重要的临床意义5。罗格列酮为噻唑烷二酮类药物，具有促进脂肪细胞分化、PPAR-表达的作用，常用于胰岛素抵抗疾病的治疗。与前脂肪细胞相比，成熟脂肪细胞的表面广泛分布胰岛素受体，能表达葡萄糖转运载体Glut-4，促进葡萄糖转运，提高外周组织胰岛素的稳定性6。但是罗格列酮易加重脂肪积聚，进而增重，引起肥胖。然而，肥胖与胰岛素抵抗相矛盾。因此，探讨具能改善胰岛素功能且不增

7、加体重的防治代谢性疾病的药物具有重要意义。脂肪细胞分化是一个复杂的过程，其中有分化转录因子的作用7。PPARs、C/EBPs是调控脂肪细胞分化的主要转录因子，其表达与肥胖、糖尿病等疾病的发生发展具有重要的作用8。PPARs由3个亚型（不同基因编码）组成，分别是PPAR-、PPAR-和PPAR-。C/EBPs包括C/EBP-、C/EBP-等，其中EBP-是促进脂肪细胞分化的关键因子，促进PPAR-高水平表达，维持分化细胞的表型。红景天具有抗炎、强心、抗过氧化、降血糖等作用，促进脂肪细胞葡萄糖的摄取和利用，对糖尿病、脑缺血再灌注时自由基损伤等疾病具有显著的治疗效果。本研究显示红景天苷能抑制脂肪细胞

8、内脂质积聚，遏制脂肪细胞分化，促进葡萄糖摄取。这可能是脂肪细胞通过抑制RRAR-和C/EBP-mRNA的表达，从而抑制脂肪细胞分化，促进Glut-4转运，增强糖代谢。综上所述，红景天苷既能提高3T3-L1细胞葡萄糖摄取，又能维持体重稳定，适用于肥胖、胰岛素抵抗等相关疾病的治疗。参考文献：1BOCHENEK ML，SCH?FER K.Role of endothelial cells in acute and chronic thrombosisJ.Hamostaseologie，2022，39（2）：128-139.2田诗琪，赵慧源，张帆，等.红景天苷对东莨菪碱诱导阿尔茨海默病模型大鼠炎症因子

9、的影响J.实用临床医药杂志，2022，26（01）：26-30.3孙慧誌，田德润，孟洁，等.小鼠前脂肪细胞3T3-L1培养与四联诱导分化方法的探讨J.天津医药，2022，44（08）：993-995+1061.4刘旭，杨胜荣，王希敏.雷公藤红素对前脂肪细胞抑3T3-L1成脂分化的制作用及其机制J.山东医药，2022，61（08）：28-31.5杨旭东，石杰，杨骄霞，等.羊栖菜多糖对3T3-L1前脂肪细胞分化及其相关基因表达的影响J.中医药通报，2022，19（05）：63-66.6吴冬梅，张晓东.荷叶水提物对3T3-L1前体脂肪细胞增殖、凋亡及前体脂肪细胞、成熟脂肪细胞IL-6 mRNA、TNF-mRNA的影响J.中医研究，2022，33（09）：57-60.7宋家乐，曾榛，钱波，等.发酵糙米乙醇提取物改善3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢