紫外-可见分光光度法标准操作规程

1、紫外-可见分光光度法标准操作规程1 编制依据：中华人民共和国药典2005年版（二部）2 定义：紫外可见分光光度法是基于被测物质在紫外光区、可见光区的电磁辐射的选择性吸收现象，对该物质进行定性或定量分析的方法。 3 原理：紫外可见分光光度法是分子与原子外层电子能级跃迁对辐射的吸收，属于分子吸收光谱法。适用范围：凡具有芳香环或共轭双键结构的有机物，根据在特定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。检验操作方法5.1 仪器及用具紫外-可见分光光度计吸收池擦镜纸5.2 操作方法5.2.1 准备5.2.1.1 根据测量的波段范围，用拨杆选择适当光源（195360nm用氘灯，360

2、800nm用钨灯）。5.2.1.2 转动波长手轮，使波长指示器置于测试波长。5.2.1.3 根据需要将光谱带手轮置适当位置5.2.1.4 根据测量的波段范围，选择合适的比色皿（195350nm用石英比色皿，350800nm用石英比色皿或玻璃比色皿）。5.2.1.5打开试样室盖5.2.1.6开启电源 按POWER按钮开关，开启总电源，微机显示屏亮。 点燃钨灯：按下W-按钮开关，按钮上指示灯亮。 点燃氘灯：按下-按钮开关，按钮上指示灯亮，然后再按住DSTART按钮数秒，当按钮上指示灯亮后立即释放按钮。如果氘灯老化，按住按钮的时间应相当适当延长。（根据测量需要，可以只点燃一种灯。） 注：开启总电源后

3、，微机面板上指示灯亮，显示屏出现闪耀的暗电流值，提示清除。清除暗电流方法：将试样室盖开足，接触内部的微机开关，暗电流即为零。若暗电流超出-5.0+5.0范围，可用螺丝刀适当调节电源面板上的100%T调节器，然后再用上法清除暗电流。在测量过程中如果发现暗电流漂移不为零，皆可用此法清除暗电流。5.2.1.7 关闭试样盖，拉动拉杆使1#试样槽进入光路，调节100%T/OA手轮，使显示屏显示“100.0”。5.2.1.8 仪器预热30分钟5.2.2 按各品种项下的规定，配制对照品溶液和供试品溶液，所用的空白，除另有规定外，系指同体积的溶剂代替对照品溶液或供试品溶液，并用相同方法处理。5.2.3 测量吸

4、光度A5.2.3.1 按MODE键，使A指示灯亮。5.2.3.2 打开试样室盖，观察暗电流，若不为零，则清除。5.2.3.3 将参比溶液放入1#试样槽，待测溶液等放入其他槽。5.2.3.4 关闭试样室盖，使1#槽进入光路，调节100%T/OA手轮，使显示屏读数为“100.0”。 5.2.3.5 拉动拉杆，使待测溶液进入光路，显示屏读数为待测溶液吸光度A值，记录数据。6 注意事项6.1 除另有规定外，测定时应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，并在规定的吸收峰波长2nm以内处再测几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确。6.2 一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.30.7之间的误差较小。6.3 按测定波长选用吸收池（石英或玻璃），使用前用擦镜纸擦净透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨损），取吸收池时，拿毛玻璃的两面，使用后及时用水或测定溶剂冲洗干净，晾干后，防尘保存。6.4 所用吸收池，使用前应先配对试验并用被测溶液冲洗23次，以保证被测溶液浓度不变。6.5 测定