沙苑子黄酮提取工艺研究

1、沙苑子黄酮提取工艺研究【摘要】目的优选沙苑子黄酮提取工艺。方法采用碱水、碱醇和乙醇提取，考察提取溶媒对沙苑子总黄酮提取的影响；采用石油醚脱脂后乙醇提取和直接乙醇提取，比拟脱脂对沙苑子总黄酮提取的影响；并采用正交设计法优选乙醇提取工艺。结果以乙醇为溶媒，提取所得总黄酮含量最高；脱脂对提取有较大影响，脱脂后乙醇提取所得沙苑子总黄酮含量较高；乙醇提取最正确工艺条件为乙醇体积分数80%，料液比为116，提取时间为1.5h，沙苑子粒度为40目。结论优选出的提取工艺具有操作简便，可行性等特点。【关键词】沙苑子；提取工艺；黄酮；正交实验沙苑子为豆科植物扁茎黄芪AstragalusplanatusR.Br的种

2、子，具有温补肝肾、固精、缩尿、益肝明目的功能；其性温而不燥和平柔润，补而不峻，平补肝肾，阴阳并补，唐代曾为上贡茶品。沙苑子主要含有黄酮类、三萜类、有机酸类、氨基酸、多肽、蛋白质、甾醇、多糖及铁、锌、锰、铜等微量元素。药理研究说明16，沙苑子具有保肝，降脂，降压，抑制血小板聚集，改变血液流变学指标，抗炎，增加非特异性特异性免疫功能、抗肝纤维化和抗肿瘤等作用，沙苑子黄酮为主要有效成分。该药平安有效，是治疗肝病很有前途的中药。为进一步开发利用沙苑子，本文以沙苑子苷A为对照品，比拟了不同溶媒对沙苑子总黄酮提取的影响，脱脂对提取的影响，并采取正交设计法优选了沙苑子总黄酮乙醇提取的工艺条件，为更好地开发和

3、利用沙苑子提供实验根据。2方法和结果2.1总黄酮含量测定72.1.1药材总黄酮含量测定供试品溶液制备：准确称取沙苑子粉末(过20目筛)2.0g,置索氏提取器中,石油醚120l回流提取4h,药渣挥干溶剂,置100l圆底烧瓶中,准确参加80%乙醇60l,称定重量,于水浴85加热回流1.5h,取出放冷称重,补充80%乙醇至原重量,混匀,放置,汲取上清液20l备用。对照品溶液制备：精细称取沙苑子苷A对照品适量，加50%乙醇制成每毫升含沙苑子苷A100g的溶液，即得。标准曲线的绘制：准确汲取沙苑子苷A对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0l分别置25l容量瓶中，50%乙醇定容，于266

4、n处测定吸收度。以沙苑子苷A对照品溶液浓度为纵坐标，吸收度为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为:=29.5688A-0.8436，r=0.9999(n=6)。结果说明，沙苑子苷A在424g/l范围内呈线性关系。含量测定：精细汲取供试品溶液0.5l,置25l容量瓶中,50%乙醇定容后,于266n处测定吸收度，以沙苑子苷A(28H3216)计算总黄酮含量。结果：本实验用沙苑子药材的总黄酮质量分数为3.56。2.1.2提取物总黄酮含量测定取沙苑子提取物80.0g，精细称定，置100l容量瓶中,加50%乙醇适量，微热使溶解,冷却后，定容至刻度。准确汲取溶液5l，置50l容量瓶中，50%乙醇定容至刻度，滤

5、过，取续滤液，于266n处测定吸收度，以沙苑子苷A(28H3216)计算总黄酮含量和提取率。2.2提取溶媒的选择2.2.1碱水提取准确称取沙苑子粗粉150.0g(40目),置圆底烧瓶中,参加2%NaH水溶液回流提取2次，2000l/次，1h，滤过，合并滤液，调pH值至中性后,减压回收溶剂,真空枯燥。测定总黄酮含量和提取率。结果见表1。表1不同溶媒对沙苑子黄酮提取的影响略2.2.2碱醇提取将溶媒改为2%NaH乙醇溶液(乙醇含量50%),同法回流提取,测定总黄酮含量和提取率。结果见表1。2.2.3乙醇提取将溶媒改为80%乙醇溶液，同法回流提取,测定总黄酮含量和提取率。结果见表1。从表1可以看出，8

6、0%乙醇提取所得提取物沙苑子总黄酮含量和总黄酮量均最高，而碱水和碱醇提取不仅总黄酮含量和总黄酮量较低，而且干浸膏均为黑褐色硬膏状。实验结果说明，以乙醇为溶媒提取为佳。转贴于论文联盟.ll.2.3脱脂对提取的影响2.3.1脱脂准确称取沙苑子粗粉150.0g(40目),置圆底烧瓶中，参加1500l石油醚回流脱脂1h后,滤过，滤渣挥干石油醚，参加80%乙醇回流提取2次，2000l/次，1h，滤过，合并滤液，减压回收溶剂，真空枯燥。测定总黄酮含量和提取率。2.3.2不脱脂按上法，直接参加80%乙醇回流提取2次，测定总黄酮含量和提取率。结果见表2。表2脱脂对沙苑子总黄酮的影响略从表2可以看出，脱脂对沙苑

7、子总黄酮提取有较大影响，石油醚脱脂后乙醇提取，提取沙苑子总黄酮百分含量和总黄酮量较高。结果说明，沙苑子总黄酮的提取应采用脱脂过程。2.4乙醇提取工艺优选2.4.1方法根据预试验结果确定沙苑子黄酮醇提工艺中考察的因素，以及各因素所取的程度范围，选定L934正交表，对乙醇浓度A，料液比B，提取时间和粒度D4个因素进展考察。见表34。准确称取沙苑子粗粉150.0g60目),置圆底烧瓶中,参加1500l石油醚回流脱脂1h，滤过，药渣挥去石油醚后,按正交实验表34的条件回流提取2次，滤过，合并滤液，减压回收溶剂，真空枯燥。测定总黄酮含量和总黄酮量。2.4.2结果与分析结果见表34。表3因素程度，表4沙苑

8、子总黄酮提取实验及结果分析略。根据表4，由极差分析结果得知，对总黄酮量：各因素的主次分别为DBA，最正确条件为:A3B32D3；对总黄酮含量：各因素的主次分别为ADB,最正确条件为A3B32D3。综合这两个指标，并考虑到药材粒度太小过滤困难等因素，得出的最正确条件为A3B32D2，即乙醇体积分数为80%，料液比为116，提取时间为1.5h，粒度为40目，对总黄酮含量影响最小的是因素，把因素作为误差相处理，以总黄酮量为指标进展方差分析。结果见表5。表5方差分析结果略2.4.3验证性实验根据上述结果所得乙醇提取最正确工艺条件：A3B32D3，即乙醇浓度为80%,料液比为116，提取时间为1.5h，

9、粒度为40目。为了验证工艺的稳定性，对最正确工艺条件进展了3次验证实验。结果见表6。表6重复性实验结果略由表6可知，所得乙醇提取最正确工艺条件的重复性较好，平均总黄酮含量为5.13，提取率为96.1，优化工艺较为理想。3讨论本研究结果，脱脂对沙苑子总黄酮的提取有较大影响，脱脂后沙苑子黄酮提取率明显进步；对提取溶媒的考察，结果乙醇提取优于碱水和碱醇提取；通过正交实验优选的乙醇提取的工艺条件为乙醇体积分数为80%，料液比为116，提取时间为1.5h，沙苑子粒度为40目，优选工艺具有较好的重复性。黄酮类成分大多具有酚羟基，因此可用碱性水如碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化钙水溶液等或碱性稀醇50的乙醇浸出。本实验结果碱水及碱醇提取法效率较低，可能与沙苑子黄酮的构造有关