补阳还五汤及拆方预处理对MIRI家兔氧化指标及心肌酶的影响

1、补阳还五汤及拆方预处理对MIRI家兔氧化指标及心肌酶的影响【摘要】观察补阳还五汤及拆方对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法40只家兔随机分为5组：假手术组、模型组、补阳还五汤组、补气组、活血通络组。分别预处理1周后，结扎左冠状动脉前降支建立心肌缺血再灌注损伤模型。测定血清中肌酸激酶K、乳酸脱氢酶LDH、超氧化物歧化酶SD、丙二醛DA的含量。结果与模型组比拟，各用药组血清K、LDH及DA含量明显降低P0.01，血清SD的活性显著升高，且补阳还五汤组作用最明显P0.05。结论补阳还五汤及拆方可去除氧自由基，减轻心肌缺血再灌注损伤，补阳还五汤组的疗效明显优于拆方组。【关键词】补阳还五汤；拆方；缺血再

2、灌注；氧化指标；心肌酶本研究旨在观察补阳还五汤及拆方对IRI家兔氧化指标、心肌酶的影响，讨论该方对IRI的保护机制及其配伍规律，从而为临床用药提供可靠的理论根据。1材料与方法1.1药物与试剂补阳还五汤：以?医林改错?原方所载的药味和配方比例，按每钱以3换算：生黄芪120，当归6，赤芍4.5，地龙、桃仁、红花、川芎各3，60kg人临床1日剂量。浸泡，煎煮，浓缩成160%的液体。补气液：黄芪120。浸泡、煎煮，浓缩成120%的液体。活血通络液，即补阳还五汤去黄芪。浸泡、煎煮，稀释成30%的液体。以上药物均购自沧州市同仁堂药店。DA、SD、LDH、K试剂盒均购于南京建成生物制品研究所。李淑贞，等:补

3、阳还五汤及拆方预处理对IRI家兔氧化指标及心肌酶的影响1.2实验动物安康新西兰大白兔40只，雌雄兼用，体重22.5kg，河北省实验动物中心提供，动物合格证号：809093。1.3实验方法1分组与给药：40只家兔，自由饮水进食，饲养于1822明暗各12h的清洁级动物实验室内，喂养一周后，随机分为5组，每组8只：假手术组、模型组、补阳还五汤组、补气组、活血通络组。实验开场每天行相应药物灌胃：补阳还五汤组：16g/kgd；补气组：12g/kgd；活血通络组：3g/kgd；模型对照组及假手术组分别给予等量生理盐水灌胃。各组1次/d灌胃，每次用药体积均按10l/kg计算，连续7d。2模型制备：参照张氏方

4、法1复制家兔心肌缺血再灌注模型：末次灌胃1h后，经外耳缘静脉注射25%乌拉坦4l/kg麻醉动物，仰卧位固定在兔台上，沿兔的胸部正中线切开皮肤，钝性别离后紧靠胸骨左缘剪断24肋软骨，用小开胸器撑开胸腔切口，一方面加压止血，一方面翻开手术视野，可见搏动的心脏，剪开心包，用止血钳将左心耳提起，用持针器将小弯针在冠状动脉前降支LAD根部离冠状动脉起始约35穿一丝线，深度约2，尽量减少对心肌的创伤，稳定15in，放置医用硅胶管直径2后一起结扎。持续40in后放松结扎线，恢复灌流。结扎后供血区心肌部分青紫，心电图ST段上抬，提示缺血模型复制成功；40in后放松结扎线部分心肌反响性充血，ST段下移，说明再灌

5、注模型复制成功。假手术组胸部切开，仅在冠状动脉下方穿线，而不进展结扎，其他操作同模型对照组。3检测指标及方法：a心电图EG的描记，将针型电极插入兔四肢，全实验过程连续观察导联心电图的变化。b生化指标测定实验完毕后由颈总动脉抽取血液4l，4、3000r/in离心10in，提取上清液。用SD试剂盒、K试剂盒、DA试剂盒和LDH试剂盒，分别测定血清中相应酶的活性或含量。步骤完全按照试剂盒说明书操作。DA采用硫代巴比妥酸法TBA测定，SD含量采用黄嘌呤氧化酶法测定。1.4统计学处理所有数据均用均数标准差xs表示，多组间比拟用单因素方差分析和q检验。全部数据采用SPSS12.0统计软件分析。转贴于论文联

6、盟.ll.2结果2.1各组EG的变化假手术组EG在整个实验阶段较平稳，模型组当结扎冠状动脉时可见ST段均有不同程度的弓背上抬，T波高尖，呈急性心肌缺血图形，再灌注即刻ST段抬高较缺血更明显，部分出现室性早搏。而各治疗组在结扎冠状动脉即刻、10in时EG的变化与模型组无明显差异，但随结扎时间延长及血供的恢复，上抬的ST段明显下降，尤以补阳还五汤组最为显著。2.2对心肌缺血再灌注兔K和LDH活性的影响与假手术组比拟，模型组家兔结扎冠状动脉40in及再灌注90in后血清K、LDH含量明显升高P0.01；经药物预处理后，各治疗组血清K、LDH含量明显下降，与模型组比拟有显著性差异P0.01；与补阳还五

7、汤组比拟，补气组、活血通络组血清K、LDH含量明显上升P0.05，活血通络组上升幅度最大，但补气组、活血通络组之间比拟血清K、LDH含量无显著性差异P0.05，见表1。表1各组兔心肌缺血再灌注后血清K和LDH活性的测定结果略与假手术组比拟，P0.01;与模型组比拟，*P0.01;与补阳还五汤比拟，P0.05表2各组兔血清DA含量、SD活性测定结果略与假手术组比拟，P0.01;与模型组比拟，*P0.01，*P0.05;与补阳还五汤比拟，P0.052.3对心肌缺血再灌注兔血清DA含量、SD活性的影响与假手术组比拟，模型组家兔结扎冠状动脉40in及再灌注90in后血清DA含量明显升高，SD活性明显降

8、低P0.01；经药物预处理后，各治疗组血清DA含量明显下降，SD活性明显升高，与模型对照组比拟有显著性差异P0.01，P0.05；与补阳还五汤组比拟，补气组、活血通络组血清DA含量明显上升，SD活性明显降低P0.05，活血通络组尤其显著，但补气组、活血通络组之间比拟血清DA含量及SD活性无显著性差异P0.05。3讨论本实验结果显示，补阳还五汤及拆方均能使缺血再灌注损伤兔的血清K、LDH、DA含量明显低于模型组，血清SD的活性显著高于模型组P0.01，且补阳还五汤总方组疗效优于其拆方补气组和活血通络组P0.05，但补气组、活血通络组之间比拟无显著差异。实验说明，补阳还五汤及拆方可通过去除氧自由基、对抗脂质过氧化反响来减轻心肌缺血再灌注损伤，且总方的作用明显优于单纯益气和活血的方法，正应方剂学“整体取性原理2，即“药有