绞股蓝对小鼠皮肤衰老的形态学影响

1、绞股蓝对小鼠皮肤衰老的形态学影响【关键词】绞股蓝;衰老;皮肤;形态学;图像分析皮肤位于体表，是机体衰老过程中最易显露的器官。因此，预防和延缓皮肤衰老已成为生命科学研究的热点之一1。近年研究证明:绞股蓝FiveleafGynsteaHerb含有丰富的人参皂甙及多种人体必需的氨基酸和微量元素，具有益气健脾、补肾温阳、延缓衰老、抗疲劳、养心安神、滋补强壮、解毒等多种药理功能，对多种疾病有较好疗效。但对于外用绞股蓝是否能引起皮肤衰老的形态学改变方面报道不多，本实验对此进展了初步探究。1实验材料与方法1.1实验动物及分组方法安康昆明种12月龄小鼠60只，体重4045g。随机分为3组:对照组、绞股蓝低剂量

2、组A组、绞股蓝高剂量组B组，每组20只。每组小鼠均雌雄各半。实验所用动物均由沈阳医学院实验动物中心提供。动物按性别及组别分笼饲养。在一样的自然条件下，常规饲食饮水，适应性饲养后开场进展实验。1.2实验药物及实验方法市售绞股蓝购于沈阳同仁堂药房经常规蒸馏水温浸法提获得试液0.3g生药/l，置4冰箱备用，实验前稀释成所需浓度，然后与赋型剂按11比例混合制成绞股蓝霜剂。赋型剂选用友谊雪花膏上海日用化学品厂消费。对照组外涂赋型剂，A组和B组分别外涂参加赋型剂的绞股蓝霜剂，其浓度分别为4%、16%根据实验动物学及中药药理学，按成人用量的9.3倍进展计算。实验前用剃毛器给小鼠背部脱毛33后涂抹绞股蓝霜剂，

3、保鲜膜保护2h，每日一次，每次0.5g，共计40d。1.3标本取材及制备将各组小鼠于第41d用剃毛器脱去所有小鼠背部皮肤的毛，面积为33;摘眼球放血处死，取背部脱毛处全层皮肤，面积为23大小，10%中性甲醛液中固定，石蜡包埋，常规切片，片厚6，H-E染色;弹性染色采用Eigerts间苯二酚-碱性品红染色法;胶原纤维染色采用allry-HEIdenhains改进法2。1.4统计学处理所有数据均通过SPSS11.5软件进展方差分析和q检验，各组实验参数以xs表示。2结果与分析2.1镜下观察形态学变化观察对照组，衰老皮肤的表皮层改变表现为细胞层数减少，表皮与真皮交界平坦，真皮乳头数减少。真皮层的改变

4、较明显，真皮厚度变薄，胶原总量减少，胶原纤维细长，走向平直，排列疏松。弹性纤维数量减少，弹性纤维断裂，卷曲，排列不规那么。与对照组比拟，A组小鼠表皮变厚，真皮层胶原纤维交织成网;弹性纤维增多，纤维细长，弯曲，分布于胶原纤维之间。与对照组比拟，B组小鼠表皮细胞层数增加，真皮层显著变厚，胶原纤维粗大，排列严密，呈波浪状;弹性纤维总面积增加，弹性纤维细长，弯曲，交织成网。转贴于论文联盟.ll.2.2观测结果分析小鼠皮肤的组织学改变，经计算机图像数字化分析系统德国KNTRN公司分析，各项观测结果如表1所示。与对照组比拟，A组、B组的表皮厚度、真皮厚度和弹性纤维总面积均有改变。A组与对照组比拟皮肤组织形

5、态虽有改变，但差异无显著性P0.05。B组的表皮厚度、真皮厚度和弹性纤维总面积比拟对照组改变较大，结果差异具有显著性P0.05，说明高剂量绞股蓝可以使胶原纤维合成增加，弹性纤维变性减少。表1不同组别表皮厚度、真皮厚度、弹性纤维总面积观测结果略注:1与对照组比拟，经方差分析和q检验，P0.053讨论国内外学者从不同学科角度出发，对衰老机制进展了深化的探究，提出了很多学说，如交联学说、自由基学说、线粒体DNA损伤学说、衰老的端粒学说、基因学说等3。皮肤衰老的交联学说认为皮肤的老化与真皮组织中胶原的交联改变有关。由于年龄增加导致成纤维细胞分泌胶原的才能下降，而且，老化时胶原的交联增加对成纤维细胞的功

6、能产生抑制作用，这种互相作用，加速了胶原老化的进程，从而加快了皮肤老化的发生和开展，老年人因此出现皮肤松弛，皱纹、缺乏弹性等4。本实验结果显示，小鼠每日外涂高剂量绞股蓝霜剂皮肤真皮层增厚，胶原纤维总量增加，排列严密，弹性纤维增多，细长，交织成网，断裂减少。其原因可能与成纤维细胞功能的改善有关。而另外一些研究说明，随着年龄的增加，表皮细胞表现出与年龄相关的集落形成才能降低，对分裂原的反响性下降和细胞不能释放促细胞生长因子的特点5。Anthny6等通过实验也观察到表皮层的基底层细胞有明显的异形性改变。但本实验仅观察到皮肤表皮层增厚，基底层细胞无特异性变化。今后实验可选择使用更具有特异性的染色方法以

7、及在电镜下观察细胞器的改变情况。绞股蓝为葫芦科植物绞股蓝的全草。为绞股蓝属多年生草质藤本植物。绞股蓝的药性应属于平性偏温，归经:肺、脾、肾。其功能主要包括:益气健脾、补肾温阳、延缓衰老、抗疲劳、养心安神、滋补强壮、解毒等7。绞股蓝的主要药效成分为绞股蓝皂甙。其化学成分复杂，包括了80余种人参二醇型三萜皂苷、10余种三萜皂苷类成分8及多种氨基酸和微量元素。在本实验中终究是何种成分发挥主要作用，其药理作用如何，尚需进一步研究。【参考文献】1张艺，杨恬.皮肤抗衰老研究进展J.中国老年学杂志，2001，214:320-322.2刘培辉.病理染色技术.第2版，北京:人民卫生出版社，2000.56-61.3王桔红，谢宗平，陈文.衰老机理及抗衰老研究进展J.河西学院学报，2022，192:94-98.4吴景东，李德新.绞股蓝延缓大鼠皮肤衰老作用的实验研究J.中医药学刊，2022，247:1226-1227.5关英杰，金锡鹏.皮肤衰老研究进展J.中国老年学杂志，2022，236:396-397.6AnthnyV，BenedettD.TheenvirnentandskinagingJ.l